原发性抗嗜中性细胞胞质抗体相关性小血管炎肺部受累特点及误诊分析

笔者分析了1999～2004年间6例原发性抗嗜中性细胞胞质抗体（ANCA）相关性小血管炎患者的临床资料，对其肺部的临床表现以及误诊原因进行了总结。

儿童抗中性细胞胞浆抗体相关的急进性肾炎临床分析

目的了解儿童抗中性细胞胞浆抗体（ANCA）相关的急进性肾炎的临床特点。方法对2001～2006年我院诊断的7例ANCA相关的急进性肾炎临床、实验室检查和肾脏活检病理资料进行分析。结果7例病例中，女6例，男1例，平均年龄9岁。主诉不典型，临床症状呈多样性、非特异性。实验室普通检查缺乏诊断特异性：全部病人血沉增快，不同程度的尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）升高，有贫血、血尿、蛋白尿；C3正常3例、c3轻微下降4例；尿蛋白电泳分析呈混合性蛋白尿。实验室特殊检查：7例患儿血髓过氧化物酶（MPO），p-ANCA阳性，1例同时合并蛋白酶3（PR3），c—ANCA阳性。肾活检病理特点：广泛的新月体形成，伴有肾小球毛细血管袢坏死。间质大量炎细胞浸润，间质小血管内皮细胞肿胀，管壁水肿或坏死。免疫荧光肾小球及血管壁无或有少量免疫复合物沉积。3例经甲基泼尼松及环磷酰胺冲击等治疗后追踪观察肾功能正常，血尿、蛋白尿消失或微量。结论该病就诊症状多样、呈非特异性，易误诊。积极开展血清学ANCA检查及肾活检有助于早期诊断，早期治疗，改善预后。

嗜中性细胞微管吸吮的稳定性分析

基于嗜中性细胞流变学的基本液滴模型,同时考虑嗜中性细胞吸吮过程的弹性范围膨胀和非常皮质张力的情形,采用能量最小化原理和无量纲化把临界点定义为稳定性破坏点,把嗜中性细胞的稳定性破坏且开始继续流入微管那一刻的吸压确定为临界吸压,对细胞流入长度、稳定性和吸压临界点进行了详细的理论分析,旨在严格确定细胞流入长度达到稳定状态的临界点特征。

犊牛饲喂经巴氏消毒的初乳对其体内乳铁转运蛋白和嗜中性细胞过氧化物代谢的影响

试验用8头荷斯坦牛公犊,确定饲喂经巴氏消毒的初乳对其血清IgG、乳铁转运蛋白和嗜中性细胞过氧化物浓度的影响。给初生4小时的犊牛饲喂新鲜冷冻的初乳或巴氏消毒处理(76℃,15分钟)的初乳,喂初乳前和喂初乳24小时后采血,分离血清IgG、乳铁转运蛋白和嗜中性细胞过氧化物,用免疫印迹分析、快速免疫测定确定血清中IgG、乳铁转运蛋白、嗜中性细胞过氧化物的浓度。结果表明:饲喂新鲜冷冻初乳的犊牛24小时后血清中IgG、乳铁转运蛋白和嗜中性细胞过氧化物浓度,均高于饲喂经巴氏消毒初乳的犊牛在24小时后血清中IgG、乳铁转运蛋白和嗜中性细胞过氧化物浓度。因此表明:经76℃,15分钟巴氏消毒的初乳影响了蛋白的持续转运与嗜中性细胞过氧化物的功能。

