HMGB1调控IL-17分泌与中性粒细胞性哮喘的研究进展

哮喘是一种慢性炎症性疾病,根据不同炎症细胞类型分为Th2型和非Th2型。非Th2型哮喘的特征是类固醇激素抵抗,以中性粒细胞性哮喘为主。高迁移率族蛋白1(HMGB1)是一种属于警报素家族的染色质结合蛋白,作为促炎介质参与急性和慢性免疫疾病的发生发展,是非Th2型哮喘生物标志物。本文综述HMGB1调控IL-17分泌与中性粒细胞性哮喘的关系。

雷公藤甲素对中性粒细胞性哮喘小鼠肺泡灌洗液中WBC和EOS的影响

目的:初步探讨雷公藤甲素对中性粒细胞哮喘小鼠肺泡灌洗液中WBC和EOS的影响。方法:采用卵清蛋白(OVA)联合脂多糖(LPS)致敏方法建立支气管哮喘小鼠模型,BALB/c小鼠32只随机分为中性粒细胞性哮喘组(NA组)、中性粒细胞性雷公藤甲素干预组(TLN组)、中性粒细胞性地塞米松干预组(DXN组)和正常对照组(NC组)各8只,血球计数板计算各组小鼠肺泡灌洗液(BALF)中WBC及EOS的总数目;涂片瑞士染色查看炎症细胞浸润情况。结果:DXN组、TLN组小鼠BALF中WBC总数、EOS总数及其浸润情况均较NA组明显下降(均P<0.05),但均明显高于NC组(均P<0.05),DXN组上述各指标均较TLN组明显升高(均P<0.05)。结论:雷公藤甲素可减少BALF中WBC及EOS总数,抑制肺部WBC、EOS浸润,缓解中性粒细胞性哮喘气道炎症。

转录因子ROR-γt与Th17介导的中性粒细胞性哮喘

目的:探讨ROR-γt对Th17介导的中性粒细胞性哮喘信号通路的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组与地塞米松组,每组8只。用鼻腔滴入脂多糖、腹腔注射卵白蛋白及第15天起雾化吸入卵白蛋白引喘共14次的方法制作中性粒哮喘模型。地塞米松组于实验开始后第15天起,按0. 5 mg/kg予以腹腔注射地塞米松,每日一次,共14次。统计各组肺组织病理形态学变化(HE染色)、BALF液白细胞总计数与分类计数、流式细胞术测脾及外周血Th17含量、酶联免疫法测BALF中的TGF-β、IL-6、IL-17含量,免疫组化法及免疫印迹法测ROR-γt蛋白表达,逆转录聚合酶链反应测ROR-γt mRNA的表达。结果:模型组与正常组比较,气道有大量炎性细胞浸润,以中性粒细胞为主(P<0. 01)。BALF液中TGF-β、IL-6、IL-17含量显著增高(P<0. 01);脾与外周血中Th17含量显著增多(P<0. 01);肺组织中ROR-γt蛋白与mRNA的表达亦显著升高(P<0. 01),而地塞米松组与模型组比较,上述指标皆显著降低(P<0. 01)。结论:中性粒细胞性哮喘可能以Th17的增多为主,IL-17是主要的炎性因子,而ROR-γt是促进Th0向Th17分化的关键转录因子;而地塞米松可以抑制ROR-γt,降低IL-17的含量,从而减轻中性粒细胞性哮喘的发作。

