中性内肽酶在阿尔茨海默病发病机制中的作用

β-淀粉样蛋白(βamyloid,Aβ)在海马区的沉积是阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)发病的典型表现,清除或降低Aβ含量是治疗AD的目标之一.较之Aβ生成的增多,体内降解Aβ能力的下降在AD发病过程中显得更为重要.尽管Aβ在体内可以通过运输到血液和脑脊液途径来清除,但大部分Aβ被中性内肽酶(neprilysin,NEP)为代表的一类蛋白酶降解为小分子后从体内清除.老年人、轻度认知障碍期(MCI)和AD患者的NEP活性显著下降,且NEP活性下降与脑内Aβ升高及AD患者认知功能损伤相关.NEP有可能成为AD治疗的潜在药物靶点,针对轻度认知障碍前期(pre-MCI)和MCI,提高NEP的活性,促进Aβ的降解,有可能延缓AD的发生和发展.

慢病毒介导的中性内肽酶对Aβ诱导的SK-N-SH细胞凋亡的影响

目的:探讨脑中性内肽酶(NEP)外源表达对神经毒物质β淀粉样肽(Aβ)诱导SK-N-SH细胞凋亡的影响。方法:采用脂质体法将含中性内肽酶NEP的四质粒系统慢病毒载体转染293FT包装细胞,制备高滴度病毒载体,感染Aβ处理的SK-N-SH细胞,用Western blotting方法检测NEP对Aβ的降解作用、MTT法检测细胞存活率、流式细胞术分析细胞凋亡情况、RT-PCR技术测定凋亡相关基因bcl-2及bax的表达及caspase-3活性检测。结果:胞内高表达的NEP能够显著降解Aβ,其降解程度与NEP的表达量有剂量依赖关系。细胞存活率及流式细胞术检测结果显示NEP高表达可减轻Aβ诱导的细胞凋亡,细胞存活率于感染病毒后48 h最强,为对照的170%(P<0.01),NEP活性组的凋亡率为3.86%,低于对照组的6.41%;RT-PCR结果显示NEP对Aβ诱导的细胞凋亡保护作用可能是通过减少bax的表达,抑制了caspase-3的激活程度来实现的。结论:NEP可以降解Aβ,可以保护由Aβ沉积所致的神经细胞凋亡。

人源性中性内肽酶稳定转染细胞株的建立

目的:获得中性内肽酶(NEP)及失活中性内肽酶(inNEP)稳定表达的细胞株。方法:用酶切及基因测序鉴定质粒pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V);以脂质体LipofectamineTM2000介导pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)转染神经母细胞瘤细胞SK-N-SH,分别获得两者的稳定表达细胞株;用RT-PCR及Westernblot分析NEP的表达。结果:转染4周后,可见G418单克隆抗性细胞株形成,转染pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)的细胞NEP表达均增高。结论:获得稳定转染pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)的细胞株。

中性内肽酶及其抑制剂在心血管疾病过程中的作用

中性内肽酶是一种属于Ⅱ型跨膜蛋白的肽类内切酶 ,在肽链的氨基端水解疏水氨基酸肽键 ,灭活心钠素、肾上腺髓质素、血管紧张素、内皮素等心血管活性肽 ,在高血压病、心力衰竭。

中性内肽酶和阿尔茨海默病的基因联系

阿尔茨海默病（Alzheimer＇s disease,AD）是导致痴呆的最常见的进行性神经退行性疾病。淀粉样肽（amyloid β peptide,Aβ）在脑中沉积形成老年斑是AD的神经病理学标志之一,Aβ产生与清除的动态平衡是决定老年斑形成的重要因素。