中性粒细胞与淋巴细胞比值、中性细胞与补体C3比值在评估系统性红斑狼疮疾病活动度中的应用

目的探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、中性粒细胞与补体C3比值(NC3R)在评估SLE疾病活动度中的价值。方法收集南昌大学第二附属医院SLE初诊患者共189例,包括高疾病活动度组42例、低疾病活动度组147例。电阻抗法检测中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞,免疫比浊法检测IgG、IgA、IgM、C3、C4水平;比较高、低疾病活动度组间NLR、NC3R及实验室指标的差异,并评价其与SLE活动度评分的相关性;ROC曲线分析其鉴别诊断高、低疾病活动度SLE的价值。结果高疾病活动度组与低疾病活动度组间的NC3R、NLR、C3、N、NC4R水平差异有统计学意义(P<0.05)。SLE活动度评分与NC3R(rs=0.367,P<0.01)、NLR(r_s=0.281,P<0.01)、NC4R(r_s=0.273,P<0.01)具有相关性。NC3R、NLR、NC4R诊断高活动度SLE的AUC分别为0.726、0.718、0.678;敏感性分别为0.690、0.500、0.619,特异性分别为0.741、0.857、0.755。结论 NC3R、NLR可以作为评估SLE疾病活动度的辅助指标。

MALP-2对多形核中性细胞凋亡及其Bax蛋白表达的影响

目的研究Toll样受体(TLR)激动剂巨噬细胞活化脂肽(MALP-2)影响多形核中性细胞(PMN)凋亡及凋亡相关的Bax蛋白的表达水平。方法分离培养正常受试者的外周血PMN,分别加入实验组、阳性对照组和阴性对照组。用流式细胞术检测不同组PMN的凋亡发生率,通过Western blotting技术检测各组PMN Bax蛋白的表达水平。结果 MALP-2降低PMN自发性凋亡的发生率,与阳性对照组和阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);接受MALP-2刺激的PMN表达Bax蛋白低于阳性对照组与阴性对照组(P<0.05)。结论在TLR激动剂诱发的PMN生存效应中,MALP-2可能通过降低PMN胞内Bax蛋白的表达水平来延长PMN的生命期限。

嗜中性细胞气道炎症与儿童OSA严重性相关

香港中文大学的Albert M．Li博士及其同事于1月的《胸》（Thorax，2007；62：75—79．）杂志上报告，有阻塞性睡眠呼吸暂停（OSA）儿童具有以嗜中性粒细胞增加为特征的气道炎症。嗜中性细胞气道炎症的程度与OSA的严重性显著相关。

中性粒细胞CD64指数在布鲁菌病中的临床应用价值

目的 探讨中性粒细胞CD64(nCD64)指数作为一种新型生物标志物在鉴别诊断急性期、慢性期布鲁菌病中的临床应用价值。方法 纳入2021年2月至2023年7月在新疆维吾尔自治区人民医院确诊的急性期布鲁菌病患者38例,慢性期布鲁菌病患者48例,收集患者外周血并通过流式细胞术进行nCD64指数检测,分析nCD64指数与疾病严重程度的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析nCD64指数鉴别诊断急性期、慢性期布鲁菌病的灵敏度和特异度,同时,以虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)作为对照,评价三者临床诊断参考价值。结果 急性期布鲁菌病患者的nCD64指数高于慢性期布鲁菌病患者(U=216.00,P<0.001),且该指数与疾病严重程度呈正相关(r=0.670,P<0.001)。ROC曲线结果显示,nCD64指数用于鉴别诊断急性期、慢性期布鲁菌病的曲线下面积为0.882(95%CI:0.811~0.952,P<0.001),最佳截断值为2.81,其灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为83.3%、81.6%、80.4%、81.9%和82.6%,nCD64指数鉴别诊断的效能明显优于RBPT、SAT两项定性试验。结论 nCD64指数在鉴别诊断急性期、慢性期布鲁菌病中具有良好的灵敏度和特异度,且倾向于反映疾病的严重程度,在鉴别诊断急性期布鲁菌病和慢性期布鲁菌病中具有临床参考价值,对布鲁菌病的早期诊断和治疗效果监测起到重要的作用。

