一株中温厌氧纤维素降解细菌的分离、鉴定及其系统发育分析

以树中心湿木为样品,富集分离获得一株具有较强纤维素分解能力的中温厌氧纤维素降解细菌CSZM-6。分离菌株革兰氏染色阴性,直杆或稍弯曲杆状,多数单生,少数成对或成串,部分菌体产芽孢。菌体大小为0.5μm×1.7-2.6μm,严格厌氧,最适生长温度40℃,最适pH6.5,以葡萄糖为底物时倍增时间8.0 h。分离菌株在纤维素粉固体培养基中培养3周后,菌落为圆形或不规则形状,产黄色素,直径为0.5-4.0 mm,水解圈直径为2.0-18.0mm。分离菌株不仅能利用纤维素、纤维二糖、葡萄糖等碳水化合物,还能利用未经处理的报纸、水稻秸秆、麦秆。发酵纤维素产乙醇、乙酸、H2、CO2、甲酸、丙酸、乳酸。在菌株CSZM-6的纤维素酶系中,只存在外切-β-1,4-葡聚糖酶（C1酶）和内切-β-1,4-葡聚糖酶（CX酶）两种组分,最适温度分别为40℃和45℃。通过16S rDNA序列分析表明,菌株CSZM-6为梭菌属Clostridium,与C.papyrosolvens具有99.6%的相似性。

嗜热厌氧纤维素降解细菌的分离、鉴定及其系统发育分析

利用纤维素降解细菌和纤维素粘附的方法分别从新鲜牛粪、高温堆肥和本实验室保存的纤维素降解富集物中分离得到 4株嗜热厌氧纤维素降解细菌。分离菌株为革兰氏染色阴性 ,直的或稍弯曲杆菌 ,菌体大小为 0 4μm～ 0 6 μm× 3 μm～ 1 5 μm ,严格厌氧 ,不还原硫酸盐 ,形成芽孢。多数芽孢着生于菌体顶端。分离菌株能利用纤维素滤纸、纤维素粉WhatmanCFII、微晶纤维素、纤维素粉MN3 0 0和未经处理的玉米秆芯、甘蔗渣、水稻秸杆。分离菌株在pH6 2～ 8 9、温度 45℃～ 6 5℃范围内利用纤维素 ,最适pH为 7 0～ 7 5 ,最适温度为 5 5℃～6 0℃ ,发酵纤维素产生乙醇、乙酸、H2 和CO2 。分离菌株还可利用纤维二糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖、山梨醇作为碳源。部分长度的 1 6SrDNA序列分析表明 ,分离菌株EVAI与Clostridiumthermocellum具有 99

一种嗜热厌氧纤维素降解细菌的分离纯化方法

根据纤维素降解细菌对不溶性纤维素底物的粘附作用，利用Hungate厌氧操作技术直接以不溶性纤维素粉为基质进行滚管，分离和纯化获得嗜热厌氧纤维素降解细菌。

纤维素分解复合菌系WSC-9中厌氧细菌的分离

复合菌系WSC-9是一组具高效稳定分解纤维素能力的细菌复合群体。为了研究其微生物组成,以纤维素分解情况为依据,分离复合菌系中具有纤维素分解能力的厌氧纯培养菌株,通过16S rDNA基因序列初步分析确定系统发育地位。从WSC-9中获得1株可有效降解纤维素的严格厌氧细菌WSC-9-7,50℃培养10 d,稻秆的总干重减少了47%。WSC-9-7为杆菌,产孢,能够利用纤维二糖、纤维素、滤纸、稻秆等。经数据库比对,与菌株HAW-RM37-2-B-1600d-W(FN563295)的相似性达到99%,与Clostridium islandicumAK1(EF088328)的相似性为98%。其中,Clostridium islandicumAK1厌氧且可以分解多糖类物质,获于冰岛的热泉;HAW-RM37-2-B-1600d-W在堆肥样品的克隆结果中获得,未获得纯培养。菌株WSC-9-7与这两株细菌均为嗜高温的严格厌氧细菌。初步判断菌株WSC-9-7可能是Clostridium属中的一个成员。

厌氧纤维素降解菌从人参总皂苷中发酵转化Compound K的研究

选用1组兼性厌氧纤维素降解复合菌系PSW和从该复合菌系分离的1株严格厌氧嗜热纤维素分解细菌HCp,对人参总皂苷进行生物转化。通过TLC和LC-MS检测,发现并证实这2株厌氧菌可以转化产生人参皂苷CompoundK。该试验为稀有人参皂苷的生物转化提供新的思路。

嗜热厌氧纤维素降解菌对纤维素的粘附及其酶活性研究

本项研究表明 ,嗜热厌氧纤维素降解细菌 Clostridium sp.EVA1在降解纤维素的过程中 ,菌体对不溶性纤维素底物具有强烈的粘附作用 .在透明圈中参与纤维素降解的菌体周围具有波纹状突起结构 ,并且菌体与纤维素的粘附位点是一个电子致密区域 .该菌株产生的纤维素酶是与细胞相连的胞外酶 ,培养液中无纤维素酶活性 .以脱脂棉花为碳源培养产生的纤维素酶活性最大 .该菌株纤维素酶在

嗜热厌氧纤维素降解产乙醇细菌的选育及发酵因子研究

从贡嘎山热温泉及土壤堆肥中分离到四株嗜热厌氧纤维素分解细菌，能直接转化纤维素生产酒精。其中一株经鉴定为热纤梭菌。对该菌发酵条件进行了研究，最适生产温度为５５－５８℃，最适起始ＰＨ值７．０．在实验室发酵最佳条件下，纤维素降解率最高可达８１％，乙醇产量最高为９７２ｍｇ／Ｌ（培养基纤维素含量为５ｇ／Ｌ．经紫外诱变选育到突变株，乙醇产量达２７４４ｍｇ／Ｌ，具有较好的乙醇耐受力。

