慢性阻塞性肺病及吸烟人群血清MMP-9、NGAL、MMP-9/NGAL前体及中性白细胞弹性蛋白酶水平变化

目的确定吸烟情况对慢性阻塞性肺病(慢阻肺)患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、中性粒细胞明胶酶蛋白(NGAL)、MMP-9/NGAL前体及中性白细胞弹性蛋白酶(NE)水平的影响。方法在80名慢性阻塞性肺病患者(65名吸烟者,15名不吸烟者)和35名健康成年人(26名吸烟者,7名不吸烟者)中收集血清样本,随后进行ELISA测定血清样本中研究因子的水平。结果在患有慢阻肺的吸烟者中,MMP-9、NGAL和MMP-9/NGAL水平明显升高。此外,患有慢阻肺的吸烟者与健康的吸烟者相比,NE和MMP-3水平显著增高。结论 MMP-9、NGAL、MMP-9/NGAL和NE的血清水平能够反应与吸烟有关的慢阻肺患者的全身炎症状态。

弹性蛋白酶调节中性粒细胞炎性募集的功能研究

目的:探索中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)对中性粒细胞炎性募集的影响。方法:采用外源性弹性蛋白酶抑制剂西维来司钠盐预处理小鼠骨髓来源的中性粒细胞,通过腹膜炎过继性迁移、细胞体外趋化、流动室黏附、免疫荧光染色、细胞伸展等实验,检测NE的抑制对中性粒细胞体内炎性募集、体外趋化、牢固黏附、细胞极化与伸展能力的影响;利用流式细胞术及鲁米诺化学发光系统检测NE的抑制对中性粒细胞吞噬及活性氧(ROS)释放能力的影响。结果:西维来司钠盐预处理显著减弱了中性粒细胞体内炎性募集(P<0.001);减弱了中性粒细胞在体外趋化过程中对催化剂方向性的感知(P<0.05),减慢了趋化速率(P<0.05),降低了趋化距离(P<0.05);减少了中性粒细胞在炎性内皮细胞表面形成牢固黏附的能力(P<0.000 1),抑制了中性粒细胞对细菌的吞噬能力(P<0.01);但对中性粒细胞的伸展、极化及ROS的释放均无显著影响。结论:NE的抑制显著损害了中性粒细胞在体内外的炎性募集级联反应及吞噬作用,但对中性粒细胞的伸展、极化、ROS释放等功能无显著影响。

中性粒细胞弹性蛋白酶在支气管扩张中的生物学功能及中药干预研究进展

中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)是中性粒细胞原代颗粒中的一种主要蛋白酶,参与支气管扩张复杂病理的发生、发展,具有调节炎症反应、控制感染、增加黏液分泌、降解细胞外基质和细胞因子及损害免疫系统等多种生物学功能,与疾病预后有关,可作为临床治疗结果的预测因子和可能的治疗靶点。尚未有大量高级别临床研究证明内源性及外源性NE抑制剂对支气管扩张的疗效。中医药发挥其多靶点、多途径、精准施治等作用干预NE介导的支气管扩张,在改善临床症状、减少急性加重次数、减轻气道炎症反应等方面具有优势。该文综述NE在支气管扩张中的主要生物学功能,以及中医药干预NE介导的气道炎症的进展,期望为临床和科研提供有价值的参考依据。

中性粒细胞弹性蛋白酶在急性呼吸窘迫综合征中的研究现状

中性粒细胞弹性蛋白酶是中性粒细胞嗜天青颗粒中的主要蛋白酶,在抵御感染中发挥重要作用。然而,大量释放的中性粒细胞弹性蛋白酶可能导致过度炎症反应,加剧肺组织损伤,诱发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的发展。西维来司他钠作为一种特异性中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂,在缓解中性粒细胞弹性蛋白酶诱发的病理过程中具有明显的潜力,并在临床急性呼吸窘迫综合征的治疗中受到广泛的关注。本文将深入探讨中性粒细胞弹性蛋白酶的生物学特性及其在急性呼吸窘迫综合征病理生理中的作用机制,以及西维来司他钠在急性呼吸窘迫综合征临床管理中的应用,为深入理解该药物在急性呼吸窘迫综合征治疗中的作用机制提供重要线索。