初诊Ⅳ期肺癌患者中性粒细胞/淋巴细胞比值与营养不良风险的相关性分析

背景与目的 恶性肿瘤患者往往伴随营养不良,与预后密切相关。中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)作为体内炎症的指标,能够预测多种疾病的营养不良风险,然而其与肺癌患者营养不良的关系尚不明确。本研究旨在分析NLR与初诊Ⅳ期肺癌患者营养不良风险的关系,并进一步确定NLR的截断值以更好地预测患者营养不良的风险。方法 回顾性分析2019年5月至2021年2月天津医科大学总医院肿瘤内科收治的209例初诊Ⅳ期肺癌患者,应用营养风险筛查2002 (nutritional risk screening 2002,NRS 2002)量表对其营养状况进行评估,同时收录患者人口学信息、病理、卡氏体能状态(Karnofsky performance status,KPS)评分、体重指数、合并疾病及临床生化指标的资料。分析NLR与营养不良风险的关系,并采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线来确定预测营养不良风险的最佳NLR临界值。应用多因素Logistic回归进一步评估NLR与营养不良风险之间的关系。结果 初诊Ⅳ期肺癌患者存在营养不良风险的比率为36.36%(76/209)。对NLR与NRS 2002营养不良风险评分进行分析发现,NLR与营养不良风险评分呈正相关(r=0.765,P<0.001)。通过ROC曲线分析,确定初诊Ⅳ期肺癌患者营养不良风险的最佳截断值NLR为3.94 [曲线下面积(area under the curve,AUC)=0.747,95%CI:0.678-0.815,P<0.001],敏感性为55%,特异性为86%,阳性预测值为68%,阴性预测值为77%。相比于NLR≤3.94组的患者,NLR>3.94组的患者更容易发生营养不良(69.49%vs 23.33%,P<0.001),并且NLR为初诊Ⅳ期肺癌患者营养不良风险的独立危险因素。结论 NLR在初诊Ⅳ期肺癌患者中与营养不良风险有关,NLR可作为Ⅳ期肺癌患者营养风险筛查的指标之一。

以外周血中性粒细胞、氧化应激分子为主构建预测重度哮喘的临床模型研究

目的比较重度哮喘与非重度哮喘患者的临床特征、外周血炎症细胞和氧化应激指标水平的差异,分析中性粒细胞及氧化应激分子对哮喘严重程度的影响,构建早期预测重度哮喘的生物模型。方法纳入2018年8月至2019年7月于复旦大学附属中山医院就诊的成人稳定期哮喘患者67例,分为重度哮喘组与非重度哮喘组。对两组的临床特征、外周血炎症细胞和氧化应激指标水平进行组间比较,并对重度哮喘进行单因素Logistic回归分析,筛选出最重要的5个变量,进一步行多因素Logistic回归分析,建立重度哮喘预测模型。结果重度哮喘25例,较非重度哮喘患者病程长、急性发作频繁、哮喘控制差、外周血中性粒细胞高、阻塞性通气功能障碍更严重、髓过氧化酶(myeloperoxidase,MPO)水平降低而超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)升高。外周血中性粒细胞计数或比例越高的哮喘患者易表现为重度哮喘,急性发作更频繁,肺通气功能降低更明显。以外周血中性粒细胞计数与氧化应激指标SOD、8-异前列腺素F2α(human 8-epi-prostaglandin F2α,8-iso-PGF2α)等为中心的一组生物标志可构建模型预测重度哮喘。结论重度哮喘较非重度哮喘患者的临床特征、外周血炎症细胞和氧化应激指标水平存在显著差异,稳定期哮喘患者中性粒细胞和SOD等氧化应激指标水平对哮喘严重程度具有影响,以此为基础建立的重度哮喘预测模型可为重度哮喘的早期识别提供新的思路。

