自身反应性CD8^(+)中心记忆性T细胞对实验性自身免疫性脑脊髓炎致病作用

目的探讨自身反应性CD8^(+)中心记忆性T细胞(TCM)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的致病作用。方法用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)35-55肽段/完全弗氏佐剂(CFA)乳化液于雌性C57BL/6(B6)小鼠背部4点皮下注射,在0 h(CFA乳化液注射当时)及48 h时间点分别予以百日咳毒素(PTX)腹腔注射,建立EAE模型。于发病高峰期后处死EAE小鼠获取脾脏和淋巴结的单个核细胞(MNC),利用免疫磁珠法经阴性选择纯化CD8^(+)T细胞;进一步采用流式细胞术分选TCM(CD8^(+)CCR7^(+)CD44^(high))。将EAE鼠CD8^(+)T细胞、健康鼠CD8^(+)T细胞分别过继转移(经鼠尾静脉注射)至雌性Rag-1^(-/-)小鼠体内(2×10^(6)/只,n=6),进行Kono评分及病理学检查,以确证CD8^(+)T细胞的致病性;进一步对EAE鼠CD8^(+)T细胞不同亚群进行致病性研究,分为CD8^(+)TCM常规剂量组(5×10^(5)/只,n=6)、CD8^(+)终末效应记忆性T细胞(Ter TEM,5×10^(5)/只,n=6)组、磷酸缓冲盐溶液(PBS,n=6)组及CD8^(+)TCM高剂量组(1.5×10^(6)/只,n=3),分别将不同剂量CD8^(+)TCM、Ter TEM以及PBS相应细胞/溶液注射于Rag-1^(-/-)小鼠;予以MOG35-55/CFA和PTX诱导,进行神经功能评分;于过继转移后第40 d处死小鼠,检测其病理学改变。结果将EAE鼠CD8^(+)T细胞过继转移至Rag-1^(-/-)小鼠体内,在27 d~29 d后出现双后肢瘫痪症状,病理学显示脑/脊髓内炎性细胞浸润和脱髓鞘改变,而健康鼠CD8^(+)T细胞过继转移后小鼠无瘫痪症状,病理学检查亦未见EAE相关病理学改变。EAE鼠CD8^(+)TCM常规剂量组及高剂量组、Ter TEM组、PBS组注射后持续观察40 d则均未出现发病症状,脑/脊髓亦未见及EAE相关的病理学改变。结论EAE自身反应性CD8^(+)T细胞的过继转移可诱导Rag-1^(-/-)小鼠发病,而自身反应性CD8^(+)TCM的过继转移则未能诱导出EAE病症及其相应的病理学改变,提示CD8^(+)TCM缺乏明显的EAE致病效应。

情绪记忆权衡与拓宽效应及其认知神经机制

情绪图片能比中性图片产生更好的记忆效果。然而近年研究发现,对于复杂场景图片,情绪诱发的记忆增强并非单一的过程,而包含两个相反的现象:情绪信息既可能选择性地增强场景中具有情感色彩的中心记忆,并带来背景记忆的下降,诱发情绪记忆权衡效应;也可能同时增强中心和背景记忆,诱发情绪记忆拓宽效应。两种现象的发生取决于记忆信息特性(情绪效价、中心-背景联结程度)及记忆过程(编码、巩固和提取)相关的诸多因素,而其背后的机制仍未明晰。当前该领域存在情绪记忆权衡是否是一种不由注意所介导的自动化过程的争论,另有少数研究考察了与记忆权衡效应相关的脑网络,而针对记忆拓宽效应机制的研究仍较为匮乏。未来需从行为和神经层面,对比情绪诱发的记忆权衡与拓宽效应的发生机制,针对二者的自动化特性、涉及的记忆表征形式等问题深入研究,并将这些效应拓展至空间之外的维度,以系统揭示情绪信息选择性增强记忆现象背后的深层原因。

基于记忆性干性T细胞和中心记忆性T细胞的细胞免疫治疗在血液肿瘤治疗中的价值

近年来，以抗原嵌合受体T细胞（CAR-T）为代表的细胞免疫治疗在血液肿瘤治疗中取得重大突破。记忆性干性T细胞（TSCM）和中心记忆性T细胞（TCM）是T细胞免疫治疗强有力的载体，如何在体内及体外调控该类细胞的分化、如何利用其构建强效的治疗系统而避免潜在的毒副作用受到研究者们的关注。文章主要总结了第58届美国血液学会（ASH）年会关于TSCM和TCM在血液肿瘤治疗中的价值和相关研究进展。

