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间充质干细胞外泌体调节哺乳动物雷帕霉素靶点/p70核糖体蛋白S6激酶/盘卷肌球蛋白样Bcl-2-相互作用蛋白通路改善糖尿病肾病大鼠肾损伤的机制研究
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作者 吴莉莉 林景涛 +3 位作者 张远成 钟佩敏 唐劲松 王海波 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第10期51-57,共7页
目的探讨间充质干细胞外泌体(MSC-EVs)通过调节哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(S6K1)/盘卷肌球蛋白样Bcl-2-相互作用蛋白(Beclin 1)通路改善糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤的机制。方法采用高脂饮食联合腹腔链脲佐菌素(STZ... 目的探讨间充质干细胞外泌体(MSC-EVs)通过调节哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(S6K1)/盘卷肌球蛋白样Bcl-2-相互作用蛋白(Beclin 1)通路改善糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤的机制。方法采用高脂饮食联合腹腔链脲佐菌素(STZ)注射的方法建立SD大鼠DN模型,随机分为模型组、MSC-EVs组、MSC-EVs+MHY1485(mTOR激活剂)组,每组12只。另取12只SD大鼠以正常饲料喂养6周后,腹腔注射同等剂量柠檬酸钠溶液作为对照。以MSC-EVs和MHY1485分组处理后,检测大鼠血糖及肾功能指标[血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、尿微量白蛋白(UmALB)]水平。采用苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠肾组织病理形态;采用免疫组化检测各组大鼠肾组织mTOR/S6K1/Beclin 1通路相关蛋白表达;采用蛋白免疫印迹法检测各组大鼠肾组织mTOR/S6K1/Beclin 1通路及自噬相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠肾组织形态发生损伤,血糖、BUN、Scr、UmALB、p-mTOR及p-S6K1相对阳性表达、p-mTOR/mTOR、p-S6K1/S6K1显著升高(P<0.05),微管相关蛋白1A/1B轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin 1蛋白表达、Beclin 1相对阳性表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,MSC-EVs组大鼠肾组织形态损伤减轻,血糖、BUN、Scr、UmALB、p-mTOR及p-S6K1相对阳性表达、p-mTOR/mTOR、p-S6K1/S6K1显著降低(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin 1蛋白表达、Beclin 1相对阳性表达显著升高(P<0.05);与MSC-EVs组相比,MSC-EVs+MHY1485组大鼠肾组织形态损伤加重,血糖、BUN、Scr、UmALB、p-mTOR及p-S6K1相对阳性表达、p-mTOR/mTOR、p-S6K1/S6K1显著升高(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin 1蛋白表达、Beclin 1相对阳性表达显著降低(P<0.05)。结论MSC-EVs可增强自噬,降低DN大鼠血糖、SCr、BUN和尿蛋白水平,减轻肾组织损伤,其机制可能与抑制mTOR/S6K1/Beclin 1通路激活有关。 展开更多
关键词 间充质干细胞外泌 哺乳动物雷帕霉素靶点 p70核糖蛋白S6激酶 盘卷肌球蛋白样Bcl-2-相互作用蛋白 糖尿病肾病 肾损伤
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Centrobin与BRCA2蛋白间相互作用及其细胞定位 被引量:5
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作者 薛丽 杨芳 +3 位作者 张贺龙 赵锦荣 张文红 白玉杰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1017-1023,共7页