碱度类型及浓度对剩余污泥中温厌氧消化的影响

为了探究不同碱度物质(Na_2CO_3、KHCO_3、NaHCO_3)和浓度范围(2000,3000,4000mg/L)(以CaCO_3计)对中温厌氧消化系统的影响,采用了密封的半连续搅拌反应器进行批次试验.综合反应器运行与微生物高通量测序分析,结果表明在3种不同碱度类型中Na_2CO_3能推进水解酸化过程,而在产气减量方面Na HCO_3表现更为突出,说明在调节系统碱度时,Na_2CO_3更易促进水解酸化这一限速阶段,而Na HCO_3能使水解酸化细菌与产甲烷菌之间保持平衡,保证甲烷产量;在不同Na HCO_3浓度情况下,增加投加碱度的浓度使水解能力增强,相应会导致脱水性能恶化,而系统中挥发性脂肪酸含量变化不大,过量碱度将使得系统产气和减量能力下降.

餐厨垃圾与秸秆混合中温和高温厌氧消化对比

餐厨垃圾与秸秆混合厌氧消化可有效改善两者单独厌氧消化易出现的挥发性脂肪酸积累和木质纤维素难以降解等问题,并回收生物质能.在中温(35℃)和高温(55℃)条件下,对餐厨垃圾与秸秆混合厌氧消化进行了序批式试验研究.结果表明,进料的挥发性固体(VS)浓度为3 kg·m^(-3),中温条件下,物料进料比(VS/VS)为9∶1时,单位有机负荷累积甲烷产量达到最高,为272.0 mL·g^(-1);高温条件下,进料比为5∶5时,单位有机负荷累积甲烷产量达到最高,为402.3 mL·g^(-1),分别显著高于两温度条件下餐厨垃圾单独厌氧消化的结果(中温218.6 mL·g^(-1),高温322.0 mL·g^(-1)).高温条件下物料中的碳流向甲烷的比例高于中温,且两物料混合消化促进碳流向甲烷.高温下木质纤维素总降解率为34.7%~45.8%,高于中温的12.6%~42.2%.利用高通量测序技术检测细菌与古菌的16S rRNA基因序列信息和真菌的内转录间隔(ITS)序列信息,结果表明,高温下木质纤维素降解细菌和放线菌数量明显高于中温条件,可解释高温下木质纤维素总降解率更高的原因.

嗜热厌氧纤维素分解菌的分离、鉴定及其酶学特性

【目的】分离高效降解纤维素的嗜热厌氧菌,通过与嗜热产乙醇菌株联合培养的方式,为生产纤维素乙醇提供微生物资源。【方法】利用厌氧分离技术从降解纤维素的马粪富集物中分离到一株嗜热厌氧细菌HCp。采用形态学观察、生理生化鉴定、结合16S rDNA序列的系统发育学分析确定该菌株的分类地位,利用DNS酶活分析方法测定此分离菌株的酶学性质。【结果】分离菌株HCp革兰氏染色阴性,直杆,细胞单个或成对出现,菌体大小为(0.35-0.50)μm×(2.42-6.40)μm,严格厌氧,形成芽胞,能运动,对新霉素有一定的抗性。此菌能利用滤纸纤维素、纤维素粉、微晶纤维素、脱脂棉和水稻秸秆、明胶等,还可以利用葡萄糖、纤维二糖、木糖、木聚糖、果糖、蔗糖、核糖、半乳糖、麦芽糖、山梨糖、海藻糖、蜜二糖、甘露糖等。该菌株在pH6.5-8.5、温度35-70℃、盐浓度0%-1.0%范围内利用纤维素生长,最适pH为6.85,最适温度为60℃,最适NaCl浓度为0.2%,最佳生长条件下,在10 d内滤纸纤维素降解率可达90.40%。在HCp的纤维小体中,滤纸酶、羧甲基纤维素酶、β-葡萄糖苷酶、木聚糖酶的最适作用温度分别为70℃、70℃、70℃、60℃,并且羧甲基纤维素酶具有较高的热稳定性。部分长度的16S rDNA序列分析表明,分离菌株HCp与Acetivibrio cellulolyticus、A.cellulosolvens相似性为97.5%。【结论】分离菌株HCp是从马粪富集物中分离到的一株嗜热厌氧细菌,该菌具有较强的降解纤维素能力,生长温度范围广,酶的热稳定性好,纤维素底物利用广泛等特性,为纤维素降解产乙醇提供了良好的材料。

新发现一种固氮细菌

麻萨诸赛大学的微生物学家证明,生活在普通池泥和森林土壤中的厌氧细菌能进行固氮和纤维素降解这两种复杂的生理功能。纤维素形成植物细胞壁的坚硬结构,是一种丰富的植物成分。全球植物每年产生的纤维素几乎达1011吨。这种细菌能以纤维素为生存能源,而从空气中固定氮的发现表明细菌在全球氮循环中起着巨大的作用;

环境保护及农业废物利用

933182影响酶法水解油籽粕粉、木质纤维素副产品的参数[英]/Duesterhoeft,E.M.…//Bioresource Technol.-1993,44(1).-39～46[译自 DBA,1993,12(6)。

秋冬季沼气池管理要点

温度是沼气发酵的重要外因条件,温度适宜则细菌繁殖旺盛,活力强,厌氧分解和生成甲烷的速度就快,产气就多,所以说,温度是产气好坏的关键。秋、冬季温度低,不利于沼气发酵产气,因此更需要加强户用沼气池的秋、冬季技术管理。沼气发酵温度可划分为3个范围：46~60℃称为高温发酵,28~38℃称为中温发酵,10~26℃称为常温发酵。