基于网络药理学及体内实验探讨射麻止喘液治疗中性粒细胞型哮喘的分子机制

目的基于网络药理学及体内实验探讨射麻止喘液治疗中性粒细胞型哮喘(NA)的分子机制。方法(1)利用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)、文献检索及Swiss ADME、Swiss Target Prediction数据库检索、筛选射麻止喘液的活性成分及其作用靶点。利用OMIM、Gene Cards、Dis Ge NET及Drug Bank数据库检索、筛选NA疾病相关靶点。通过微生信平台对射麻止喘液活性成分作用靶点与NA疾病相关靶点取交集,得到射麻止喘液治疗NA的潜在作用靶点(共有靶点)。采用Cytoscape 3.8软件构建“中药-活性成分-潜在作用靶点”网络。通过STRING数据库建立潜在作用靶点蛋白互作(PPI)网络,使用内置Mcode插件分析获得核心靶点。使用Metascape平台对潜在作用靶点进行基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。(2)将BALB/C小鼠适应性喂养1周后,随机分为空白组、NA模型组、射麻止喘液低剂量组(2.5 g·kg^(-1))、射麻止喘液高剂量组(10 g·kg^(-1))、地塞米松对照组(1 mg·kg^(-1));通过腹腔注射致敏剂[鸡卵清白蛋白(OVA)+弗氏完全佐剂(CFA)]并通过雾化吸入激发的方法复制NA小鼠模型,第0、7、14天分别腹腔注射OVA+CFA(20μg OVA+75μg CFA,0.3 m L)致敏,第21~30天采用5%OVA混悬液雾化激发(每次8 m L,每次雾化时间40 min,每天1次);雾化激发前1 h各组灌胃给药,地塞米松对照组腹腔注射给药,每天1次。采用HE染色法观察小鼠肺组织病理变化;ELISA法检测肺泡灌洗液中IL-8含量;RT-q PCR法检测肺组织中NLRP3、CXCR2 m RNA表达水平;免疫组化法检测肺组织中p-m TOR蛋白表达水平。结果(1)共筛选得到射麻止喘液活性成分作用靶点826个,NA疾病相关靶点154个,取交集后得到射麻止喘液治疗NA的51个潜在作用靶点(共有靶点)。通过“中药-活性成分-潜在作用靶点”网络分析得到槲皮素、木犀草素、山柰酚、豆甾醇、柚皮素等关键活性成分。通过对潜在作用靶点的PPI网络分析得到29个核心靶点,包括AKT1、IL6、TNF、EGFR、NLRP3、RELA、MIF、CXCR2、VEGFA等。GO功能富集分析得到882个生物学过程条目、33个细胞组分条目、61个分子功能条目;KEGG通路富集分析得到142条信号通路,主要涉及TNF信号通路、甲型流感信号通路、Toll样受体通路、MAPK信号通路、m TOR信号通路等。(2)动物实验结果:与空白组比较,NA模型组小鼠的气道黏膜损伤明显,结构紊乱,有大量炎性细胞浸润,黏膜充血、水肿,肺泡壁明显增厚,肺泡腔缩小;肺泡灌洗液中的炎症因子IL-8水平明显升高(P<0.05);小鼠肺组织NLRP3、CXCR2 m RNA表达显著上调(P<0.01),p-m TOR蛋白表达水平明显升高。与NA模型组比较,射麻止喘液低、高剂量组小鼠肺组织支气管上皮细胞结构排列可见少许紊乱,气管及血管周围有少量的炎性细胞浸润,支气管黏膜充血水肿明显减轻;小鼠肺组织CXCR2 m RNA表达显著下调(P<0.01),p-m TOR蛋白表达水平明显降低。射麻止喘液高剂量组小鼠肺泡灌洗液中的IL-8水平明显降低(P<0.05);射麻止喘液低剂量组小鼠肺组织NLRP3m RNA表达明显下调(P<0.05)。结论射麻止喘液对NA的治疗作用可能是通过槲皮素、木犀草素、山柰酚等关键活性成分,作用于NLRP3、CXCR2等核心靶点,调控TNF信号通路、MAPK信号通路、Toll样信号通路、m TOR等关键信号通路来实现的。