记忆性T细胞和HIV疫苗

HIV疫苗被认为是预防艾滋病的最有效工具。以前研制的HIV疫苗,大多数能诱导机体产生记忆性B淋巴细胞和持久的抗体,但并不能保护机体免受HIV的感染。记忆性T细胞的研究给研究HIV疫苗提供了新思路。本文着重描述了记忆性T细胞的分群、分化、形成和维持的一般规律及其在HIV疫苗研制中的意义。

记忆性T细胞的产生与维持

适应性免疫应答导致记忆反应的形成。记忆反应的强弱程度和持续时间取决于所形成的记忆性T细胞的性质和数量。本文就记忆性T细胞产生过程中的调控因素、记忆性T细胞亚群的特点及其相互关系、记忆性T细胞维持的细胞学基础做一简要综述。

CXCR4嗜性SHIVKU-1病毒静脉感染中国恒河猴初步研究

目的了解SHIVKU-1静脉途径感染中国恒河猴的感染特点及进展规律。方法两只健康中国恒河猴,静脉感染SHIVKU-1病毒,定期采样检测血浆病毒载量、CD4+/CD8+比值、CD4+T细胞绝对数变化和血清中抗SHIVKU-1特异性IgG抗体水平。多色流式技术分析外周血、腹股沟淋巴结和十二指肠粘膜固有层CD4+T淋巴细胞记忆细胞亚群变化。结果两只实验猴成功感染SHIVKU-1病毒,一直到感染后3个月均保持稳定水平的病毒载量。外周血CD4+T淋巴细胞下降明显,CD4+/CD8+T细胞比值严重倒置。CD4+Tcm细胞比例在经历了感染早期的下降后,大幅升高,尤其是外周血和淋巴结。CD4+Tem则在粘膜固有层中增加明显。结论 SHIVKU-1静脉途径成功感染了中国恒河猴,为SHIV/中国恒河猴疾病及评价模型的建立奠定了良好的基础,为今后使用此模型评价抗病毒药物或疫苗提供了条件。

不同亚群CD8^+ T细胞表型、功能分子及分化相关基因的表达

目的:探讨不同亚群CD8^+ T细胞的表型、功能分子及分化相关基因表达的差异。方法:密度梯度离心法从健康人外周血中分离外周血单个核细胞,并用MACS细胞免疫磁珠分选获取CD8^+ T细胞。采用CD3、CD8、CD45RA、CCR7标记CD8^+ T细胞亚群,检测各亚群表面标志物(CD69、CD28、PD-1)及功能分子(IFN-γ、IL-2)的表达;采用qRT-PCR检测CD8+T细胞亚群中功能、转录因子、凋亡及干性等相关基因的表达。结果:与效应记忆性T细胞(Tem)和效应性T细胞(Teff)相比,中心记忆性T细胞(Tcm)表面激活性标志物CD69和CD28表达水平增高(P <0. 05),而抑制性分子PD-1表达水平降低(P <0. 05);功能分子(IFN-γ、IL-2)的表达水平上调(P <0. 05);趋化因子受体(CCR7、CXCR4)、STAT3、干性基因(C-myc、Lin28)及抗凋亡等相关基因表达水平上调(P <0. 05)。结论:抗凋亡、自我更新、STAT3等相关基因在Tcm细胞中高表达,且与记忆性T细胞的分化相关,为体外诱导记忆性T细胞提供了基础。

AKT抑制剂对结直肠癌肝转移患者肿瘤浸润T淋巴细胞生物学活性的影响

目的探讨AKT抑制剂对结直肠癌肝转移肿瘤浸润T淋巴细胞生物学活性的影响。方法收集郑州大学附属肿瘤医院普外科2016年1-12月间收治的可手术的结直肠癌肝转移患者的肿瘤组织,密度梯度离心法分离获得组织中的淋巴细胞和肿瘤细胞,采用流式细胞学方法检测AKT抑制剂对肿瘤浸润T淋巴细胞增殖,分化,细胞表型及功能的影响。结果 AKT抑制剂组能增加中心记忆T淋巴细胞的比例而不影响肝转移癌浸润T淋巴细胞的增殖,自体肿瘤细胞刺激诱导出的分泌IFN-γ的T细胞比例明显高于IL-2组。结论在TIL培养体系中加入AKT抑制剂可以增强中心记忆T淋巴细胞的增殖及功能,而不影响CD8+T细胞的数量,这对于肿瘤过继免疫治疗方案的改进具有重要的参考意义。

