幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白的研究进展

幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白是 15 0 0 0 0u蛋白质 ,具有多种生物学功能 :①作为抗原能激发宿主产生特异性免疫反应 ;②对白细胞具有趋化、激活作用 ;③介导免疫粘附及介导幽门螺杆菌粘附、定植胃粘膜 ;④激活人白细胞NADPH氧化酶 ,产生活性氧中间产物。结论 :幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白是参与幽门螺杆菌致病机制的重要因子 ;

幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白基因napA克隆及序列分析

目的 :从幽门螺杆菌 (H .pylori)中克隆中性白细胞激活蛋白基因napA并构建重组载体。方法 :提取H .pylori郑州分离株MEL HP2 7基因组DNA作模板 ;根据H .pyloriJ99全基因组序列设计napAPCR引物 ,高保真酶扩增napA片断 ;限制性内切酶切PCR产物和pNEB193空质粒 ,T4DNA酶连接酶切产物 ,重组质粒转化E .coliTB1工程菌 ,蓝白斑试验筛选阳性克隆 ;提取质粒经酶切鉴定后测序并利用生物学软件进行序列分析。结果 :DNA限制性内切酶可从重组质粒pNEB napA的EcoRⅠ和SalⅠ位点之间切出一个 4 35bp的DNA片断 ,测序结果与J99napA同源性为 96 .5 % ,与H .pylori其他菌株的同源性为 92 %～ 97%。结论 :成功构建H .pylori中性白细胞激活蛋白基因的重组质粒pNEB napA ;序列分析表明HP napA是一类高度保守的原核型基因 ,可作为H .pylori疫苗候选基因。