为分析乳腺癌易感基因2(breast cancer susceptibility gene2,BRCA2)蛋白与中心体BRCA2相互作用蛋白(centromal BRCA2interacting protein,centrobin)间相互作用及其细胞定位的关系,探讨二者功能上的联系,本研究采用哺乳细胞双杂交... 为分析乳腺癌易感基因2(breast cancer susceptibility gene2,BRCA2)蛋白与中心体BRCA2相互作用蛋白(centromal BRCA2interacting protein,centrobin)间相互作用及其细胞定位的关系,探讨二者功能上的联系,本研究采用哺乳细胞双杂交实验检测体内结合并初步判定BRCA2分子上的结合区域 免疫共沉淀实验进一步验证其体内结合活性,GST-pulldown法检测其体外结合活性,免疫组织化学染色观测BRCA2蛋白的细胞定位及在有丝分裂各期centrobin的细胞定位.结果显示,BRCA2与centrobin间存在体内和体外结合,且BRCA2分子的结合区域主要位于2393-2952氨基酸残基处 外源表达BRCA2定位于中心体,在有丝分裂各时相centrobin均定位于中心体.BRCA2与centrobin在体内形成复合物,并存在直接物理结合作用,二者存在细胞空间定位的一致性.该结果为进一步研究BRCA2在中心体复制中的调控作用提供了线索. 展开更多
关键词 中心 乳腺癌易感基因2 中心体的brca2相互作用蛋白 有丝分裂
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一种新的中心体蛋白质TACP1与有丝分裂激酶Nek2A相互作用的研究
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作者 朱园园 蓝建平 +3 位作者 余建 来晓瑜 曾芬芳 黄河 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2007年第4期337-342,共6页
目的:研究一种新的中心体蛋白TACP1蛋白与有丝分裂激酶Nek2A在有丝分裂期的相互作用关系。方法:在大肠杆菌中表达和纯化的Nek2A305-446蛋白与293T细胞中表达的TACP1蛋白,进行体外pull-down实验;TACP1和Nek2A两种质粒共转染293T细胞,用TA... 目的:研究一种新的中心体蛋白TACP1蛋白与有丝分裂激酶Nek2A在有丝分裂期的相互作用关系。方法:在大肠杆菌中表达和纯化的Nek2A305-446蛋白与293T细胞中表达的TACP1蛋白,进行体外pull-down实验;TACP1和Nek2A两种质粒共转染293T细胞,用TACP1多抗进行免疫共沉淀实验;Hela细胞共转TACP1和Nek2A,利用间接免疫荧光的方法在荧光显微镜下观察两种蛋白的亚细胞定位。结果:TACP1条带可以出现在大肠杆菌中表达和纯化的Nek2A305-446泳道中,而对照组中无TACP1条带。TACP1抗体可以将细胞裂解液中的Nek2A蛋白连同TACP1蛋白一起沉淀下来,而对照组免疫前的兔血清则不能将TACP1或Nek2A沉淀下来。在Hela细胞有丝分裂中期,TACP1和Nek2A都呈点状定位于中心体,两者信号叠加后也重合。结论:中心体蛋白TACP1在体内、体外能与有丝分裂激酶Nek2A相互作用,两者在细胞有丝分裂期都定位于中心体。 展开更多
关键词 有丝分裂 HELA细胞 中心 中心蛋白 Nek2A TACP1
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端粒酶卡扎尔体蛋白1和PIN2/TERF1相互作用端粒酶抑制剂1在乳腺浸润性导管癌患者中的表达及临床意义
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作者 杨海林 李炯 +5 位作者 吴慧 肖琪 何丽 李斓 周洪亮 王琦 《癌症进展》 2023年第12期1315-1318,共4页
目的 探讨端粒酶卡扎尔体蛋白1(TCAB1)和PIN2/TERF1相互作用端粒酶抑制剂1(PINX1)在乳腺浸润性导管癌患者中的表达及临床意义。方法 选取45例乳腺浸润性导管癌患者和45例乳腺纤维腺瘤患者,收集乳腺浸润性导管癌组织和乳腺纤维腺瘤组织,... 目的 探讨端粒酶卡扎尔体蛋白1(TCAB1)和PIN2/TERF1相互作用端粒酶抑制剂1(PINX1)在乳腺浸润性导管癌患者中的表达及临床意义。方法 选取45例乳腺浸润性导管癌患者和45例乳腺纤维腺瘤患者,收集乳腺浸润性导管癌组织和乳腺纤维腺瘤组织,采用免疫组化染色法检测TCAB1和PINX1的表达情况。比较乳腺浸润性导管癌组织与乳腺纤维腺瘤组织中TCAB1和PINX1的表达情况,比较不同临床特征乳腺浸润性导管癌患者乳腺浸润性导管癌组织中TCAB1和PINX1的表达情况,采用Spearman相关分析法分析乳腺浸润性导管癌组织中TCAB1与PINX1表达的相关性。结果 乳腺浸润性导管癌组织中TCAB1高表达率明显高于乳腺纤维腺瘤组织,PINX1高表达率明显低于乳腺纤维腺瘤组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。无淋巴结转移、组织学分级为Ⅱ级的乳腺浸润性导管癌患者乳腺浸润性导管癌组织中PINX1高表达率分别明显高于淋巴结转移、组织学分级为Ⅲ级的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。乳腺浸润性导管癌组织中TCAB1与PINX1的表达呈负相关(r=-0.328,P=0.028)。结论 乳腺浸润性导管癌患者中TCAB1高表达率较高,PINX1高表达率较低,二者的表达呈负相关,且PINX1表达与淋巴结转移情况和组织学分级密切相关。 展开更多
关键词 乳腺癌 端粒酶卡扎尔蛋白1 PIN2/TERF1相互作用端粒酶抑制剂1
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柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白EtRON2_(L2)特性与功能初步分析