自发性高血压大鼠肾上腺髓质素含量与中性内肽酶分布的关系

目的 测定自发性高血压大鼠 (SHR)与WKY大鼠组织肾上腺髓质素 (ADM )含量和中性内肽酶 (NEP)活性及其表达水平 ,以探讨NEP的变化在高血压时组织ADM水平升高中的意义。方法 采用放射免疫分析方法和荧光分光光度法分别检测血浆和组织的ADM含量和NEP的活性 ,同时用半定量RT PCR和免疫组织化学染色法分别检测组织NEPmRNA和NEP蛋白的表达和分布。结果 ADM和NEP广泛分布于大鼠的血浆和组织 ,SHR的ADM含量在各组织普遍高于WKY大鼠。SHR心脏和小肠NEP的活性和mRNA表达均显著低于WKY大鼠 ,ADM含量与NEP活性呈负相关。反之 ,SHR血浆和肾脏NEP活性、肾脏NEPmRNA水平与蛋白量均高于WKY大鼠 ,ADM含量与NEP活性呈正相关。在肺脏和主动脉 ,NEP的活性无明显变化。结论 NEP在自发性高血压大鼠各组织器官中的变化与ADM含量的变化不一致 ,提示高血压时组织局部的NEP对ADM含量的影响不同。

中性内肽酶与心血管疾病关系的研究进展

中性肽链内切酶(NEP)能降解许多血管活性肽,研究表明在充血性心力衰竭动物模型中,肾脏NEP蛋白含量、活性及表达是增高的。本文主要综述抑制NEP在心血管疾病中作用的研究进展。

中性内肽酶相互作用蛋白质的功能

目的分析与中性内肽酶(NEP)相互作用的蛋白质的功能。方法利用在线蛋白质间相互作用的数据库PINA2获得与NEP相互作用的蛋白质,并利用基因本体(GO)和KEGG分析这些蛋白质的功能。结果 PINA2数据库显示与NEP相互作用的蛋白质有176个;GO分析显示这些蛋白质分布于细胞内的各个区域,一部分可以分泌出细胞发挥作用,可以与蛋白、核酸及酶类结合,参与细胞内蛋白质定位、多肽和RNA降解、大分子代谢及血管紧张素成熟。KEGG信号通路结果显示NEP相结合蛋白参与帕金森病、阿尔茨海默病等疾病过程,还参与蛋白降解及吞噬过程。结论 NEP及其相互作用蛋白可以通过调节蛋白定位和大分子降解参与帕金森病及阿尔茨海默病的疾病过程,并且一部分可以分泌到细胞外,为帕金森病和阿尔茨海默病的诊断和治疗提供潜在靶点。

中性内肽酶及抑制剂在心血管疾病中的应用

随着人口老龄化的加剧,心血管疾病已成为最主要的死因.目前认为神经激素系统的持续激活诱导和参与了慢性心血管疾病的进展.其中肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）、交感神经系统（SNS）及内皮素系统是最主要的反应系统.它们不仅可以通过水钠潴留及收缩血管使血压升高,而且可以造成不可逆的心血管重塑,因而这些系统的阻滞代表了一种重要的治疗策略.另一方面,人体有强大的调节系统,包括利钠肽系统（NPs）.

中性内肽酶与肠道神经源性炎症

中性内肽酶是一种金属蛋白酶 ,可以降解P物质等肽类物质 ,阻断神经源性炎症反应。近年来发现中性内肽酶与肠道神经源性炎症关系密切 ,现阐述中性内肽酶及其与肠道神经源性炎症关系的最新研究情况。

醒脑液对PAP双转基因痴呆小鼠脑内中性内肽酶基因和蛋白表达的影响

目的:探讨中药醒脑液(XNY)对PAP双转基因痴呆小鼠大脑组织中中性内肽酶(NEP)基因和蛋白表达的影响。方法:分别采用实时荧光定量PCR技术和Western blot技术观测正常对照组、模型组、西药对照组、XNY高剂量组、XNY中剂量组和XNY低剂量组小鼠大脑组织中NEPmRNA和NEP蛋白的表达。结果:与模型组相比,XNY高剂量组脑内NEP mRNA含量表达上调(P<0.01);XNY高剂量组和中剂量组NEP蛋白含量表达增加(P<0.01)。结论:醒脑液对双转基因痴呆小鼠大脑组织中NEP mRNA和NEP蛋白表达有较好的调控作用,说明醒脑液对防治老年性痴呆能起到良好效果。