中性粒细胞弹性蛋白酶及其抑制剂在脓毒症相关ARDS中作用的研究进展

脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是脓毒症严重并发症之一,其患病率和死亡率居高不下。中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)在其病理生理过程中发挥了重要作用,参与了肺泡-毛细血管屏障破坏、氧化应激和炎症反应、自噬和细胞死亡等多个过程。西维来司他钠作为唯一上市的特异性NE抑制剂(NEI),在减轻炎症反应和保护肺组织中显示出巨大的潜力。该文主要对NE及NEI在脓毒症相关ARDS中的作用机制进行概述,并简要探讨脓毒症相关ARDS和西维来司他钠的潜在治疗方案,以期为临床治疗提供参考。

血清中性粒细胞弹性蛋白酶与育龄期女性复发性单纯疱疹病毒感染抗病毒治疗效果的关系

目的探讨血清中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)与育龄期女性复发性单纯疱疹病毒感染抗病毒治疗效果的关系。方法纳入2021年1月至2022年4月天津市第一中心医院就诊的100例单纯疱疹病毒感染患者,所有患者均在入院后接受统一的抗病毒治疗方案,测定所有患者治疗前及治疗1、2、3、4个月时血清NE水平。将55例治疗有效患者纳入有效组,45例治疗无效患者纳入无效组。比较分析两组患者的基线资料,通过单因素分析及多因素logistic回归模型,分析血清NE与单纯疱疹病毒感染抗病毒治疗效果的关系。结果无效组患者的性生活频次、血清NE、C反应蛋白(CRP)高于有效组,白细胞介素-2(IL-2)水平低于有效组,差异有统计学意义(P<0.05)。无效组患者治疗前及治疗1、2、3、4个月血清NE水平均高于有效组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,性生活频次、CRP、治疗前NE、治疗1个月NE、治疗2个月NE、治疗3个月NE及治疗4个月NE是影响单纯疱疹病毒感染抗病毒治疗效果的相关因素(P<0.05)。经限制性立方样条模型(RCS)分析,单纯疱疹病毒感染患者治疗前血清NE水平与抗病毒治疗无效的关联呈非线性曲线型剂量反应关系,当治疗前血清NE水平>113.865ng/ml时,患者抗病毒治疗无效风险随指标水平升高而逐渐增加。结论单纯疱疹病毒感染患者血清NE水平与抗病毒治疗效果有关,治疗前血清NE水平高可能提示患者抗病毒治疗无效的风险较高。

中性粒细胞弹性蛋白酶与慢性阻塞性肺疾病关系的研究进展

慢性阻塞性肺疾病是一种常见且多发的呼吸系统疾病,以慢性炎症为主要特征,而中性粒细胞弹性蛋白酶作为一种重要炎性蛋白酶,它能消化、水解细胞外基质和上皮连接结构,损害气道上皮完整性、损伤肺组织,在该病的演变进展过程中具有重要意义。文章对两者的相关性进行综述与探讨,为中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂作为慢性阻塞性肺疾病临床用药提供新视野及一定理论基础。

Cdc42蛋白参与中性粒细胞弹性蛋白酶诱导的人气道上皮细胞黏蛋白高分泌

目的探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)与中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的气道上皮细胞黏蛋白(MUC)5AC高分泌的关系。方法体外培养人气道上皮细胞(16HBE),以Cdc42 siRNA和NE进行干预,将细胞分为6组:对照组、NE组、NE+Cdc42 siRNA组、Cdc42 siRNA组、阴性siRNA组、NE+阴性siRNA组。采用Western blot法检测Cdc42蛋白的相对含量,ELISA和免疫荧光检测各组细胞MUC5AC蛋白的表达水平。结果与对照组相比,NE组Cdc42蛋白含量明显增加(P<0.05),细胞MUC5AC蛋白表达水平亦显著增高(P<0.001);与NE组比较,NE+Cdc42 siRNA组的MUC5AC蛋白水平显著降低(P<0.05),其Cdc42蛋白含量亦明显降低(P<0.001);Cdc42 siRNA组以及阴性siRNA组的Cdc42蛋白、MUC5AC蛋白含量相较于对照组变化不大(P>0.05)。结论Cdc42在NE诱导的气道上皮细胞黏液高分泌的形成过程中可能发挥着重要的介导作用。