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作者 刘曼玉 朱顺海 +7 位作者 赵其平 贾刘数 肖克 赵焕之 于钰 黄兵 韩红玉 董辉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期1-10,共10页
利用RT-PCR、间接免疫荧光实验、免疫印迹实验、抗体中和实验以及BiFC等方法对柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2同源分子—Et RON2_(L2)的特性和功能进行研究。结果发现Et RON2_(L2)氨基酸序列与常规的Et RON2仅有26.63%的同源性,mRNA水... 利用RT-PCR、间接免疫荧光实验、免疫印迹实验、抗体中和实验以及BiFC等方法对柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2同源分子—Et RON2_(L2)的特性和功能进行研究。结果发现Et RON2_(L2)氨基酸序列与常规的Et RON2仅有26.63%的同源性,mRNA水平在第二代裂殖子中最高,而蛋白水平在第二代裂殖子和子孢子阶段最高;Et RON2_(L2)在游离的第二代裂殖子和子孢子阶段主要分布于胞质,而在入侵后子孢子中主要分布于虫体表面;抗rEt RON2_(L2)多克隆血清处理组明显抑制子孢子入侵细胞;Et RON2_(L2)与EtAMA3之间存在互作关系。本研究为探究Et RON2_(L2)在球虫入侵过程中的作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 棒状颈部蛋白2 相互作用
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老年原发性肝癌患者癌组织中FoxO1、SREBP2及中心体蛋白55表达特点及意义 被引量:2
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作者 王建峰 王军 +2 位作者 高姗 杨春艳 杜佳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期2357-2360,共4页
目的探讨老年原发性肝癌患者癌组织中叉头转录因子O家族(FoxO)1、胆固醇调节原件结合蛋白(SREBP)2及中心体蛋白55表达特点及意义。方法选取老年原发性肝癌患者75例,收集患者性别、年龄、肝硬化情况、肿瘤直径、分化程度、肿瘤数量、病... 目的探讨老年原发性肝癌患者癌组织中叉头转录因子O家族(FoxO)1、胆固醇调节原件结合蛋白(SREBP)2及中心体蛋白55表达特点及意义。方法选取老年原发性肝癌患者75例,收集患者性别、年龄、肝硬化情况、肿瘤直径、分化程度、肿瘤数量、病理类型、TNM分期情况、门静脉侵袭情况;术中采集肝癌组织标本和距离肝癌病灶边缘约5 cm的癌旁正常组织标本,免疫组化法检测FoxO1、SREBP2及中心体蛋白55表达。出院后进行3年随访,记录患者生存情况。结果肝癌组织中FoxO1蛋白阳性率明显低于癌旁组织,SREBP2蛋白、中心体蛋白55阳性率明显高于癌旁组织(P<0.01)。FoxO1蛋白、SREBP2蛋白、中心体蛋白55阳性率在不同肿瘤直径、分化程度、肿瘤数量、病理类型、TNM分期、门静脉侵袭的老年原发性肝癌患者间比较差异有统计学意义(P<0.01)。FoxO1阴性者3年生存率明显高于FoxO1阳性者(P<0.01);SREBP2、中心体蛋白55阳性者3年生存率明显高于SREBP2、中心体蛋白55阴性者(P<0.01)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,FoxO1、SREBP2、中心体蛋白55单独和联合检测对老年原发性肝癌患者3年生存情况具有较高的预测价值(P<0.05);其中联合检测的预测价值最高,灵敏度、阳性预测值明显高于各指标单独检测。结论老年原发性肝癌患者癌组织中FoxO1低表达,SREBP2及中心体蛋白55高表达,与临床病理特征及预后相关,联合检测可用于预后评估。 展开更多
关键词 原发性肝癌 叉头转录因子O家族1 胆固醇调节原件结合蛋白2 中心蛋白55
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EIF2AK2和NLRP3相互作用影响细胞分泌IL-1β的研究 被引量:5
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作者 鞠小丽 王强 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第11期1565-1568,共4页
