基于抑制中性粒细胞呼吸爆发效应的复方丹参缓释片体外释放行为评价研究

目的从效应动力学角度研究复方丹参缓释片体外释放行为过程,探讨并阐释复方丹参缓释片体外释放行为特征。方法基于中性粒细胞呼吸爆发效应的生物化学发光检测技术,在规定的时间点对复方丹参缓释片体外释放样品进行测定,以表征体外释放行为的变化。结果复方丹参缓释片体外可缓释12 h,基本达到缓释制剂设计的要求。结论借鉴效应动力学的评价方法,成功构建了一种基于中性粒细胞呼吸爆发效应的生物化学发光检测技术,为中药复方缓控释制剂的体外释放评价提供新的借鉴和参考。

中性粒细胞呼吸爆发的产生机制及其炎症效应

中性粒细胞的呼吸爆发功能在宿主防御及炎症反应中起着重要的作用。该反应起始于吞噬小体表面的NADPH氧化酶的活化 ,它将O2 还原成O-2 ,随后O-2 经歧化作用转变成H2 O2 。在有Cl-的情况下 ,髓过氧化物酶可以催化H2 O2 生成HOCl。HOCl是高效的杀菌剂 ,通过与邻近的巯基、氨基反应发挥其杀伤毒性。呼吸爆发在清除微生物的同时也会对机体正常组织造成损伤 。

麦冬类药材皂苷元含量与其抑制中性粒细胞呼吸爆发的相关性

目的:分析麦冬类药材总皂苷元含量与抑制中性粒细胞呼吸爆发作用的相关性,考察通过总皂苷元含量预测药材的药效活性。方法:采用HPLC-ELSD法测定麦冬类药材鲁斯可皂苷元及薯蓣皂苷元含量;采用化学发光法测定对中性粒细胞呼吸爆发的作用活性。结果:不同种麦冬类药材在皂苷元组成及含量上均有区别,其总苷元含量从高到低依次为:短葶山麦冬、川麦冬和湖北麦冬、杭麦冬;在活性作用方面:麦冬类药材对中性粒细胞呼吸爆发呈抑制作用,其中短葶山麦冬对中性粒细胞的呼吸爆发具有较强的抑制作用。经分析不同种麦冬类药材的总皂苷元含量与其对中性粒细胞呼吸爆发的抑制作用,总皂苷元含量与抑制中性粒细胞呼吸爆发作用呈相关性。结论:麦冬类药材可根据总皂苷元含量预测对中性粒细胞呼吸爆发的抑制活性,总皂苷元含量是反映药材抗炎活性的一个很好的综合指标,该研究为麦冬类药材的品质评价提供了科学依据。

山里红叶多元酚类成分对大鼠中性粒细胞呼吸爆发的抑制作用

目的:比较山里红(Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.)叶中多元酚类成分对大鼠中性粒细胞呼吸爆发的抑制活性。方法:以佛波豆蔻酸乙酯(PMA)为刺激剂,鲁米诺为发光剂,通过化学发光法比较山里红叶中11种主要多元酚类成分对大鼠中性粒细胞呼吸爆发的抑制作用。结果:11种多元酚类成分对大鼠中性粒细胞呼吸爆发表现出不同的抑制活性。黄酮类成分活性最强,其次是绿原酸,表儿茶素活性最弱。黄酮类成分既可抑制大鼠中性粒细胞呼吸爆发,又可清除呼吸爆发后产生的自由基;而绿原酸则对呼吸爆发的抑制作用较弱,主要是直接清除呼吸爆发产生的氧自由基;表儿茶素则只能清除呼吸爆发产生的自由基,对呼吸爆发本身没有抑制作用。结论:山里红叶中多元酚类成分对大鼠中性粒细胞呼吸爆发具有明显的抑制活性,其中主要活性成分为黄酮类化合物。

