农杆菌介导SsNHX基因转化中林美荷杨的研究

方法:以中林美荷杨组培苗的茎段为转化受体,利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法将盐地碱蓬(Suaedaheteroptera)的Na+/H+反向运输体基因SsNHX导入中林美荷杨组培苗中,实验过程中对影响遗传转化的一些关键因素进行了筛选研究。结果:最佳浸染条件为茎段外植体预培养1d,菌液浓度OD6000.3,浸染时间15-30min,共培养时添加AS 200μmol/L。经过抗性植株的PCR检测证明外源基因SsNHX已整合到中林美荷杨基因组中,获得了抗卡那霉素的再生植株及PCR阳性植株。结论:初步建立了中林美荷杨的遗传转化体系,为其遗传转化培育出抗盐碱的转基因植株奠定了理论基础。

转人工改造的Bt Cry1Ac基因中林美荷杨的获得及其抗虫性分析

中林美荷杨具有适应性强、雄性不飞絮、速生丰产和耐瘠薄等优良性状,然而受到一些害虫的危害,造成树苗生长不良,严重影响苗木的产量和质量。采用中林美荷杨的叶片和节间组织作为外植体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法将人工改造后的抗虫基因Bt Cry1Ac导入杨树基因组中。对所获得的中林美荷杨转基因植株进行PCR、Southern blotting和Real-time PCR等分子生物学检测,结果表明Bt Cry1Ac基因多以单拷贝整合到受体植物基因组中,其中7个转基因株系显示外源基因有较高的转录表达。经过实验室喂虫鉴定,筛选出2个抗性效果好的株系。中林美荷杨转抗虫基因株系的获得为该品种绿化造林和推广提供了条件。

导入TaNHX2基因提高中林美荷杨耐盐性的研究

中林美荷杨具有生长速度快、扦插成活率高及木材材质好等优点,因而倍受欢迎,是西部大开发重点推广的绿化造林树种。为提高该树种的耐盐性,充分适应西北广大地区干旱盐碱地,将小麦耐盐基因Ta NHX2导入中林美荷杨基因组中,以提高其的耐盐性。采用叶片和叶柄作为外植体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法,将Ta NHX2导入中林美荷杨基因组中,对所获得的杨树转基因植株进行PCR和Southern blotting分析,结果表明Ta NHX2基因多以单拷贝整合到受体基因组中。转基因幼苗经过不同浓度的Na Cl胁迫处理,表现出一定的耐盐性。中林美荷杨耐盐株系的获得为该树种绿化造林的推广和丰产提供了保障。

中林美荷杨发展前景广阔

２０００年５月，红河州有关方面从新疆天演集团引进中林美荷杨７２万株在弥勒县朋曾镇培育，现已建成１００亩的种苗墓地，每年可向社会提供１０００万株以上的优良种苗。中林美荷杨系落叶乔木，树高可达３０米、它具有生长快，单位材积量大等特点，３年生胸径可达１８厘米，５年生胸径达３０厘米，有效高度２０米左右，是超短期轮伐的理想人工经济林种。中林美荷杨栽培范围广，适应性强。是荒山、荒地、沟埂、河堤、路旁、房前屋后植树造林的优造树种。中林美荷杨用途广泛，经济效益显著。其叶片硕大如盘，干物质含粗蛋白量达２３％，是青饲料或饲料加工业的好原料。每定植一亩中林美荷杨，每年可产树叶０．７吨，５年单株木材蓄积量可达１．

过量表达GhAPX基因提高中林美荷杨耐盐性

中林美荷杨扦插易成活、木材材质好、生长周期短,是中国重点推广的绿化造林树种。为提高该树种的耐盐性,本研究将GhAPX基因导入中林美荷杨基因组中,以期获得耐盐性提高的株系。我们采用叶盘法将GhAPX基因导入中林美荷杨基因组中,对所获得的再生植株进行PCR和Southern blotting检测,将检测后的转基因植株进行0.5%的氯化钠盐胁迫处理,其表现出较强的耐盐性。中林美荷杨耐盐株系的获得为该树种在盐碱地区的推广提供了新的种质。

中林美荷超级杨引种试验初报

引种的中林美荷超级杨是一个速生丰产的树种。通过引种试验 ,这一树种适宜互助县的川水和浅山区栽植生长 ,可以在本区推广。