目的研究真核细胞翻译起始因子2AK2(EIF2AK2)蛋白对Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症体激活及细胞分泌IL-1β的影响。方法在HEK-293细胞中,通过转染凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、NLRP3、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和促白细胞介... 目的研究真核细胞翻译起始因子2AK2(EIF2AK2)蛋白对Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症体激活及细胞分泌IL-1β的影响。方法在HEK-293细胞中,通过转染凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、NLRP3、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和促白细胞介素-1β(pro-IL-1β)基因构建NLRP3炎症体,并检测EIF2AK2蛋白过表达对细胞分泌炎症性细胞因子IL-1β的影响;通过免疫共沉淀研究EIF2AK2蛋白和NLRP3蛋白相互作用。最后在人单核THP-1细胞中通过siRNA干扰验证EIF2AK2对IL-1β分泌水平的影响。结果在HEK-293细胞中,过表达EIF2AK2蛋白能激活NLRP3炎症体后诱导细胞分泌IL-1β,并且IL-1β分泌水平随EIF2AK2表达水平提高而增加。免疫共沉淀结果显示EIF2AK2蛋白能和NLRP3蛋白发生相互作用。THP-1细胞中siRNA干扰抑制EIF2AK2表达后发现细胞分泌IL-1β减少。结论 EIF2AK2蛋白能调控NLRP3炎症体的激活从而影响细胞分泌促炎症因子IL-1β。 展开更多
关键词 NLRP3炎症 EIF2AK2 IL-1β分泌 蛋白相互作用
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基于模体中心结构的蛋白质复合物识别算法 被引量:1
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作者 夏雪飞 王铭杰 吴佳楠 《吉林大学学报(理学版)》 CAS 北大核心 2021年第6期1504-1510,共7页
基于蛋白质相互作用的网络有明显模块化特征,其对预测蛋白质功能、解释特定的生物进程具有重要作用,网络模体是复杂网络演化的重要拓扑结构,其代表了复杂系统中的重要功能单元,具有进化保守性的特性,提出一种新的基于网络模体为核心节... 基于蛋白质相互作用的网络有明显模块化特征,其对预测蛋白质功能、解释特定的生物进程具有重要作用,网络模体是复杂网络演化的重要拓扑结构,其代表了复杂系统中的重要功能单元,具有进化保守性的特性,提出一种新的基于网络模体为核心节点组的蛋白质复合物识别算法.该算法根据蛋白质相互作用网络的拓扑特性,将模体作为蛋白质复合物的中心结构体,并基于中心结构体进行二层节点扩充,能准确有效地识别蛋白质复合物.并且将复合物二维网络进行三维转化,从而更直观清晰地展示复合物的结构体特征.实验结果验证了该算法的有效性及可行性. 展开更多
关键词 蛋白相互作用网络 网络模 蛋白质复合物 中心结构
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BRCA2蛋白表达与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系 被引量:1
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作者 孙紫君 杨宇石 +4 位作者 黄瑾瑾 冉立 毛大华 钟愉 徐澍 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第6期655-659,共5页
目的:探讨BRCA2蛋白表达与乳腺癌临床病理特征的关系。方法:选取97例乳腺浸润性导管癌患者蜡块组织和30例癌旁正常乳腺组织(对照),用免疫组化技术检测2种组织中BRCA2蛋白表达,同时比较BRCA2蛋白表达与患者临床病理特征(年龄、肿瘤大小... 目的:探讨BRCA2蛋白表达与乳腺癌临床病理特征的关系。方法:选取97例乳腺浸润性导管癌患者蜡块组织和30例癌旁正常乳腺组织(对照),用免疫组化技术检测2种组织中BRCA2蛋白表达,同时比较BRCA2蛋白表达与患者临床病理特征(年龄、肿瘤大小、分子分型、月经情况、病理分级、淋巴结转移及TNM分期)的关系。结果:正常乳腺组织中BRCA2高水平表达率为90%,乳腺浸润性导管癌中高水平表达率为69. 1%,BRCA2蛋白在正常乳腺组织中高水平表达高于乳腺浸润性导管癌(P <0. 05);BRCA2蛋白表达与乳腺癌患者的预后有关,低水平表达时肿瘤预后较差(P <0. 05);BRCA2表达与年龄、肿瘤大小、分子分型、月经情况、病理分级、淋巴结转移、TNM分期及复发转移无关,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:BRCA2蛋白低水平表达对乳腺浸润性导管癌的不良预后具有预测价值。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 brca2蛋白 病理状态 征和症状特征 预后 表达
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药物处置的体外模型——Caco2细胞系 被引量:2
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作者 吴笑春 辛华雯 +3 位作者 余爱荣 仲明远 李罄 刘幼英 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期230-232,共3页
口服药物的生物利用度被认为仅与胃肠道吸收和肝脏的首过代谢有关.然而随着对小肠生理功能认识的深化,已经了解小肠在药代动力学过程中不仅专司吸收,还在药物的代谢、转运和消除中发挥着重要作用.