蝮蛇咬伤对中性粒细胞NETs和炎症损伤影响的临床研究

目的探讨蝮蛇咬伤后中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)标志物嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)以及细胞游离DNA(cell free DNA,cf-DNA)变化和与炎症标志物及组织损伤标志物的相关性。方法选取2021年9月—2022年12月杭州市中医院皮肤科收治的蝮蛇咬伤患者作为研究对象,研究包括36例蝮蛇咬伤患者,20例健康体检者;比较两组中性粒细胞、淋巴细胞计数、嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)、细胞游离DNA(cell free DNA,cf-DNA)、血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、中性粒细胞淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸肌酶同工酶(creatine kinase-MB,CKMB)、天门冬氨酸转氨酶(aspartic transaminase,AST)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平,计算Pearson相关系数并利用Python软件编写代码绘制热力图、箱线图,分析中性粒细胞计数与NETs标志物、炎症标志物和组织损伤标志物之间的相关性。结果蝮蛇咬伤后中性粒细胞计数升高,NETs标志物NE、cf-DNA升高,CRP、SAA、NLR、AST升高,淋巴细胞计数降低。蝮蛇咬伤后中性粒细胞数值与NE酶、cf-DNA血清含量呈正相关,而与炎标志物CRP和SAA之间没有明显相关性;而CRP与SAA、CKMB与LDH强正相关,CK与NE、SAA与NE之间呈正相关,淋巴细胞数与NLR呈负相关。结论蝮蛇咬伤可能引起NETs水平上升,促进炎症加重和组织损伤。

抗中性粒细胞胞质抗体相关性肥厚性硬脑膜炎患者临床特点及影像学分析

目的分析抗中性粒细胞胞质抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)相关性肥厚性硬脑膜炎(hypertrophic pachymeningitis,HP)患者的临床特点。方法回顾性收集2015年8月至2022年6月作者单位收治的10例ANCA相关性HP患者,其中来自中南大学湘雅医院9例,陕西省人民医院1例,男、女各5例,发病年龄43~80岁。分析患者的临床特征、影像学特点、诊治方法及疗效。结果10例患者表现为不同程度的慢性头痛或脑神经受累症状,病程1~84个月。5例患者血清髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)和核周型ANCA(perinuclear ANCA,p-ANCA)同时阳性,2例患者仅血清MPO阳性,p-ANCA和细胞质型ANCA(cytoplasmic ANCA,c-ANCA)阳性各1例,p-ANCA和c-ANCA同时阳性1例。6例视力受累,2例听力受累。增强MRI显示患者不同程度的硬脑膜增厚并强化,其中弥漫性增厚4例,局灶性增厚6例,均未累及脑实质。1例患者单用糖皮质激素治疗,1例患者行糖皮质激素联合丙球治疗,8例患者糖皮质激素联合免疫抑制剂治疗,其中1例同时使用利妥昔单抗,经治疗后患者症状均明显缓解。2例在激素和免疫抑制剂减量过程出现头痛加重,再次治疗后症状缓解。结论ANCA相关性HP病程长短不一,临床表现不典型,增强MRI显示的硬脑膜增厚部位在不同ANCA抗体阳性患者间有重叠;糖皮质激素和免疫抑制剂治疗ANCA相关性HP有效。