中性白细胞弹性蛋白酶与白血病

中性白细胞弹性蛋白酶（NE）是中性白细胞分泌的一种重要细胞毒性分子，与人类白血病的发生密切相关。它能分解早幼粒细胞白血病（PML）-维甲酸受体α（RARα）融合蛋白，增强PML-RARα致自血病的作用，在急性早幼粒细胞白血病发病机制中占有重要地位；另外，它也能通过降低生长因子对正常血细胞生成的有效性，从而促进慢性髓细胞性自血病的克隆优势。

血液透析患者动静脉内瘘狭窄与中性粒细胞弹性蛋白酶水平的相关性

目的探讨血液透析患者动静脉内瘘狭窄与中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)水平的相关性。方法回顾性选取2020年1月至2022年3月复旦大学附属中山医院青浦分院肾内科收治的维持血液透析的患者共109例,依据静脉内瘘建立后6~8周,经超声检查确认血液透析患者动静脉内瘘狭窄程度,动静脉内瘘狭窄超过50%的为狭窄组(n=61),动静脉内瘘狭窄低于50%的为非狭窄组(n=48)。对两组患者生化指标和血清中NE水平进行对比;分析动静脉内瘘狭窄与NE水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清中NE水平对血液透析患者动静脉内瘘狭窄的诊断价值;Logistic回归分析影响血液透析患者动静脉内瘘狭窄的危险因素。结果两组患者的年龄、性别构成比、糖尿病史、脑血管疾病史、冠状动脉疾病史、外周动脉疾病史、维持透析时间和透析超滤量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者的血红蛋白、超敏C-反应蛋白、白细胞计数、钙、磷、全段甲状旁腺素、尿酸、白蛋白、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。狭窄组患者的中性粒细胞与淋巴细胞比率值为3.92±1.31,明显高于非狭窄组(2.87±0.96),血清铁蛋白和NE水平分别为(296.36±129.18)、(431.73±212.42)ng/mL,明显高于非狭窄组[(142.42±69.37)、(192.51±132.39)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。血液透析患者动静脉内瘘发生狭窄与NLR、SF和NE水平呈现正相关(r=0.297、0.265、0.313,P<0.05);NE水平诊断血液透析患者动静脉内瘘发生狭窄的ROC曲线下面积明显大于NLR、SF。NLR、SF、NE高表达是血液透析患者动静脉内瘘发生狭窄的危险因素。结论血清中NE水平可能与血液透析患者动静脉内瘘狭窄的发生有相关性,可作为炎症指标来预测动静脉内瘘狭窄。

清金化痰汤对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶及黏蛋白基因表达的影响

目的探讨清金化痰汤调节慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠气道黏液高分泌的作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、清金化痰汤组与克拉霉素组,每组10只。除正常组外,其余3组均采用气管内注入脂多糖和烟熏复合法建立COPD模型,分别给予生理盐水、清金化痰汤、克拉霉素灌胃,连续30 d。实验第31日,处死大鼠提取肺组织,每组随机选取6只,采用实时荧光定量PCR检测肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、表皮生长因子(EGFR)、黏蛋白5AC(MUC5AC)基因表达。结果模型组大鼠肺组织NE、MUC5AC m RNA表达较正常组升高;与模型组比较,清金化痰汤组、克拉霉素组NE、MUC5AC m RNA表达均显著降低,清金化痰汤组NE、MUC5AC m RNA表达较克拉霉素组显著降低;清金化痰汤组EGFR m RNA表达较模型组显著降低。结论清金化痰汤通过调节NE/EGFR/MUC5AC信号转导通路,抑制气道黏液高分泌。

中性粒细胞弹性蛋白酶——神经保护的作用新靶点

许多种组织、器官损伤(尤其缺血/再灌注损伤)后,中性粒细胞浸润,释放大量的弹性蛋白酶加重这些组织的损伤。脑缺血、脑出血、脑外伤等导致的脑损伤都伴有中性粒细胞向脑组织的浸润。因此,中性粒细胞所释放的弹性蛋白酶在脑损伤中可能也具有重要作用。该文对中性粒细胞弹性蛋白酶在脑损伤中的作用及作用机制进行了综述。

中性粒细胞弹性蛋白酶在男性生殖道感染诊断中的意义

中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE)是一种中性蛋白酶。近年来 ,它在诊断男性生殖道感染中的作用日益受到人们的重视。它不仅对于筛选由奈瑟双球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、毛滴虫等感染有特异的诊断价值 ,对白细胞精子症、睾丸鞘膜炎等多种疾病也有较高的特异性。