关键词 药物处置 外模型 Caco2细胞系 肠吸收 P—糖蛋白 药物相互作用
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用酵母单杂交系统筛选人IL-2Rα基因NIRS元件结合蛋白的cDNA
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作者 盛德乔 陆瑜 +2 位作者 李宏帆 吴宁华 沈珝琲 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第3期214-218,共5页
目的筛选与白细胞介素2受体(IL2R)α基因NIRS元件相互作用的结合蛋白。方法采用酵母单杂交体系从HTLV1转化的人外周血淋巴细胞MATCHMAKERcDNA文库中筛选与NIRS相互作用的蛋白。结果经过筛选并排除假阳性后有9个阳性克隆仍保持His+表型和... 目的筛选与白细胞介素2受体(IL2R)α基因NIRS元件相互作用的结合蛋白。方法采用酵母单杂交体系从HTLV1转化的人外周血淋巴细胞MATCHMAKERcDNA文库中筛选与NIRS相互作用的蛋白。结果经过筛选并排除假阳性后有9个阳性克隆仍保持His+表型和βgal活性;测序后分析发现它们分别属于4个不同蛋白的cDNA克隆。其中一个是已知的反式作用因子Ku抗原,另一个是RNA聚合酶Ⅰ的转录终止因子。它们的C末端分别含有SAP和SANTDNA结合结构域。结论在Jurkat细胞中存在与NIRS元件相互作用的结合蛋白,相关的研究正在进行中。 展开更多
关键词 NIRS 结合蛋白 人IL-2 筛选 Ra基因 杂交系统 酵母 白细胞介素2 人外周血淋巴细胞 DNA结合结构域 Jurkat细胞 相互作用 HTLV-1 cDNA文库 cDNA克隆 反式作用因子 RNA聚合酶 阳性克隆 Ku抗原 杂交 gal 假阳性 SAP C末端
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细胞周期蛋白G2与肿瘤
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作者 茅锐 王振华 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2011年第3期238-242,共5页
细胞周期蛋白G2是一个崭新的细胞周期蛋白,它具有终止细胞周期和抑制细胞增殖的作用。在许多恶性肿瘤(如甲状腺乳头状癌和白血病)细胞中,其表达均发生显著下降,导致肿瘤细胞的去分化和无限制有丝分裂,为肿瘤的发生、发展提供了基础。低... 细胞周期蛋白G2是一个崭新的细胞周期蛋白,它具有终止细胞周期和抑制细胞增殖的作用。在许多恶性肿瘤(如甲状腺乳头状癌和白血病)细胞中,其表达均发生显著下降,导致肿瘤细胞的去分化和无限制有丝分裂,为肿瘤的发生、发展提供了基础。低水平的细胞周期蛋白G2表达与肿瘤预后不良相关。研究和探索周期蛋白G2与肿瘤的关系,对进一步认识肿瘤的发生、发展有重要意义。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白G2 细胞周期 蛋白磷酸酶2 中心 肿瘤抑制基因P53
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成髓细胞瘤转录因子第2亚型和中心体相关蛋白激酶2在结直肠组织的表达及其临床意义
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作者 张玲 王媛媛 +3 位作者 赵丽然 吕洪波 陆平 谢锐 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期720-723,共4页
目的探讨成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)和中心体相关蛋白激酶2(NEK2)表达与结直肠癌临床特征和预后的关系。方法收集大庆龙南医院(齐齐哈尔医学院第五附属医院)和广东医科大学附属医院2019年1月至2022年12月经病理学检查确诊的108... 目的探讨成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)和中心体相关蛋白激酶2(NEK2)表达与结直肠癌临床特征和预后的关系。方法收集大庆龙南医院(齐齐哈尔医学院第五附属医院)和广东医科大学附属医院2019年1月至2022年12月经病理学检查确诊的108例结直肠癌组织标本和对应癌旁组织标本,采用免疫组织化学法检测组织中MYBL2和NEK2表达,采用χ^(2)检验分析MYBL2和NEK2的表达与结直肠癌临床病理特征的关系。结果结直肠癌组织和对应癌旁组织中MYBL2表达率分别为74.07%(80/108)、12.96%(14/108),两者差异有统计学意义(χ^(2)=82.045,P<0.01)。MYBL2表达水平与结直肠癌患者淋巴结转移、浸润深度、组织学分化程度、TNM分期明显相关(χ^(2)=5.839、7.036、4.304、6.895,P<0.05),MYBL2表达水平与结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤部位无相关(χ^(2)=0.039、0.045、0.005,P>0.05)。结直肠癌组织和对应癌旁组织中NEK2表达率分别为65.74%(71/108)、32.41%(35/108),两者差异有统计学意义(χ^(2)=24.008,P<0.01)。NEK2表达水平与结直肠癌患者淋巴结转移、组织学分化程度、TNM分期明显相关(χ^(2)=4.384、5.555、6.213,P<0.05),NEK2表达水平与结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤部位、浸润深度无相关(χ^(2)=0.033、0.006、0.000、0.334,P>0.05)。结论结直肠癌组织中MYBL2和NEK2表达水平升高,两者均为结直肠癌预后不良的影响因素。 展开更多