痤疮患者皮脂腺表达高水平的中性内肽酶

临床研究显示,神经系统成分如心理和神经源因素能影响痤疮病程,情绪或心理压力可触发和(或)加重痤疮,但压力和痤疮间的本质联系并不清楚。以往的资料表明,因情绪压力而加重的皮肤病中,神经肽的分泌与其炎症发展有关,压力可导致神经肽P物质释放。

基于“肾脑相济”理论的电针疗法对痴呆小鼠脑内β-淀粉样蛋白及中性内肽酶表达的影响

目的:探讨基于"肾脑相济"理论的电针疗法对快速老化SAMP 8小鼠大脑颞叶皮层β-淀粉样蛋白(Aβ)含量及中性内肽酶(NEP)表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的可能机制。方法:将8月龄雄性快速老化SAMP 8小鼠随机分为模型组、电针组、美金刚组,每组6只。使用同月龄正常老化SAMR 1小鼠6只作为对照组。电针组电针小鼠"百会""肾俞""太溪"穴,每次15min,每日1次,治疗8周,美金刚组予美金刚灌胃(20mg·kg-1·d-1),连续8周。采用ELISA法、免疫组织化学法、Western blot法观察小鼠大脑颞叶皮层内Aβ含量和NEP的表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠大脑颞叶皮层内Aβ1-40和Aβ1-42含量明显增高,NEP表达水平明显下降(P<0.05);与模型组比较,电针组和美金刚组小鼠大脑颞叶皮层内Aβ1-40和Aβ1-42含量明显下降,NEP表达水平明显上升(P<0.05);电针组与美金刚组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:"肾脑相济"电针疗法对SAMP 8小鼠大脑颞叶皮层中NEP表达有较好的调控作用,能抑制脑内Aβ的生成,从而防治AD。

中性内肽酶在心力衰竭患者淋巴细胞中的表达

目的 :观察中性内肽酶 (NEP)在心力衰竭 (心衰 )患者淋巴细胞中的表达。方法 :分离 30例心衰患者及 10例正常对照者的外周血淋巴细胞 ,分别涂片 ,用免疫组化S ABC的方法检测NEP的表达 ;同时用RT PCR法检测淋巴细胞中的NEPmRNA。结果 :免疫组化发现 30例心衰患者淋巴细胞中均可见阳性染色 ,而 10例对照者均未见NEP的表达 ;RT PCR法检测发现NEP在心衰组表达 ,而对照组未检测到。结论 :NEP在心衰患者外周血淋巴细胞中表达。

血管肽酶抑制剂的研究现状及展望

血管肽酶抑制剂 (Vasopeptidaseinhibitor ,VPI)是一类双重肽酶抑制剂 ,能同时抑制血管紧张素转换酶 (ACE)及中性内肽酶 (neutralendopeptidase ,NEP)活性。在降低肾素 -血管紧张素 -醛固酮系统 (RAAS)活性、增加血管舒张性、提高体内缓激肽 (BK)和心房钠尿肽 (ANP)的浓度及活性方面 ,具有比单用ACE抑制剂或NEP抑制剂更强的作用。大量临床前动物实验及临床研究证实VPI治疗各种心血管疾病如高血压、心力衰竭等具显著疗效。

血管肽酶抑制剂的研究进展

目的阐述血管肽酶抑制剂(VPIs)的作用机制、构效关系以及临床研究等方面的进展。方法根据近期对VPIs的作用机制、构效关系以及研究开发现状的25篇相关文献进行整理和归纳。结果与结论数种血管肽酶抑制剂正在进行治疗高血压、心力衰竭等心血管疾病的临床试验。VPIs有望成为新一代治疗高血压和心力衰竭的药物。

血管肽酶抑制剂治疗心血管病的前景

心血管系统受血液动力学与神经体液机制控制,这些调控系统在调节心脏功能、血管紧张度与结构等方面起重要作用.血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂临床应用有效,使得人们致力于阻滞其它体液系统.中性内肽酶(NEP)是一种具有类似结构和催化部位的内皮细胞表面锌金属肽酶,是利钠肽的主要酶降解途径,也是激肽与肾上腺髓素(adrenome-dullin)的辅助酶降解途径.利钠肽可看作肾素-血管紧张素系统的内源性抑制剂.