转基因741杨对美国白蛾幼虫生长发育及其中肠酶活性的影响

为了研究转基因741杨对美国白蛾抗虫稳定性及其生长发育的影响,选择转基因741杨Pb29、Pb17两个无性系为试验材料,测定各龄幼虫死亡率、各龄虫体重、排粪量。试虫取食转基因741杨2周后,测定其中肠淀粉酶和蛋白酶活性。结果表明,转抗虫基因杨树饲养的美国白蛾幼虫死亡率均高于CK 5.34%,高抗Pb29饲养的幼虫死亡率为93.84%,中抗Pb17的为50.01%;存活幼虫发育不正常,发育历期明显延迟,体重增加速率和排粪量均显著降低,高抗Pb29和中抗Pb17饲养的虫体重增长率分别为CK的3.8%和36%,排粪量分别比CK少0.585 7g和0.310 5g;取食转基因无性系的幼虫中肠蛋白酶及淀粉酶活性显著降低,Pb29对其蛋白酶和淀粉酶的抑制率分别为77.93%和96.38%,Pb17的抑制率分别为36.31%和21.14%。因此,转基因741杨树对美国白蛾幼虫中肠酶的抑制作用与对其生长发育的阻滞有良好的相关性,转基因741杨无性系对美国白蛾幼虫仍具有稳定抗性。

PuGV-Ps对甜菜夜蛾中肠液酶解δ-内毒素的影响

粘虫颗粒体病毒（PuGV-Ps）总蛋白酶活力测定表明,PuGV-Ps在pH7.38～10.38范围内均具有蛋白酶活性,且酶活力随pH的升高而显著提高。4种蛋白酶抑制剂均能抑制PuGV-Ps的蛋白酶活力,以大豆胰蛋白酶抑制剂的抑制作用最强,表明PuGV-Ps的蛋白酶活性是以胰蛋白酶为主要活力的多种蛋白酶的活性特征。PuGV-Ps对甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）中肠酶液离体蛋白酶活力及取食PuGV-Ps后总蛋白酶活力的影响测定表明,在中肠液酶适宜pH（9.38～10.38）范围内,PuGV-Ps在一定程度上抑制了中肠酶液的总蛋白酶活力。SDS-PAGE试验表明,PuGV-Ps影响甜菜夜蛾中肠酶液对苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis）δ-内毒素的降解活化作用,表现在对130ku的δ-内毒素酶解活化成60～87ku的活性多肽影响不大,但对其进一步降解具有抑制作用。不同缓冲液同样影响甜菜夜蛾中肠酶液对δ-内毒素的降解,Na2CO3是影响降解程度的重要因子。

稻纵卷叶螟经Bt水稻低强度处理多代后幼虫生长发育和中肠主要酶活性的变化

为明确稻纵卷叶螟对Bt水稻的适应能力,用转cry2A基因水稻T2A-1低强度（每代饲喂5h）处理稻纵卷叶螟三代,观察其幼虫主要生长发育指标并测定其体内主要中肠酶的活性。与未经Bt水稻处理的稻纵卷叶螟相比,Bt水稻处理的第1代稻纵卷叶螟3~5龄历期显著延长,蛹羽化率显著降低,但随着处理代数的增加,这两个指标均恢复至对照水平;Bt水稻处理第1代的3~5龄幼虫存活率、雌蛹重均低于对照,雄蛹重与对照无显著差异,但这些指标并未随处理代数的增加而恢复至对照水平或维持对照水平,且第3代均低于对照。处理后稻纵卷叶螟中肠总蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶活性较对照有所降低,但随着处理代数的增加其总蛋白酶活性呈上升趋势。处理后的稻纵卷叶螟中肠内强碱性类胰蛋白酶和游离氨肽酶活性较对照有所增加,且随着处理代数的增加其活性继续增强。这些结果表明稻纵卷叶螟对低强度的Cry2A蛋白具有一定的应对能力。

蜜蜂中肠酪素酶与孢子虫病的关系

蜜蜂中肠酪素酶与蜜蜂中肠围食膜的形成有关，而围食膜的致密度又决定了蜜蜂微孢子虫能否侵入蜜蜂中肠上皮细胞。取蜜蜂中肠测定其酪素酶的活力，得知对意大利蜂而言，酶的活力越高，孢子虫病发病率越低；反之，则发病率高，且酶活力随季节变化。

苏云金杆菌和灭幼脲混剂对美国白蛾幼虫2种酶活性的影响

通过室内外毒力测定和防治试验发现,苏云金杆菌(Bt)+灭幼脲混剂对美国白蛾2~3代4龄幼虫有较强增效作用,在此基础上分析该混剂对白蛾4龄幼虫体内中肠几丁质酶和乙酰胆碱脂酶(ACh E)活力的影响。结果表明:5种浓度的Bt、灭幼脲及其混剂对白蛾4龄幼虫体内中肠几丁质酶活力的影响随处理浓度增高和处理时间延长抑制作用越明显,且差异极显著,说明Bt+灭幼脲混剂均有抑制白蛾4龄幼虫中肠几丁质酶活力的作用,是该混剂对白蛾4龄幼虫提高毒杀效果的原因;5种浓度Bt+灭幼脲及其混剂处理对白蛾4龄幼虫体壁ACh E活性的影响随处理时间的增加有先升高后降低的趋势,36~96 h具诱导幼虫体壁ACh E活性逐渐增强的趋势,96 h后活性明显减弱,ACh E活性减低后白蛾4龄幼虫很快死亡,对ACh E活性抑制率为20.13%~90.00%,为Bt+灭幼脲混剂增效关键作用的另一个原因。

转Cry1Ac/1Ab基因棉花对棉铃虫的控制效果及对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾生长发育的影响

为评估转Cry1Ac/1Ab基因棉花对棉铃虫Helicoverpa armigera的抗性及对非靶标害虫甜菜夜蛾Spodoptera exigua和斜纹夜蛾S.litura生长发育的影响,采用室内生测法测定其对棉铃虫的抗性及对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾不同龄期幼虫存活率、营养代谢及中肠酶活性的影响。结果表明,转Cry1Ac/1Ab基因棉花对棉铃虫第2代幼虫的抗性程度最高,幼虫校正死亡率达91.33%,但对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾的抗性程度较低,幼虫校正死亡率分别为15.33%和13.33%。甜菜夜蛾和斜纹夜蛾各龄期幼虫取食转Cry1Ac/1Ab基因棉花后,其存活率与取食常规棉花对照无显著差异;甜菜夜蛾对转Cry1Ac/1Ab基因棉花叶片的相对取食量、近似消化率分别为16.68和93.12%,均高于取食常规棉花对照的10.72和92.00%,但差异不显著,而斜纹夜蛾取食转Cry1Ac/1Ab基因棉花后的各项营养指标均低于取食常规棉花对照,差异也不显著。取食转Cry1Ac/1Ab基因棉花后,甜菜夜蛾的过氧化物酶活性为0.02 U/mg prot,显著低于取食常规棉花的0.05 U/mg prot;斜纹夜蛾的酸性磷酸酶活性为0.15 U/mg prot,高于取食常规棉花的0.10 U/mg prot,但差异不显著,其它中肠酶活性均低于对照,亦无显著差异。