卵巢癌细胞株COC1/DDP多药耐药逆转对中性鞘糖脂表达的调控作用

为探讨逆转卵巢癌细胞株的多药耐药性 (MDR)对细胞表面中性鞘糖脂 (N GSLs)表达的调控作用 ,以三苯氧胺 (TAM )和维拉帕米 (VRP)为逆转剂 ,用MTT法分析了TAM、VRP的逆转效应 ,采用改良的Hakamori方法提取、纯化了耐药亚株COC1/DDPMDR逆转前后及亲本株COC1细胞的N GSLs,高效薄层层析(HPTLC)分析了N GSLs的表达。结果显示 ,COC1/DDP和COC1的N GSLs表达有显著差异 ,COC1/DDP的CMH表达较COC1强 ;经TAM、VRP作用后 ,COC1/DDP的耐药性发生逆转 ,CMH表达降低。说明卵巢癌的多药耐药性与中性鞘糖脂CMH相关 ,CMH可能为卵巢癌MDR相关鞘糖脂抗原。

中性鞘糖脂表达在卵巢癌细胞株SKOV_3/Adr多药耐药中的作用

目的 探讨中性鞘糖脂 (N GSLs)表达在卵巢癌细胞株的多药耐药 (MDR)中的作用。方法 利用三苯氧胺(TAM)和维拉帕米 (VRP)为逆转剂 ,运用MTT法分析了TAM、VRP的逆转效应。采用改良的Hakamori方法提取、纯化了耐药亚株SKOV3 /AdrMDR逆转前后及亲本株SKOV3 细胞的N GSLs ,高效薄层层析 (HPTLC)分析了这些N GSLs的表达。结果 SKOV3 /Adr和SKOV3 的N GSLs表达有差异 ,SKOV3 /Adr的CMH (monohexosylceramide ,单己糖神经鞘氨醇 )表达较SKOV3 强。经TAM、VRP作用后 ,SKOV3 /Adr的耐药性发生逆转 ,CMH表达降低。结论 卵巢癌的多药耐药性与中性鞘糖脂相关 ,CMH可能为卵巢癌MDR相关中性鞘糖脂抗原。

CMH为KBv_(200)耐药相关中性鞘糖脂

为了研究耐药细胞株KBv2 0 0 中性鞘糖脂表达的规律 ,采用改良的Hakomori法提取、纯化了KB及其耐药细胞株KBv2 0 0 的中性鞘糖脂 ,行高效薄层层析 ,分析其含量的异同 ;并以糖脂合成抑制剂PPMP抑制KBv2 0 0 中性鞘糖脂的合成 ,观察了其对KBv2 0 0 耐药性的逆转作用。结果发现 ,KBv2 0 0 的CMH和CDH表达较KB强 ,尤以CMH为著 ,PPMP能抑制KBv2 0 0 细胞CMH的合成 ,并能逆转KBv2 0 0 对长春新碱 (VCR)的耐药性。说明CMH为KBv2 0 0 耐药相关中性鞘糖脂 ,抑制耐药细胞CMH的合成可能是逆转肿瘤多药耐药的一种新方法。

一种新的中性鞘糖脂显色方法

为了寻找一种新的简单的中性鞘糖脂显色法 ,作者按改良的Hakomori法纯化组织中性鞘糖脂 ,分别应用传统的二苯胺喷雾法和碘显色法进行显色并比较了两种方法的敏感性。结果显示 ,传统的二苯胺喷雾法显色中性鞘糖脂呈蓝色 ,碘显色法显色呈棕黄色 ,两种方法各组分位置相同 ,但后者较前者敏感、快速、简便。说明碘显色法作为一种新的中性鞘糖脂显色法 ,具有简单、经济、快速、敏感、无毒的优点 ,且可重复显色。

肿瘤相关中性鞘糖脂的实验研究

为了探讨中性鞘糖脂与肿瘤发生、抗原调控、免疫逃避的关系 ,实验系统研究了中性鞘糖脂在胚胎及肿瘤组织中的表达规律及临床意义 ,分析了正常及异常表达的鞘糖脂对肿瘤细胞生长调控、免疫逃避和多药耐药的影响。发现了肿瘤胚胎相关抗原CDH、肿瘤耐药相关中性鞘糖脂CMH和肿瘤抑制因子Globoside ;揭示了抑制糖脂合成及去N 糖基化在逆转肿瘤耐药和肿瘤治疗中的重要意义。

肿瘤耐药相关鞘糖脂CMH对人树突状细胞B7表达的影响

为了探讨肿瘤耐药相关鞘糖脂CMH在耐药肿瘤细胞免疫逃避中的作用 ,用柱层析的方法分离纯化了KBv2 0 0 细胞的耐药相关中性鞘糖脂CMH ,采用流式细胞仪技术检测CMH作用前后人树突状细胞 (DC)B7抗原的表达。结果显示 ,CMH明显地抑制DCB7抗原的表达 。

脑胶质瘤抑制因子Glob-N分子结构的初步鉴定

为分析脑胶质瘤抑制因子N 红细胞糖苷脂 (Glob N)的分子结构 ,运用核磁共振仪及质谱仪分析了人O型血红细胞膜、牛脑及人脑Glob N的结构。结果显示 ,红细胞Glob N为四糖基神经酰胺 ,牛脑与人脑Glob N均为三糖基神经酰胺 ,3种Glob N中神经酰胺所含的碳原子数目不同 ,分别为 2 7、33和 2 6个。说明Glob N为一类中性鞘糖脂 ,其结构与组织来源相关。

PPMP调控KBv_(200)细胞株mdr1基因表达逆转其多药耐药

为研究糖脂合成酶抑制剂苯基棕榈酰胺吗啡丙醇 (DL threo 1 phenyl 2 palmitoylamino 3 morpholi no 1 propanol·HCl,PPMP)对人恶性肿瘤多药耐药细胞株KBv2 0 0 多药耐药mdr1基因的mRNA表达的调控 ,以及PPMP对细胞株KBv2 0 0 的多药耐药性的逆转作用 ,作者应用体外细胞培养技术对细胞株KBv2 0 0 进行PPMP处理 ,用RT PCR技术分析PPMP处理前后细胞mdr1的mRNA表达 ,以流式细胞仪检测PPMP处理前后KBv2 0 0 及其敏感株KB细胞内罗丹明 12 3的药物浓度变化。结果显示 5 μmol/L、15 μmol/LPPMP可部分抑制KBv2 0 0 细胞mdr1mRNA表达 ,2 5 μmol/LPPMP可完全抑制KBv2 0 0 细胞mdr1mRNA表达 ;PPMP可增加KBv2 0 0 细胞内罗丹明荧光强度 ,随着PPMP浓度的增加 ,耐药细胞内的罗丹明荧光强度逐渐增大。提示PPMP对细胞株KBv2 0 0 的多药耐药基因mdr1有抑制作用 ,并可以逆转KBv2 0 0 的多药耐药性 。