环黄芪醇联合IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增的影响

目的探究环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)联合细胞因子IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增和CD8^+T细胞亚群中干细胞样中心记忆性T细胞(stem cell-like central memory T cells,TSCM)比例的影响,为基于T细胞的肿瘤细胞免疫治疗研究奠定实验基础。方法采集健康产妇脐带血,通过密度梯度离心法分离获得脐带血单个核细胞(umbilical cord blood mononuclear cells,UCBMC),利用CD3/CD28抗体偶联磁珠刺激活化后,采用不同浓度的CAG(0、0.04、0.2、1、5μmol/L)联合IL-7和IL-15连续培养,利用多色流式细胞术分别测定T细胞的增殖程度以及CD8^+T细胞中TSCM比例的变化情况。结果 0.2μmol/L CAG与IL-7和IL-15细胞因子联用组促T细胞扩增作用显著高于其他浓度CAG与细胞因子IL-7和IL-15联用组或单独使用细胞因子IL-7和IL-15组。同时,0.2μmol/L CAG联用IL-7和IL-15组还可以促进CD8^+T中CD197^+CD45RA+细胞表型的表达,即维持CD8^+T中高比例的TSCM亚群。结论 0.2μmol/L CAG联合IL-7和IL-15可以显著提高活化T细胞扩增能力,并能保持CD8^+T细胞中高比例的TSCM亚群。

口述历史:人类个体记忆库与档案学

提出人类记忆库概念,是要说明并且倡导,所有口述历史工作的原始记录都应保存,让所有个体记忆都能作为档案收藏,以供更多人在当下及未来研究利用。如此,口述历史工作者应有档案意识,熟悉档案管理流程,把建立人类个体记忆库作为它的终极目标;而档案学既已把社会记忆作为新的界定标准,档案馆作为社会记忆的保藏机构,也就应把口述历史提升到人类个体记忆库层面来认识,并把它作为社会记忆的一个重要组成部分而征集、保藏、管理和利用。如此,档案学家就要思考并建构"口述历史档案学"这一新边缘学科。人类档案机构经历了从官方档案库到公共档案馆的发展进化,前者属于官方且只为官方服务,后者属于社会并为官方、学者、社会公众服务。随着社会记忆需求及数字文化的普及,公共档案馆正在向社会记忆信息活动中心方向进化,个人记忆的收藏和利用的价值日益凸现。而我国的档案馆,仍处于从档案库向公共档案馆的改革转型过程中,对私人档案和个人记忆的收藏和利用不尽如人意。提出"中国档案人口述历史计划",是相信它对中国档案馆体制改革有重要助推作用。

SHIV_(SF162p3)病毒感染急性期复制水平与慢性期CD4^+ T细胞亚群分布及频度相关性分析

目的研究B亚型强毒株SHIVSF162p3感染恒河猴后,在感染慢性期肠道组织、外周血及淋巴结中T淋巴细胞亚群的频率及其与急性期病毒复制强度的相关性。方法使用SHIVSF162p3通过静脉及黏膜途径感染12只中国恒河猴,real-time RT-PCR监测血浆病毒载量。感染慢性期取外周血、淋巴结以及通过内窥镜手术取十二指肠肠道黏膜组织,分离淋巴细胞,使用多色流式细胞术检测分析各组织中CD4+T细胞各亚群频率。结果与健康猴相比,SHIVSF162p3感染慢性期3种淋巴组织中CD4+T均有所下降且减少的主要部分是Tcm亚群,而CD4+Tcm下降在肠道组织中最为显著。与CD4+T细胞比较,慢性期CD4+Tcm的下降与急性期病毒载量峰值的相关性更高。从组织学来看,慢性期肠道组织CD4+Tcm与病毒载量峰值相关性最高,外周血次之;淋巴结的关联性不大。结论 B亚型强毒株SHIVSF162p3在急性感染期首先攻击肠道组织和外周血中CD4+Tcm细胞,造成靶细胞的严重损毁。病毒复制率越高损毁越严重,且持续至病毒感染慢性期,可能是这两种淋巴组织中CD4+T细胞下降的主要原因。而淋巴结中CD4+Tcm的下降则主要与外周血和淋巴结间的淋巴细胞循环相关。

抗病毒治疗早期艾滋病病人CD_4^+ T细胞亚群与免疫重建的关系

目的研究抗病毒治疗(ART)早期阶段,艾滋病(AIDS)病人CD4+T细胞亚群的变化及其与免疫重建的关系。方法前瞻性分析21例接受ART规律治疗的艾滋病病人,收集病人服药前及服药第2、4、8、12周时的静脉血,采用流式细胞仪染色技术检测CD4+T细胞的水平,分析其在治疗过程中的变化规律,以及与免疫活化间的相关性。结果 ART后,CD4中心记忆细胞(CD4CM)和CD4幼稚细胞两种形式的CD4+T细胞增加,且在前4周治疗增长迅速。治疗4周时CD4CM的变化与治疗12周时CD4+T细胞的变化呈正相关关系,而与CD8+CD3+8T细胞的变化呈负相关关系。结论 ART能有效地重建AIDS病人的T淋巴细胞免疫,并且CD4CM可能是免疫重建的早期指标。