喜炎平与头孢唑啉联合应用增强小鼠中性粒细胞的呼吸爆发但不影响其趋化功能

目的研究喜炎平与头孢唑啉联合应用对小鼠外周血中性粒细胞的趋化功能和呼吸爆发能力的影响。方法将10只正常小鼠作为空白组;将金黄色葡萄球菌感染后的40只小鼠分为模型组、喜炎平组、头孢唑啉组及喜炎平联合头孢唑啉组(联合处理组)。空白组与模型组经腹腔给予生理盐水,其他组经腹腔依次给予喜炎平、头孢唑啉、喜炎平联合头孢唑啉。采用TranswellTM小室法检测小鼠外周血中性粒细胞趋化功能;将小鼠外周血中性粒细胞与二氢罗丹明共同孵育,再用佛波酯刺激中性粒细胞,诱导其活化,产生活性氧,活性氧将胞质中的二氢罗丹明氧化为罗丹明,用流式细胞仪检测细胞的荧光强度,判定中性粒细胞呼吸爆发能力。结果经喜炎平、头孢唑啉和喜炎平联合头孢唑啉处理后,各组小鼠外周血中性粒细胞的趋化指数无显著性差异。空白组、喜炎平组、联合处理组小鼠外周血中性粒细胞的细胞活化率均明显高于模型组和头孢唑啉组;空白组和联合处理组细胞活化率无显著性差异,但明显高于喜炎平组;空白组、喜炎平组、联合处理组小鼠外周血中性粒细胞的刺激指数均明显高于模型组和头孢唑啉组,且3个处理之间无显著性差异;模型组和头孢唑啉组2个指标之间均无显著性差异。结论喜炎平与头孢唑啉联合应用可通过增强中性粒细胞的呼吸爆发能力,提高机体的抗菌功能,但对中性粒细胞的趋化作用无明显影响。

氯胺酮和丙泊酚对中性粒细胞呼吸爆发功能的影响

目的 研究氯胺酮、丙泊酚在体外对佛波酯 (PMA)刺激后人中性粒细胞 (PMN)呼吸爆发功能的影响。方法 采健康人静脉血 (n =5 ) ,分为对照组 (C组 ) ,氯胺酮 1、2、3组 (K1、K2、K3组 ) ,丙泊酚 1、2、3组 (P1、P2、P3组 ) ,氯胺酮、丙泊酚终浓度分别为 0、3、30、30 0 μg/ml和 5、5 0、5 0 0 μg/ml,以全血法测定PMN呼吸爆发强度 (DHR标记 ,流式细胞法 )。 结果 氯胺酮、丙泊酚均可剂量依赖性地抑制PMA刺激后PMN的呼吸爆发强度 ,P2、K3、P3组呼吸爆发强度均非常显著地低于C组 (P <0 0 1) ,丙泊酚的抑制效应又强于对应浓度的氯胺酮 (P2vsK2 ,P <0 0 5 ;P3vsK3,P <0 0 1)。结论 氯胺酮、丙泊酚抑制PMN呼吸爆发的作用 ,可能会影响到围术期病人的免疫状态 。

热应激反应对中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响

目的观察体外诱导热应激反应对中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响。方法18例健康者中性粒细胞每例随机分为三份。其中1份作为对照组,其余2份分别应用热休克或氯化镉诱导热应激反应后与培养液共同孵育,并分别作为热休克组和氯化镉组。于热应激反应诱导后0、2、3、4、6 h,运用PCR技术和流式细胞仪分别测定各组中性粒细胞热休克蛋白(HSP70)的表达及呼吸爆发功能;于热应激反应后24 h,应用荧光染色法和流式细胞仪DNA倍体分析法观察、检测细胞凋亡情况。结果热休克组和氯化镉组热应激诱导后各时段中性粒细胞HSP70表达及24 h的细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.01);热休克组和氯化镉组热应激诱导后4 h和6 h时,中性粒细胞活性氧生成明显低于对照组(P<0.01)。结论热应激反应促进中性粒细胞凋亡并减少活性氧释放。提示热应激反应可能参与机体的抗炎作用机制。