关键词 结直肠癌 成髓细胞瘤转录因子第2亚型 中心相关蛋白激酶2 免疫组织化学方法
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G蛋白信号调节体-G alpha相互作用蛋白C端2通过上调SNIAL1表达及促进胃癌细胞增殖、侵袭与迁移 被引量:4
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作者 贺晓琪 肖俊 +2 位作者 张万里 姚金凤 肖勇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1594-1597,共4页
目的利用胃癌细胞株、患者胃癌组织及基因表达谱(GEPIA)数据库中相关数据确定G蛋白信号调节体-G alpha相互作用蛋白C端2(GIPC2)蛋白在胃癌中的表达量,探讨其在体外对胃癌细胞增殖及迁移的作用.方法将GIPC2的短发卡RNA(shRNA)以及过表达... 目的利用胃癌细胞株、患者胃癌组织及基因表达谱(GEPIA)数据库中相关数据确定G蛋白信号调节体-G alpha相互作用蛋白C端2(GIPC2)蛋白在胃癌中的表达量,探讨其在体外对胃癌细胞增殖及迁移的作用.方法将GIPC2的短发卡RNA(shRNA)以及过表达质粒分别转染GIPC2高表达及低表达的细胞株BCG803及AGS中,利用细胞增殖和迁移实验探讨GIPC2在胃癌细胞株中的作用,同时探讨GIPC2对化疗药物敏感性的影响.两组间比较采用t检验,两组以上的比较采用单因素方差分析.使用Spearman秩相关检验验证GIPC2与SNAIL1的表达是否存在线性相关.结果GIPC2在胃癌细胞株及胃癌患者组织中(相对表达量胃癌组织比正常对照:2.844±1.201比1.601±0.612,P<0.05)高表达,GIPC2可以促进胃癌细胞的增殖和迁移,并使细胞周期相关蛋白(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)及转移相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达增加.其中划痕实验显示,敲低组迁移率明显低于对照组(0.812±0.012、0.525±0.016,P<0.05);迁移侵袭实验显示,高表达组细胞迁移率和侵袭率分别是对照组的4.5、3.9倍(P<0.05);同时,GIPC2能够降低肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,使细胞中化疗药物敏感性相关基因CD133、CD44和性别决定区相关高迁移率族盒蛋白-2(SOX-2)表达均增加.机制上,在上皮-间充质转化(EMT)中发挥重要作用的转录因子SNAIL1蛋白在表达上与GIPC2呈正相关(r=0.435,P<0.05);敲低组SNAIL1蛋白表达量(0.121±0.011)明显低于对照组SNAIL1蛋白表达量(1.032±0.011,P<0.05);过表达组mRNA水平(3.351±0.121)明显高于对照组mRNA水平(1.021±0.031,P<0.05).结论GIPC2具有促进胃癌细胞增殖和迁移的作用,这一作用主要是通过SNAIL1蛋白来实现的. 展开更多
关键词 胃癌 G蛋白信号调节-G alpha相互作用蛋白C端2 SNAIL1 上皮-间充质转化
原文传递
中心体相关蛋白激酶2和细丝蛋白A在胃癌组织的表达及其临床意义
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作者 季新威 栾鹏博 +4 位作者 汪立鑫 张林森 刘志峰 姜兆雨 程伟才 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期1379-1381,共3页
目的探讨中心体相关蛋白激酶2(NEK2)和细丝蛋白A(FLNa)的表达与胃癌患者临床特征及预后之间的关系。方法以2017年10月至2022年12月烟台市烟台山医院收治的108例胃癌患者组织标本作为研究对象, 采用免疫组织化学方法检测上述胃癌组织和... 目的探讨中心体相关蛋白激酶2(NEK2)和细丝蛋白A(FLNa)的表达与胃癌患者临床特征及预后之间的关系。方法以2017年10月至2022年12月烟台市烟台山医院收治的108例胃癌患者组织标本作为研究对象, 采用免疫组织化学方法检测上述胃癌组织和癌旁组织中NEK2和FLNa表达水平, 结合临床资料, 应用χ^(2)检验进行分析。结果胃癌组织中NEK2表达率为62.96%(68/108), 明显高于癌旁组织中NEK2表达率[11.11%(12/108)], 差异有统计学意义(χ^(2)=62.259, P<0.01)。