白藜芦醇对中性粒细胞性哮喘小鼠肺组织炎症的抑制作用及其机制

目的:探讨白芦藜醇对中性粒细胞性哮喘小鼠肺组织炎症的抑制作用,并阐明其作用机制。方法:选取18只C57BL/6J雌性小鼠,采用脂多糖(LPS)+卵白蛋白(OVA)联合致敏方法建立中性粒细胞性哮喘小鼠模型,随机分为模型组(LPS+OVA组)、白藜芦醇组(Res组,于激发前2h灌胃30mg·kg^(-1)白藜芦醇)和N-乙酰半胱氨酸组(NAC组,于激发前2h灌胃3mmol·kg^(-1) N-乙酰半胱氨酸);同时选取6只同周龄小鼠作为正常对照组(PBS组)。于乙酰甲胆碱雾化期间观察各组小鼠的行为学变化,采用肺功能仪分析小鼠气道高反应(AHR),光学显微镜观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和炎症细胞,HE染色观察各组小鼠肺组织病理形态表现,酶联免疫法(ELISA)检测各组小鼠BALF上清中白细胞介素17(IL^(-1)7)水平,特异性荧光探针DCF-DA染色分析肺组织活性氧(ROS)水平,丙二醛(MDA)试剂盒检测肺组织匀浆中MDA水平。结果:与PBS组比较,LPS+OVA组小鼠Penh值、细胞总数、炎症细胞、气道炎症及评分均明显升高(P<0.05或P<0.01),BALF上清中IL^(-1)7水平明显升高(P<0.01),肺组织内ROS荧光强度明显升高,肺匀浆中MDA水平明显升高(P<0.01)。与LPS+OVA组比较,Res组和NAC组小鼠Penh值、细胞总数、炎症细胞、气道炎症及评分明显降低(P<0.05或P<0.01),BALF上清中IL^(-1)7水平均明显降低(P<0.05),肺组织内ROS荧光强度降低,肺匀浆中MDA水平明显降低(P<0.01)。结论:白藜芦醇能够有效抑制中性粒细胞性哮喘小鼠肺组织中的炎症反应,其机制可能与白藜芦醇抑制体内发生的氧化应激反应有关。

基于VSIG4/NLRP3炎症复合通路探讨异甘草素对中性粒细胞性哮喘小鼠气道炎症的影响

目的探讨异甘草素对中性粒细胞性哮喘小鼠气道炎症的影响及其可能的作用机制。方法用卵清蛋白建立中性粒细胞性哮喘小鼠模型。将Balb/c小鼠随机分为对照组(给予等量的0.9%NaCl处理)、模型组(卵清蛋白建模)、地塞米松组(腹腔注射4 mg·kg^(-1)的地塞米松)、低剂量实验组(腹腔注射100 mg·kg^(-1)的异甘草素)、高剂量实验组(腹腔注射200 mg·kg^(-1)的异甘草素),每组11只。在最后1次雾化激发后的24 h内,检测各组小鼠气道阻力后处死小鼠取支气管肺泡灌洗液及肺组织。用细胞计数板进行总细胞计数;用瑞氏-吉姆萨染色法进行细胞分类计数;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测支气管肺泡灌洗液炎性因子水平;用蛋白质印迹法检测肺组织蛋白表达水平。结果对照组、模型组、地塞米松组、低剂量实验组、高剂量实验组的气道阻力值分别为(0.84±0.08)、(3.34±0.34)、(1.23±0.15)、(2.47±0.19)和(1.54±0.18)cmH_(2)O·s^(-1),白细胞总数分别为(15.03±0.11)、(331.20±26.64)、(38.73±3.28)、(180.35±16.89)和(82.74±10.51)×10^(4)·mL^(-1),白细胞介素17(IL-17)水平分别为(4.79±0.58)、(19.21±2.39)、(6.35±0.81)、(15.96±1.10)和(9.04±0.65)pg·mL^(-1),含V型集和免疫球蛋白结构域4(VSIG4)蛋白表达水平分别为0.67±0.04、0.24±0.04、0.59±0.06、0.37±0.04和0.53±0.05,NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)蛋白表达水平分别为0.24±0.02、0.74±0.07、0.35±0.04、0.65±0.08和0.44±0.03。模型组的上述指标与对照组比较,地塞米松组、低剂量实验组、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论异甘草素可能通过调节VSIG4/NLRP3复合炎性通路,降低气道阻力、抑制炎性介质的释放改善中性粒细胞哮喘小鼠气道炎性。

靶向HMGB1治疗中性粒细胞性哮喘的研究进展

高迁移率族蛋白1(HMGB1)是一种高度保守的核蛋白,在细胞核中参与转录、复制、DNA修复和核小体组装。细胞外HMGB1作为报警蛋白参与各种炎症反应和自身免疫。中性粒细胞性哮喘(NA)是由非2型炎症因子驱动所引起的气道中性粒细胞性炎症,目前缺乏有效的治疗方法。研究表明,HMGB1在中性粒细胞性哮喘诊断和治疗中具有一定的临床价值,可能成为潜在的中性粒细胞哮喘的治疗药物。本文综述了HMGB1的结构与功能、其与受体的相互作用以及在中性粒细胞哮喘靶向治疗中的研究进展,为寻找新的有效的中性粒细胞哮喘治疗药物提供帮助。