五味子酚对大鼠中性粒细胞呼吸爆发的影响

目的 研究五味子酚对大鼠中性粒细胞呼吸爆发时自由基生成和溶酶体酶释放的影响。方法 分别用紫外分光法、荧光分光法和同位素法测定该细胞自由基生成、溶酶体酶释放、胞浆钙离子和环磷酸腺苷 (cAMP)含量。结果 五味子酚能抑制中性粒细胞超氧阴离子、过氧化氢、脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)以及一氧化氮的生成 ,减少溶菌酶和 β 葡糖醛酸苷酶的释放 ,而且 ,还能拮抗FMLP引起的细胞胞浆钙离子的增加 ,进一步增强FMLP引起的胞浆cAMP的增加。结论 五味子酚可能通过降低细胞内钙离子浓度和 /或升高胞浆cAMP的含量而抑制中性粒细胞呼吸爆发所导致的上述变化。

单克隆抗体HIM_(82)对中性粒细胞呼吸爆发的降调节作用

本研究用单抗HIM82对中性粒细胞（PMN）呼吸爆发的早期调控，发现HIM82（30μg／ml）对佛波酯（PMA）激活的PMN产生的O2-、H2O2分别可下调至（44．00±8．9）％（n=8，P＜0．01）和（65．16±15.41）％（n=8，P＜0．01），对因呼吸爆发产生的活性氧物质（reactiveoxygenspecies，ROS）引起质膜中性内肽酶（NEP）的纯化作用（inactivation）[活性下降（43．29±9．41）％，n＝8，P＜0．01]有防护作用[活性恢复至（6648±15.53）％，n=8，P＜0．05]。结果表明该单抗对PMA激发PMN呼吸爆发产生O2-、H2O2有明显的降调节作用，也表明质膜上相应分化抗原分子对PMN功能特别是对激活呼吸爆发的机构有重要影响。

大鼠内毒素血症时外周血及肺泡内中性粒细胞死亡方式及呼吸爆发(英文)

本研究观察大鼠内毒素血症时肺组织中及外周血多形核中性粒细胞 (PMN)凋亡、坏死及功能改变的差异。采用Wistar大鼠 2 0只 ,腹腔注射LPS(O55B5,5mg/kg)造成内毒素血症 ,给予LPS后 2 ,4,8,1 2小时 (每组 5只动物 )取血及支气管肺泡灌洗 ,密度梯度法分离PMN ,用流式细胞仪测定凋亡和坏死比例以及呼吸爆发功能的改变 ,同时采用 5只大鼠作为正常对照。结果显示 ,内毒素血症时外周血和支气管肺泡灌洗液中PMN凋亡细胞比例相似。但与对照相比 ,外周血PMN坏死比例明显增加 ,呼吸爆发能力明显受抑 ,而支气管肺泡灌洗液PMN坏死比例显著减少 ,呼吸爆发能力显著增强。结论 :在内毒素血症时 ,扣押于肺组织中的PMN在凋亡和坏死上表现出与外周血PMN不同的改变 ,其结果是组织中PMN存活增加 ,并持续处于活化状态 。

氯胺酮抑制内毒素休克大鼠中性粒细胞的CD11b表达和呼吸氧爆发

目的观察氯胺酮对内毒素休克大鼠中性粒细胞CD11b表达和呼吸氧爆发的影响。方法腹腔内注射内毒素(10mg/kg)复制脓毒症模型。30只成年雄性SD大鼠,随机分为5组:生理盐水组;内毒素刺激组;内毒素刺激+氯胺酮(5mg.kg-1.h-1)治疗组;内毒素刺激+氯胺酮(25mg.kg-1.h-1)治疗组;内毒素刺激+氯胺酮(50mg.kg-1.h-1)治疗组。在1、4、6h使用流式细胞仪检测中性粒细胞CD11b和呼吸氧爆发。结果与生理盐水组相比内毒素刺激后中性粒细胞的CD11b的表达和呼吸氧爆发明显增加(P<0.01)。与单纯内毒素刺激组相比,使用氯胺酮治疗组CD11b表达和呼吸氧爆发明显减少(P<0.01)。结论氯胺酮抑制内毒素休克大鼠中性粒细胞的CD11b表达和呼吸氧爆发。

哮喘患儿中性粒细胞呼吸爆发功能变化及其与细胞内胞浆游离钙离子的关系

哮喘的发病机理迄今未完全阐明。近年来人们认识到气道炎症是哮喘的基础病理改变和发病机理的中心环节,由此而引发气道高反应性和气道阻塞,从而出现一系列的临床症状。中性粒细胞(PMN)是人类主要的炎症细胞之一。体外研究表明它的激活、肺浸润均与气道高反应性密切有关。