仙方活命饮治疗囊性中性粒细胞性肉芽肿性乳腺炎热毒证的临床疗效及机制探讨

目的观察仙方活命饮对囊性中性粒细胞性肉芽肿性乳腺炎(CNGM)热毒证患者的临床疗效及潜在作用机制。方法将72例CNGM热毒证患者随机分为对照组与试验组,每组各36例;试验组予仙方活命饮口服治疗,对照组予左氧氟沙星口服治疗,两组疗程均为14 d。观察比较疾病活动指数、疾病活动度、肿块大小、疼痛数字分级评分法(NRS)评分、炎症指标的变化。免疫荧光法检测乳腺组织内中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)标志物瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)、髄过氧化物酶(MPO)含量的变化。结果①试验过程中,对照组脱落2例,试验组剔除1例、脱落2例,最终完成试验者67例,其中对照组34例、试验组33例。完成14d药物治疗后进一步接受手术治疗者共40例,其中对照组22例、试验组18例,每组随机选取5例纳入NETs形成相关指标机制分析。②局部症状活动指数,治疗前后组内比较,对照组疼痛活动指数降低(P<0.05),脓肿活动指数升高(P<0.05);试验组肿块、疼痛、红热活动指数均降低(P<0.05)。组间治疗后比较,试验组肿块、疼痛、红热活动指数低于对照组(P<0.05)。③全身症状活动指数,治疗前后组内比较,对照组发热活动指数降低(P<0.05),试验组发热、其他相关炎症症状活动指数降低(P<0.05)。组间治疗后比较,两组各项全身症状活动指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。④疾病活动指数,治疗前后组内比较,对照组全身症状活动指数、疾病活动指数下降(P<0.05),试验组局部、全身症状活动指数及疾病活动指数均下降(P<0.05)。组间治疗后比较,试验组局部症状活动指数、疾病活动指数低于对照组(P<0.05)。⑤治疗后,两组高活动度例数减少、低活动度及中活动度例数增多,其中试验组高活动度比例从78.8%下降到36.4%;两组疾病活动度分布情况比较,试验组优于对照组(P<0.05)。⑥治疗后,试验组肿块变小(P<0.05),对照组肿块大小无明显变化(P>0.05);两组疼痛NRS评分均降低(P<0.05),且试验组低于对照组(P<0.05)。⑦治疗前后组内比较,试验组红细胞沉降率水平降低(P<0.05),对照组白细胞、中性粒细胞水平降低(P<0.05);组间治疗后比较,两组各项炎症指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。⑧治疗后,两组CitH3的光密度(IOD)、面密度(AD)值均下降(P<0.05),且试验组低于对照组(P<0.05);试验组MPO的IOD、AD值下降(P<0.05),且试验组低于对照组(P<0.05)。结论仙方活命饮能改善CNGM热毒证患者乳房局部炎症症状,降低疾病活动度,在局部症状改善方面疗效优于左氧氟沙星,在全身症状改善方面疗效与左氧氟沙星相当;其可能通过清除乳腺炎症组织中过量产生的NETs发挥疗效。

外周血降钙素原和中性粒细胞淋巴细胞比值水平对老年绞窄性腹股沟疝的临床诊断价值

目的 探讨外周血降钙素原(PCT)和中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)水平对老年绞窄性腹股沟疝的临床诊断价值。方法 2019年1月~2022年12月收治的老年急性嵌顿性腹股沟疝病人112例,根据术中探查情况分为绞窄组和非绞窄组。多因素Logistic回归分析老年绞窄性腹股沟疝的危险因素。ROC曲线评估外周血PCT和NLR水平对老年绞窄性腹股沟疝的临床诊断价值。结果 绞窄组和非绞窄组病人NLR分别为4.54±1.67和3.78±1.48,PCT分别为(6.74±2.42)ng/ml和(4.97±2.53)ng/ml,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析表明,术前NLR、PCT水平升高是老年绞窄性腹股沟疝发生的危险因素(P<0.05)。NLR和PCT对老年绞窄性腹股沟疝均有较高的临床诊断价值(AUC>0.7),联合检测NLR和PCT能够提高诊断效能(AUC=0.792)。结论 外周血PCT和NLR水平对老年绞窄性腹股沟疝均具有较高的临床诊断价值,联合检测NLR和PCT能够提高诊断效能。

舌鳞癌组织中性粒细胞对血管生成的作用及其意义

目的探讨口腔舌鳞癌(OSCC)组织内微血管密度(MVD)与中性粒细胞浸润的相关性,及其与临床病理参数及病人术后生存的关系。方法采用免疫组织双染方法检测OSCC组织中肿瘤MVD及中性粒细胞浸润的情况,分析MVD与病人临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析OSCC组织MVD高低对病人生存预后的影响;Cox回归模型分析影响OSCC病人生存的独立危险因素;成管实验观察中性粒细胞对血管生成的影响。结果OSCC组织内高MVD与较高TNM分期、淋巴结转移、较大肿瘤和肿瘤复发有关(χ^(2)=8.161~26.312,P<0.001)。生存分析显示,OSCC组织高MVD组的总体生存时间及无病生存时间均短于低MVD组(χ^(2)=7.860、15.270,P<0.05);Cox回归分析显示,肿瘤MVD、肿瘤大小和肿瘤复发是影响OSCC病人术后生存的独立预后因素(β=-1.426~1.468,P<0.05)。Spearman相关分析显示,OSCC组织中肿瘤MVD与中性粒细胞密度呈正相关(r=0.352,P<0.05)。成管实验结果显示,与中性粒细胞共培养后,内皮细胞的血管生成作用增强(t=2.744~4.372,P<0.05)。结论OSCC组织内高MVD提示病人预后不良,可能作为判断OSCC病人预后的潜在指标。OSCC组织内MVD与中性粒细胞浸润有关,中性粒细胞的丰富浸润可促进肿瘤血管生成。