中性粒细胞性哮喘与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征共存研究进展

支气管哮喘和阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征是常见的慢性呼吸系统疾病,具有较高的共存倾向,相互促进疾病的发生、发展。阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征睡眠时出现呼吸暂停和低通气,导致频发低氧血症从而诱发中性粒细胞气道炎症,在中性粒细胞性哮喘的疾病进展过程中起重要作用。而哮喘的中性粒细胞性气道炎症导致阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的易感性增加。本文综述了中性粒细胞性哮喘和阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征之间的相关性及关键治疗的研究进展。

定喘汤对中性粒细胞性哮喘小鼠的影响及机制研究

目的探讨定喘汤对中性粒细胞性哮喘(Neutrophilic asthma,NA)模型小鼠的影响及机制。方法将42只雌性C57BL/6小鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、地塞米松组(1 mg·kg^-1)及定喘汤低、中、高剂量组(16.5、33、66 g·kg^-1),每组7只。采用鸡卵清白蛋白(OVA)联合弗氏完全佐剂(CFA)致敏和OVA激发建立NA动物模型。OVA激发前灌胃给药(10 mL·kg^-1),每日1次,连续2 d。末次激发24 h后,检测小鼠气道阻力;对外周血及支气管肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞分类计数;采用苏木精-伊红(HE)染色观察肺脏组织病理学变化及炎性细胞浸润情况;采用ELISA法检测小鼠BALF上清中的白细胞介素17(IL-17)浓度。结果与正常对照组比较,模型组小鼠的气道阻力明显升高(P<0.01);外周血及BALF中的白细胞总数、中性粒细胞明显升高(P<0.01);肺泡及肺组织结构破坏,支气管及血管周围有大量炎性细胞浸润;BALF中的IL-17水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较,定喘汤各剂量组小鼠的气道阻力明显下降(P<0.01);外周血及BALF中的白细胞总数、中性粒细胞数明显减少(P<0.01),气道内炎性细胞浸润减少;BALF中IL-17的水平明显下降(P<0.01)。地塞米松组与模型组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论定喘汤对NA具有治疗作用,可能与其下调IL-17的表达,减少中性粒细胞浸润,减轻气道炎症及气道高反应有关。

中性粒细胞性哮喘与其相关细胞因子

中性粒细胞性哮喘是指临床上具有典型哮喘症状，而气道炎症以中性粒细胞为主的哮喘，中性粒细胞性哮喘与难治性哮喘、重症哮喘、致死性哮喘关系密切。现在越来越多研究证实IL-17、IL-8与中性粒细胞相关的哮喘关系密不可分，其在中性粒细胞性哮喘发病机制中有重要地位。近几年来利用哮喘发病机制中细胞因子作为靶点来进行靶向治疗哮喘已成为未来哮喘治疗研究的主要热点。本文就中性粒细胞相关因子IL-17、IL-8结构和功能进行介绍，并对与中性粒细胞浸润为主的哮喘的关系作一综述。