血小板第四因子PF4对人中性粒细胞粘附性与呼吸爆发的调节作用

目的研究血小板第四因子PF4对人中性粒细胞Np功能的影响。方法用结晶紫染色、免疫荧光标记、PKC试剂盒测定、NBT法及高香草酸HVA荧光分光光度法比较对照组与PF4作用的实验组在趋化因子刺激前后,PF4对中性粒细胞总粘附性、整合蛋白CD11b的表达、PKC水平及呼吸爆发作用产生活性氧物质reactiveoxygenspeciesROSO2·-、H2O2等的影响。结果PF4对静息中性粒细胞总粘附性有轻度的增强作用使总粘附性上调了12.24%P<0.01,而对整合蛋白CD11b的表达、呼吸爆发产生的ROSO2·-、H2O2则无影响。进一步研究发现PF4使经趋化三肽(FMLP)活化的中性粒细胞的总粘附性下调17.47%P<0.01;使经趋化三肽(FMLP)活化的中性粒细胞的整合蛋白CD11b的表达下调18.84%P<0.01;使经佛波酯(PMA)活化的中性粒细胞的呼吸爆发作用产生的O2·-、H2O2分别下调了50.29%P<0.01、226.53%P<0.05。研究同时发现PF4对静息及活化的中性粒细胞的PKC水平均无影响。结论首次证明PF4与其它经典的趋化因子不同,是中性粒细胞活化的一个负调节因子,对中性粒细胞功能主要起降调节的作用。这种降调节作用不是通过PKC信号转导途径完成的。

慢性高原红细胞增多症患者中性粒细胞吞噬能力及呼吸爆发功能

目的通过与高原地区健康人相比较,探讨青海慢性高原红细胞增多症(HAPC)患者外周血多形核中性粒细胞(PMN)的吞噬能力及呼吸爆发功能。方法①用全自动血细胞分析仪检测HAPC患者红细胞数、血红蛋白及白细胞分类数等;②用流式细胞仪检测中性粒细胞对FITC标记细菌的吞噬能力;③用双乙酰基二氯荧光素(DCFH-DA)荧光探针法检测中性粒细胞呼吸爆发功能。结果①HAPC患者的红细胞数、血红蛋白及红细胞压积均高于健康组,但白细胞百分率、中性粒细胞百分率、淋巴细胞百分率及单核细胞百分率与健康组相比无明显差异;②机体在缺氧状态下,PMN吞噬能力及呼吸爆发能力降低,HAPC患者尤为明显。结论高原缺氧在一定程度上降低PMN的吞噬和杀伤能力。

低强度He-Ne激光与丹参注射液联用对牛中性粒细胞呼吸爆发的影响

Neutrophils can generate oxygen free radicals by respiratory burst. Oxygen free radicals injury is one of the important reasons of ischemia and anoxemia. Low intensity He-Ne laser irradiation combined with Salvia miltiorrhiza injection(SM) can treat ischemia and anoxemia well in clinic, but the mechanism remains obscure. Primary study on cellular level is needed. In the paper, the effects of low intensity He-Ne laser irradiation, SM, and the combination of low intensity He-Ne laser irradiation and SM on the respiratory burst of bovine neutrophils are examined, respectively. In the study, He-Ne laser, SM or the combination of He-Ne laser and SM all can inhibit the respiratory burst of neutrophils evidently. The effect of the combination of laser and SM is more marked than that of only laser or SM. These results can help to understand the mechanism of ischemic injury.

