中甸牦牛乳酪蛋白源生物活性肽的鉴定及抗氧化活性

以中甸牦牛乳酪蛋白为研究对象,将其进行酶解超滤后,分别对分子质量>3 kDa和<3 kDa酶解组分的促细胞增殖活性和抗氧化活性进行测定,并采用液相色谱-串联质谱、生物信息学及分子对接分析中甸牦牛乳酪蛋白源的生物活性肽。结果表明:酪蛋白酶解超滤后,分子质量>3 kDa和<3 kDa酶解组分均能保证RAW264.7细胞的增殖率在80%以上,2种酶解液均具有1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和2,2′-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基清除能力,分子质量<3 kDa酶解组分的促细胞增殖、DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除能力优于>3 kDa酶解组分;基于液相色谱-串联质谱技术从中甸牦牛酪蛋白分子质量<3 kDa的酶解组分中共鉴定到895条肽段,其中96条肽段为已知活性的肽段,主要为抗氧化肽(39.6%)、血管紧张素转化酶抑制肽(30.2%)等,说明中甸牦牛乳酪蛋白是生物活性肽的重要来源;基于肽段的活性和疏水性从预测的20条潜在抗氧化肽中筛选到抗氧化肽GYF、RPW,通过分子对接发现GYF、RPW与ABTS阳离子自由基、DPPH自由基的结合能均为负数,具备结合潜力,且主要通过形成氢键和疏水相互作用发挥抗氧化活性。