中性粒细胞性支气管哮喘小鼠模型建立的探索

目的利用不同剂量脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)干预卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发的小鼠,探索中性粒细胞性哮喘(neutrophilic asthma,NA)小鼠模型的建立。方法 80只BALB/c小鼠随机分为正常对照组(A组)、肺损伤对照组(B组:B1～B4)、嗜酸细胞性哮喘模型对照组(C组)、NA模型探索组(D组:D1～D4)。分致敏和激发两阶段建模,致敏阶段:A组PBS腹腔注射及PBS滴鼻,B组PBS腹腔注射及LPS滴鼻,C组OVA腹腔注射,D组OVA腹腔注射及LPS滴鼻;激发阶段:A、B组生理盐水雾化,C、D组5%OVA雾化。通过观察小鼠雾化时的症状、肺组织病理改变,检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)细胞总数及分类计数和血清OVA-sIgE等评价NA小鼠模型建立。结果①D3组小鼠出现类似C组小鼠呼吸急促、大小便失禁等表现。②D3组BALF炎症细胞总数较A组显著升高(P<0.01);D3组中性粒细胞(neutrophil,NEU)百分比(NEU%)较A、C、D1、D2组显著升高(P值均<0.01),嗜酸粒细胞(eosinophil,EOS)百分比(EOS%)较A组显著升高而较C组显著低下(P值均<0.01)。③D3组支气管管壁及肺泡间隔增厚变形,部分断裂,气道黏膜下除了EOS浸润外还存在明显NEU浸润。④D3组血清OVA-sIgE水平显著高于A组而低于C组(P值均<0.05)。⑤D3组IL-4水平显著高于A组(P<0.05),与C组无显著差异(P>0.05);D3组IFN-γ水平显著低于A组(P<0.05),与C组无显著差异(P>0.05)。结论 10μg LPS滴鼻吸入+50μg OVA腹腔注射三次与5%OVA连续激发两周即D3组可成功建立NA小鼠模型。

哮喘患者不同FeNO水平与哮喘炎症表型的关系

目的:探讨哮喘患者不同呼出气一氧化氮(Fe NO)水平与哮喘炎症表型的关系。方法:选取2017年2月至2018年5月在始兴县人民医院就诊的哮喘患者76例作为研究对象,均行FeNO水平检测及诱导痰检查,记录哮喘患者FeNO水平情况,并比较不同FeNO水平炎症表型分布情况。结果:76例哮喘患者中FeNO低水平16例,中水平28例,高水平32例;高水平患者嗜酸性细胞性哮喘所占比例明显高于低水平及中水平患者,差异具有统计学意义(P<0.05);高水平患者寡细胞性哮喘所占比例明显低于低水平及中水平患者,差异具有统计学意义(P<0.05);不同FeNO水平患者混合细胞性哮喘及中性粒细胞性哮喘所占比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:不同FeNO水平差异可表现为不同哮喘临床特征,特别是在诊断嗜酸性炎症中效果显著,但无法作为独立鉴别因素。

悬灸对哮喘大鼠Th2、Th17的免疫调节作用

目的探讨不同类型哮喘相关炎性因子作用机制及悬灸对其机制的影响。方法将75只SD雄性大鼠随机分为正常组(NC组)、中性粒细胞性哮喘模型组(NA组)、嗜酸细胞性哮喘模型组(EA组)、中性粒细胞性哮喘悬灸组(NAD组)、嗜酸细胞性哮喘悬灸组(EAD组),每组15只。制作中性粒哮喘、嗜酸细胞性哮喘模型。悬灸组于实验开始后第15天起开始悬灸治疗,取穴肺俞、脾俞、肾俞、膻中,40min/次,每日1次,共14天。统计各组支气管肺泡灌洗液(BALF)白细胞总计数与分类计数、流式细胞术测脾及外周血T17、T2、T1含量、酶联免疫法测BALF中的白细胞介素17(IL-17)、IL-4、干扰素γ(IFN-γ)含量。结果 NA组、EA组BALF液中白细胞总计数、炎性细胞分类计数、各炎性因子含量、Th细胞皆显著高于NC组(P <0. 01),而NA组的白细胞总计数、中性粒细胞、IL-17、Th17显著高于NA组(P <0. 01),而EA组的嗜酸粒细胞、淋巴细胞、IL-4、IFN-γ、Th2、Th1显著高于NA组(P <0. 01);经悬灸治疗后,NAD组与NA组比较、EAD组与EA组比较白细胞总计数、各炎性细胞计数、各炎性因子含量、Th17、Th2皆显著降低(P <0. 01)。结论中性粒细胞性哮喘的以中性粒细胞的增多为主,可能由Th17介导,产生IL-17致炎因子;而嗜酸粒细胞性哮喘以嗜酸粒细胞、淋巴细胞显著增多为主,由Th2、Th1介导,产生IL-4、IFN-γ炎性因子;而悬灸可以降低炎性细胞因子含量、抑制Th17、Th2的产生,从而减轻中性粒细胞性哮喘、嗜酸粒细胞性哮喘的发作。