EHFV触发中性粒细胞呼吸爆发的探讨

通过移植并改进ＥＬＩＳＡ技术，用来检测中性粒细胞呼吸爆发时释放的Ｈ＿２Ｏ＿２量，发现ＥＨＦＶ触发中性粒细胞呼吸爆发能力明显强于正常组及ＣｏｎＡ刺激组（Ｐ＜０．０１），抗ＥＨＦＶ抗体可明显减弱其活病毒刺激中性粒细胞释放Ｈ＿２Ｏ＿２的能力（Ｐ＜０．０５）。经改进的该方法检测Ｈ＿２Ｏ＿２量灵敏度高，快速简便。

右美托咪定对人中性粒细胞凋亡和呼吸爆发功能的影响

目的:观察右美托咪定(Dex)对离体培养的人中性粒细胞(PMN)凋亡率和呼吸爆发功能的影响。方法:取健康人外周静脉血,血浆-Percoll不连续密度梯度离心法分离出PMN,分为对照组,1 ng/m L Dex组,10ng/m L Dex组和100 ng/m L Dex组,离体培养24 h,取培养2 h和24 h的PMN悬液,检测caspase-3活性、PMN凋亡率和呼吸爆发功能。结果:与对照组比较3种不同浓度的Dex与PMN孵育2 h,PMN的caspase-3活性、PMN凋亡率和呼吸爆发功能没有统计学差异;孵育24 h,与对照组比较,1 ng/m L Dex组PMN caspase-3活性、PMN凋亡率和呼吸爆发功能没有差异,而10 ng/m L Dex组和100 ng/m L Dex组PMN caspase-3活性增强、凋亡率增加和呼吸爆发功能下降;与10 ng/m L De组比较,100 ng/m L Dex组PMN caspase-3活性增强、凋亡率增加和呼吸爆发功能下降。结论:临床常用剂量的Dex(血药浓度<1 ng/m L)不影响PMN的凋亡率和呼吸爆发功能,不影响机体的抗感染能力;而大剂量的Dex与PMN孵育一定时间(>24 h)可促进PMN凋亡,降低其呼吸爆发功能。

缺血再灌注中中性粒细胞的呼吸爆发与组织氧化损伤关系研究现状

1955年Sewell发现，结扎狗冠状动脉一段时间后，恢复血流，实验动物因严重室颤而死；1967年，Bulkley与Hutchins发现冠状动脉搭桥后的病人常发生心肌细胞反常性坏死；1981年Greenberg证实，猫小肠缺血3小时后再恢复血流，粘膜损伤严重。由此可见，缺血组织在恢复血流时常伴随着严重的损伤，这种损伤往往同中性粒细胞呼吸爆发所导致的氧化损伤密切相关。现在一般将缺血／再灌注性损伤定义为：缺血的组织、器官经恢复血液灌注后不但不能使其正常功能和结构恢复，反而加重其功能障碍和结构损伤的现象。

中性粒细胞呼吸爆发、脱颗粒的信号转导途径

作为重要的免疫细胞 ,中性粒细胞 (PMN)主要通过呼吸爆发和脱颗粒杀灭病原体。但激活失控的PMN会大量释放氧自由基和多种蛋白水解酶 ,破坏组织细胞 ,是造成炎性损伤、系统性炎症反应综合征 (SIRS)甚至多器官功能不全综合征 (MODS)的重要原因。已知的调控PMN呼吸爆发和脱颗粒的细胞内信号转导途径包括 :受体酪氨酸激酶途径、磷脂酶 PKC途径、cAMP PKA途径、NO cGMP PKG途径和PKB途径。

运动诱导中性粒细胞的呼吸爆发及其氧化应激损伤——运动性疲劳的自由基学说的活性氧产生特点及其途径之一

目的:探讨运动引起中性粒细胞呼吸爆发与氧化应激及其过氧化损伤的关系,从而为运动引起的过氧化损伤导致的运动性疲劳的诊断及其防御提供理论根据。方法:通过文献法及逻辑推理法分析运动诱导中性粒细胞的呼吸爆发过程及其产生的活性氧对机体的氧化损伤导致的运动性疲劳的特点。结果:运动激活中性粒细胞NADPH氧化酶介导产生活性氧增多导致中性粒细胞的氧化应激反应,而体内活性氧增多引起的运动性疲劳体内的发生机理是运动诱导的中性粒细胞氧化应激导致的过氧化损伤所致。结论:运动引起中性粒细胞的氧化应激和过氧化损导致免疫细胞功能降低及其运动性疲劳发生的主要因素,可通过抗氧化剂、谷氨酰胺补充、NADPH氧化酶的抑制等手段进行防护。