缺氧诱导的胃癌细胞外泌体通过促进中性粒细胞胞外诱捕网的形成对胃癌细胞增殖能力的影响

目的探究缺氧条件下胃癌细胞外泌体(exosome,exo)诱导的中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)对胃癌细胞生长的影响。方法提取正常和缺氧培养条件下SGC-7901和HGC细胞分泌的外泌体(记为N-SGC-7901 exo、N-HGC exo、H-SGC-7901 exo和H-HGC exo),中性粒细胞分为磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution,PBS)组、N-SGC-7901组、N-HGC组、H-SGC-7901组、H-HGC组、N-SGC-7901 exo组、N-HGC exo组、H-SGC-7901 exo组、H-HGC exo组,Sytox Green染色检测各组细胞NETs的形成。SGC-7901细胞分为PBS/培养液(culture medium,CM)组、N-SGC-7901 exo/CM组、H-SGC-7901 exo/CM组、H-SGC-7901 exo/CM+DNAse组,HGC细胞分为PBS/CM组、N-HGC exo/CM组、H-HGC exo/CM组和H-HGC exo+DNAse/CM组。CCK8检测SGC-7901和HGC细胞增殖能力,克隆形成实验检测各组细胞克隆形成能力。结果相比于PBS组,N-SGC-7901组、H-SGC-7901组、N-HGC组、H-SGC组中性粒细胞NETs增加,且H-SGC-7901组高于N-SGC-7901组,H-SGC组高于N-HGC组。相比于PBS组,N-SGC-7901 exo组、H-SGC-7901 exo组、N-HGC exo组、H-SGC exo组中性粒细胞NETs增加,且H-SGC-7901 exo组高于N-SGC-7901 exo组,H-SGC exo组高于N-HGC exo组。相比于PBS/CM组,N-SGC-7901 exo/CM组和H-SGC-7901 exo/CM组SGC-7901细胞增殖和克隆形成能力显著增加(P<0.01),并且H-SGC-7901 exo/CM组高于N-SGC-7901 exo/CM组(P<0.001),而H-SGC-7901 exo/CM+DNase组增殖和克隆形成能力显著低于H-SGC-7901 exo/CM组。相比于PBS/CM组,N-HGC exo/CM组和H-HGC exo/CM组HGC细胞增殖和克隆形成能力显著增加(P<0.01),并且H-HGC exo/CM组高于N-HGC exo/CM组(P<0.001),H-HGC exo/CM+DNase组增殖和克隆形成能力显著低于H-HGC exo/CM组。结论缺氧条件下胃癌细胞外泌体通过促进NETs形成而促进胃癌细胞的生长。