中性粒细胞、白介素-8和弹性蛋白酶在急性毛细支气管炎发病中的作用

目的探讨急性毛细支气管炎(毛支)患儿气道中中性粒细胞、白介素8(IL-8)和弹性蛋白酶(NE)在发病中的作用及相互关系。方法2006年11月至2007年4月常州儿童医院诊断为急性毛支的41例患儿和对照组8例为研究对象,其中急性毛支根据入院lowell评分为重度组(≥10分,10例)和轻度组(<10分,31例),所有毛支患儿在急性期和恢复期以及对照组进行诱导痰的细胞分类检查和ELISA方法检测IL-8和弹性蛋白酶。结果急性毛支患儿诱导痰细胞中中性粒细胞明显升高,急性发作期诱导痰中性粒细胞数明显高于缓解期和对照组,毛支患儿缓解期中性粒细胞数明显高于对照组(P均<0.05);急性毛支患儿诱导痰中IL-8、弹性蛋白酶浓度与对照组比较有明显升高(P均<0.01)。结论中性粒细胞在急性毛支发病中扮演重要角色,IL-8趋化中性粒细胞聚集于气道,中性粒细胞产生和释放弹性蛋白酶,三者相互影响,共同参与急性毛支的发病。

精液中性粒细胞弹性蛋白酶的研究进展

影响男性生殖的因素很多,生殖道感染是其中重要因素之一。精液中性粒细胞弹性蛋白酶(polymor-phonuclear neutrophil elastase,PMNE)作为男性生殖道感染尤其是隐性感染诊断的重要炎症指标,对男性生育能力有潜在的负面影响。精液PMNE浓度不仅与精液白细胞数、精浆ROS水平显著相关,而且与其他炎症相关细胞因子如IL-6、IL-8、TNF-α水平等密切相关。PMNE对精子质量亦有影响,可以削弱精子活力,影响精子形态和DNA完整性等。精液中存在PMNE抑制剂,可与PMNE形成复合物,两者比例的失衡可以促进慢性炎症的发生,进而可能导致男性不育。检测精液PMNE的方法主要为酶免疫分析法,但检测方法仍需标准化,诊断标准尚需统一。

中性粒细胞弹性蛋白酶在慢性阻塞性肺疾病发病中的作用

目的:探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)在慢性阻塞性肺病(COPD)发病中的作用及其相互关系。方法:收集COPD患者104例,其中急性发作期(发作组)53例、稳定期(稳定组)51例;健康查体者(对照组)50例,测定并比较3组血常规和血清NE、α1-AT含量及肺功能指标。结果:3组白细胞(WBC)、中性粒细胞比例(GRA)及NE差别均有统计学意义(P<0.01),均是发作组>稳定组>对照组,发作组与稳定组的α1-AT差别无统计学意义。COPD患者血清α1-AT与NE水平呈正相关(r=0.416,t=3.861,P<0.01)。COPD稳定期患者血清α1-AT水平与残气量/肺总量(36.49±7.23)%呈负相关(r=-0.508,t=4.212,P<0.01),而与第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(68.63±10.39)%无明显相关性(r=0.268,t=1.987,P>0.05)。结论:COPD急性发作期NE水平升高、α1-AT水平相对不足是造成肺部炎症的重要原因。

儿童重症肺炎临床特点及其中性粒细胞弹性蛋白酶检测的意义

目的:研究儿童重症肺炎的临床特点,探讨中性粒细胞弹性蛋白酶在儿童重症肺炎中的检测意义。方法:分重症肺炎(n=27)和非重症肺炎(n=94)两组,统计分析每组发热、咳嗽、肺部啰音持续时间,影像学检查的变化。采用瑞氏染色法计数外周血异型淋巴细胞百分比,采用酶联免疫吸附法测定外周血中性粒细胞弹性蛋白酶表达量。结果:重症肺炎组发生肺不张5例,并发心力衰竭8例,并发呼吸衰竭8例,并发中毒性脑病4例。重症肺炎组发热时间(13.5±5.1)d、咳嗽时间(15.1±3.2)d、肺部湿啰音持续时间(12.2±2.3)d,明显长于非重症肺炎组(t=2.346,2.457,2.578,均P<0.05);重症肺炎组感染的病原有肺炎链球菌、呼吸道合胞病毒、腺病毒等。重症肺炎组感染病毒的患儿,都有外周血涂片异型淋巴细胞升高(8.1±1.2)%;治疗前12例重症肺炎检测了外周血中性粒细胞弹性蛋白酶为(127.6±12.5)ng/mL,较非重症肺炎组显著升高[(75.4±6.4)ng/mL,t=3.047,P<0.05]。结论:重症肺炎是影响患儿生命健康的严重疾病,检测中性粒细胞弹性蛋白酶对判断肺炎严重程度有临床参考价值。