胃癌组织中FLNa表达率为30.56%(33/108), 明显低于癌旁组织中FLNa表达率[80.56%(87/108)], 差异有统计学意义(χ^(2)=54.675, P<0.01)。NEK2表达水平与胃癌患者组织学分化程度、TNM分期(TNM stage, tumor node metastasis stage)、淋巴结转移、肿瘤大小明显相关(χ^(2)=4.723、6.632、4.246、7.021, P<0.05), NEK2表达水平与胃癌患者年龄、性别无相关(χ^(2)=0.001、0.027, P>0.05)。FLNa表达水平与胃癌患者TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小明显相关(χ^(2)=5.102、6.279、5.645, P<0.05), FLNa表达水平与胃癌患者组织学分化程度、年龄、性别无相关(χ^(2)=0.004、0.023、0.329, P>0.05)。结论 NEK2在胃癌组织中高表达、FLNa在胃癌组织中低表达, NEK2和FLNa的表达水平与胃癌的形成发展密切相关。 展开更多
关键词 免疫组织化学方法 胃癌 中心相关蛋白激酶2 细丝蛋白A
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小菜蛾颗粒体病毒PP31与两种宿主蛋白发生相互作用 被引量:1
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作者 刘攀峰 王思民 +1 位作者 刘音 黎路林 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期15-22,共8页
在病毒侵染和复制过程中,病毒与宿主之间存在广泛的蛋白质-蛋白质相互作用。本研究建立了一个小菜蛾幼虫cDNA文库,用于筛查与小菜蛾颗粒体病毒(Plutella xylostella granulovirus,PlxyGV)蛋白相互作用的小菜蛾幼虫蛋白。pp31同源基因存... 在病毒侵染和复制过程中,病毒与宿主之间存在广泛的蛋白质-蛋白质相互作用。本研究建立了一个小菜蛾幼虫cDNA文库,用于筛查与小菜蛾颗粒体病毒(Plutella xylostella granulovirus,PlxyGV)蛋白相互作用的小菜蛾幼虫蛋白。pp31同源基因存在于所有鳞翅目昆虫杆状病毒。其编码产物是一种磷蛋白,与病毒基因表达调控相关。本研究通过酵母双杂交实验从小菜蛾幼虫cDNA文库中筛选出两个与PlxyGV PP31相互作用的蛋白质基因。序列分析结果显示这两个基因的预期编码产物分别是小菜蛾蛋白激酶C受体(RACK)和一种甲硫氨酰氨肽酶2(MetAP2)同源蛋白。原核表达和蛋白质纯化实验结果显示,rack与6-组氨酸编码序列的融合基因的表达产物是一个38kD多肽。在GST-pulldown实验中,RACK蛋白随同GST-PP31融合蛋白一起吸附于GST亲和树脂,进一步证实了小菜蛾RACK蛋白与PlxyGV PP31发生相互作用。 展开更多
关键词 小菜蛾颗粒病毒 pp31 蛋白激酶C受 甲硫氨酰氨肽酶2 病毒-宿主相互作用蛋白
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HMG1/2和HMG14/17与人ε-珠蛋白基因启动子DNA的相互作用
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作者 侯春晖 黄建 +1 位作者 张树冰 钱若兰 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第14期1079-1082,共4页
HMG(high mobility group)蛋白质是真核细胞核内一类含量丰富的非组蛋白,它们在染色质的结构与功能及基因表达调控中起着重要作用.应用凝胶电泳阻滞法和体外核小体重组技术,分析了HMG1/2和HMG14/17与人ε-珠蛋白基因启动子(ε-promot... HMG(high mobility group)蛋白质是真核细胞核内一类含量丰富的非组蛋白,它们在染色质的结构与功能及基因表达调控中起着重要作用.应用凝胶电泳阻滞法和体外核小体重组技术,分析了HMG1/2和HMG14/17与人ε-珠蛋白基因启动子(ε-promoter,-177~+1bp)DNA的结合模式.实验结果表明,HMG1/2能与ε-珠蛋白基因启动子DNA相结合,而HMG14/17不能与它结合.将ε-珠蛋白基因启动子DNA在体外组装成核小体后,HMG1/2则不能与组装成核小体的ε-珠蛋白基因启动子DNA结合,而HMG14/17却能与之结合.结果提示,当ε-珠蛋白基因启动子DNA处于不同的状态时,它所结合的HMG蛋白是不同的,推测它们可能就是通过这种选择性的结合模式而积极参与了人体ε-珠蛋由基因的表达调控. 展开更多
关键词 HMG1/2 HMG14/17 相互作用 人ε-珠蛋白基因启动子 外核小重组 蛋白纯化 凝胶电泳阻滞法 结合模式
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受体相互作用蛋白1在神经胶质瘤中的表达
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《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期383-383,共1页