中性粒细胞计数和中性粒细胞与淋巴细胞比值对糖尿病患者冠状动脉病变程度的预测价值

目的:分析中性粒细胞计数和中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)对糖尿病患者冠状动脉病变程度的预测价值。方法:回顾性分析2021年9月至2022年4月于本院心内科住院行冠脉造影的糖尿病患者287例的临床资料。根据冠脉造影结果分为冠脉正常组94例,轻中度病变组(0<Gensini积分≤40分)102例、重度病变组(Gensini积分>40分)91例。比较三组患者的中性粒细胞计数和NLR。采用ROC曲线分析中性粒细胞计数和NLR对糖尿病患者冠状动脉病变程度的预测价值。结果:与冠脉正常组相比,轻中度病变和重度病变组的中性粒细胞计数[4.17(3.31,4.88)×10^(9)/L比4.96(4.28,6.07)×10^(9)/L比5.57(4.62,7.03)×10^(9)/L]、NLR[2.25(1.74,2.72)比3.18(2.48,3.66)比3.49(3.03,4.32)]均显著增加(P均<0.001)。二元Logistic回归分析显示,中性粒细胞计数(OR=1.566,P<0.001)、NLR(OR=2.152,P<0.001)是糖尿病患者冠脉病变的独立危险因素。ROC结果提示,中性粒细胞计数[曲线下面积(AUC)=0.750]、NLR(AUC=0.775)对糖尿病患者冠状动脉病变程度具有较好的预测价值。结论:糖尿病患者中性粒细胞计数、NLR与冠脉狭窄程度有着密切联系,均有较好的预测价值。

中性粒细胞源性外泌体促进肺腺癌细胞的迁移和侵袭

目的研究中性粒细胞源性外泌体对肺腺癌细胞迁移和侵袭的影响。方法采用1μmol/L全反式维甲酸(ATRA)诱导人早幼粒细胞白血病NB4细胞分化成中性粒细胞,MGG染色分析其形态学的改变,流式细胞技术检测其表面标志物CD11b及CD18的表达。采用总外泌体试剂盒分离提取NB4细胞和中性粒细胞来源的外泌体,利用透射电镜技术鉴定外泌体的形态与大小。通过细胞划痕和Transwell迁移实验分析NB4细胞和中性粒细胞来源的外泌体对A549细胞迁移能力的影响。采用Transwell侵袭实验研究NB4细胞和中性粒细胞来源的外泌体对A549细胞侵袭能力的影响。结果MGG染色结果显示NB4细胞经ATRA诱导后分化成中性粒细胞,且流式细胞检测结果表明中性粒细胞表面标志物CD11b及CD18表达明显升高。电镜下观察到NB4细胞和中性粒细胞来源的外泌体大小为40~100 nm,形态呈双层膜,中空,圆形或椭圆形。细胞划痕和Transwell实验证实,中性粒细胞源性外泌体比NB4细胞源性外泌体能更明显地增强肺腺癌细胞的迁移和侵袭能力。结论中性粒细胞源性外泌体能明显促进肺腺癌细胞的迁移和侵袭,参与肺腺癌的发生发展。

他克莫司、吗替麦考酚酯联合糖皮质激素治疗抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎肾损害的效果

目的比较他克莫司(tacrolimus,TAC)、吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil,MMF)联合糖皮质激素治疗抗中性粒细胞胞质抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)相关性血管炎(ANCA-associated vasculitis,AAV)肾损害的效果。方法选取医院收治的AAV患者80例,用随机数字表法分为A组(n=41,予以TAC联合糖皮质激素治疗)和B组(n=39,予以MMF联合糖皮质激素治疗)。比较2组患者ANCA、伯明翰血管炎活动性评分(Birmingham vasculitis activity score,BVAS)、肾功能及血管内皮功能相关指标、细胞免疫指标、不良反应。结果治疗后,2组的ANCA、BVAS、24 h尿蛋白定量(24-hour urinary pro⁃tein quantification,24 h UPQ)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、胱抑素C(cystatin C,CysC)、可溶性血管内皮细胞生长因子受体1(soluble fms-like tyrosine kinase-1,SFlt-1)、溶酶体相关膜蛋白2(recombinant lysosomal associated membrane protein 2,LAMP-2)抗体、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)均降低(P<0.05),且A组较B组低(P<0.05);2组的CD4+均升高,A组较B组更高(P<0.05);2组的CD8+、CD19+均降低,A组较B组更低(P<0.05)。A组的不良反应总发生率(9.76%)较B组(28.21%)低(P<0.05)。结论与MMF联合糖皮质激素治疗方案比较,TAC联合糖皮质激素治疗AAV肾损害在降低血清ANCA值、减小BVAS、改善肾功能、保护血管内皮功能、调节细胞免疫等方面的效果更加显著,且安全性高。