清金化痰汤对COPD模型大鼠肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶及黏蛋白5AC表达的影响

目的探讨清金化痰汤调节慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道黏液高分泌的作用机制。方法 40只清洁级Wistar大鼠随机分为空白对照组(A)、模型组(B)、清金化痰汤组(C)与克拉霉素组(D)。B、C、D组大鼠均给与气道内滴注脂多糖(LPS)联合烟熏的方法建立慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌模型。B、C、D组连续30 d分别给予生理盐水、清金化痰汤、克拉霉素灌胃,正常组正常喂养。实验第31天,处死大鼠,提取肺组织。每组随机选取6只,采用实时荧光定量PCR检测肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、黏蛋白5AC(MUC5AC)基因表达,阿尔新兰-过碘酸雪夫法观察气道上皮杯状细胞增生,免疫组化法检测肺组织及气道上皮NE、MUC 5AC蛋白表达。结果模型组NEm RNA、MUC 5AC m RNA表达、杯状细胞数目、肺组织中NE及MUC5AC表达均较空白对照组显著升高;清金化痰汤组、克拉霉素组MUC 5ACm RNA、杯状细胞数目、肺组织中MUC 5AC均较模型组显著降低;清金化痰汤组NEm RNA、MUC 5ACm RNA、肺组织气道上皮NE表达较克拉霉素组降低;清金化痰汤组在杯状细胞增生、肺组织气道上皮MUC 5AC表达与克拉霉素组无差异。结论清金化痰汤可能通过调节NE/MUC 5AC途径,抑制慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌。

蛋白酶激活受体2在人中性粒细胞弹性蛋白酶诱发气道黏液速发式分泌中的作用及机制

目的研究蛋白酶激活受体2(protease-activated receptor 2,PAR2)在人中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)诱发气道黏蛋白(mucin,MUC)5AC速发式分泌中的作用及机制。方法用Western blot法检测对照组及NE刺激组Calu-3细胞中PARs的表达。NE分别干预野生型(空白对照组)及转染PARs siRNA的Calu-3细胞,通过ELISA法检测其上清液中MUC5AC的表达,采用Fluo-3AM荧光探针法检测细胞内Ca2+浓度、Western blot法检测胞膜及胞质中蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)水平。NE分别刺激空白对照组、转染PAR2siRNA组、细胞内钙离子螯合剂BAPTA-AM预处理组及PKC抑制剂Chelerythrine预处理组,再通过ELISA法检测其上清液中MUC5AC浓度、细胞免疫荧光法测定细胞质内滞留的MUC5AC。结果 Calu-3细胞系中PAR1、PAR2、PAR3蛋白均呈阳性表达,其中以PAR2为主,而PAR4则呈近似阴性表达。NE刺激Calu-3细胞,其PAR1、PAR3表达较空白对照组无明显变化(P>0.05),而PAR2则较空白对照组明显增加(P<0.05)。NE刺激野生型Calu-3细胞,其上清液中MUC5AC分泌量及细胞内Ca2+浓度较刺激前明显增加(均P<0.05);而转染PAR2siRNA组,其MUC5AC分泌量增加不明显(P>0.05),细胞内Ca2+浓度升高水平也不及空白对照组(P<0.05)。同时,空白对照组PKC主要存在于胞质中,当给予NE刺激以后,PKC被引导至胞膜。转染PAR2siRNA,细胞内Ca2+螯合剂BAPTA-AM及PKC选择性抑制剂Chelerythrine预处理,均可部分削弱NE刺激后细胞上清液中MUC5AC水平的升高(均P<0.05)。结论 NE刺激可导致Calu-3细胞PAR2表达上调,并通过激活PAR2、增加细胞内Ca2+浓度、PKC激活及膜移位导致MUC5AC的速发式分泌。