美国UT西南大学医学中心的研究者们发现了一种生物指示剂,它有助于确诊恶性胶质瘤患者是否属于进展最为强烈的类型。同时,他们还发现一种称为受体相互作用蛋白1(receptor interacting proteinl,RIP1)的分子,有负凋控p53的作用。... 美国UT西南大学医学中心的研究者们发现了一种生物指示剂,它有助于确诊恶性胶质瘤患者是否属于进展最为强烈的类型。同时,他们还发现一种称为受体相互作用蛋白1(receptor interacting proteinl,RIP1)的分子,有负凋控p53的作用。该研究结果发表在2009年4月出版的《Cancer Research》中。研究结果表明,RIP1在恶性胶质瘤中的表达水平很高。RIP1是信号网络NF—κB复合体中的一种成分,是一个能在炎症引起的癌症中起关键作用的蛋白家族。他们首次发现,高水平的RIP1与各种癌症都有相关性。 展开更多
关键词 相互作用蛋白 神经胶质瘤 恶性胶质瘤 大学医学中心 生物指示剂 p53 复合 癌症
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AT丰富结合域1A和中心体相关蛋白激酶2在肝癌组织的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 闫永明 王彦清 +2 位作者 李泽琦 吴红霞 马艳波 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2021年第10期1887-1889,共3页
目的探讨AT丰富结合域1A(ARID1A)和中心体相关蛋白激酶2(NEK2)在原发性肝癌(PLC)组织中表达及其临床意义。方法收集收集山西医科大学第二医院2015年1月至2020年12月经病理确诊的79例PLC组织标本、38例肝硬化组织标本和22例正常肝组织标... 目的探讨AT丰富结合域1A(ARID1A)和中心体相关蛋白激酶2(NEK2)在原发性肝癌(PLC)组织中表达及其临床意义。方法收集收集山西医科大学第二医院2015年1月至2020年12月经病理确诊的79例PLC组织标本、38例肝硬化组织标本和22例正常肝组织标本,采用免疫组织化学方法检测上述组织中ARID1A和NEK2表达,采用χ^(2)检验分析ARID1A和NEK2与PLC临床病理特征之间的关系。结果 ARIDIA在正常肝组织、肝硬化组织与PLC组织中阳性表达率分别为86.36%(19/22)、55.26%(21/38)、27.85%(22/79),两两之间比较差异有统计学意义(χ^(2)=6.065、24.433、8.296,P<0.05);NEK2在正常肝组织、肝硬化组织与PLC组织中阳性表达率分别为9.09%(2/22)、34.21%(13/38)、73.42%(58/79),两两之间比较差异有统计学意义(χ^(2)=4.689、29.527、16.532,P<0.05)。ARIDIA表达水平与PLC肿瘤大小、TNM分期(tumor node metastasis stage,TNM stage)和血管浸润明显相关(χ^(2)=5.039、6.769、5.277,P<0.05),NEK2表达水平与PLC血管浸润、TNM分期明显相关(χ^(2)=5.4349、6.5142,P<0.05)。结论 ARID1A在PLC组织中表达下调,NEK2在PLC组织中表达上调,ARID1A和NEK2表达可能与PLC的发生发展、侵袭转移有关;检测ARID1A和NEK2有助于评估PLC患者病情。 展开更多
关键词 免疫组织化学法 AT丰富结合域1A 中心相关蛋白激酶2 原发性肝癌
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叉头框蛋白M1和中心体相关激酶2在肾癌组织中的表达及意义 被引量:4
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作者 魏燕 魏金星 +1 位作者 王丽琴 杨景勋 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期1580-1581,共2页
目的 探讨叉头框蛋白M1(FoxM1)与中心体相关激酶2(Nek2)在肾癌组织中的表达及意义。 方法 随机选取通过手术切除的肾细胞癌组织及癌旁组织标本56例,标本均经病理检查确诊,应用Western blot法检测肾癌组织和癌旁组织中FoxM1蛋白和... 目的 探讨叉头框蛋白M1(FoxM1)与中心体相关激酶2(Nek2)在肾癌组织中的表达及意义。 方法 随机选取通过手术切除的肾细胞癌组织及癌旁组织标本56例,标本均经病理检查确诊,应用Western blot法检测肾癌组织和癌旁组织中FoxM1蛋白和Nek2的表达。 结果 FoxM1蛋白在肾癌组中的表达(1.16±0.25)较癌旁组(0.26±0.08)高(t=39.083,P=0.000),Nek2在肾癌组中的表达(1.04±0.18)较癌旁组(0.17±0.05)高(t=34.161,P=0.000),肾癌组织中FoxM1和Nek2的表达呈正相关(r=0.869,P=0.000)。结论 FoxM1和Nek2在肾癌中呈高表达,且两者表达呈正相关,联合检测FoxM1和Nek2可能有利于肾癌的临床诊断和预后判断。 展开更多
关键词 又头框蛋白M1 中心相关激酶2 肾癌
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