大白鼠中脑水管周围灰质向小脑皮层的投射——HRP法研究

本研究应用HRP逆行追踪法研究了大白鼠中脑水管周围灰质(PAG)向小脑皮层的投射。结果表明:小脑皮层的所有注射区域均接受PAG的投射。PAG向同侧小脑皮层的投射多于对侧,两者之比约为3∶1。PAG-小脑皮层投射神经元主要位于PAG的中段和尾段的腹外侧区及内侧区的腹侧部,吻段很少见标记细胞。标记细胞以中、小型梭形和三角形细胞为主,偶见中型多极细胞;PAG尾段的尾端可见少量大型多极细胞。小脑和PAG均与许多内脏的功能活动有关。结合实验结果,讨论了此投射的机能意义。

大鼠中脑水管周围灰质腹外侧部神经毡的超微结构研究

应用电镜技术，观察了大鼠中脑水管周围灰质（ＰＡＧ）腹外侧部内侧区和外侧区神经毡的超微结构。结果显示，外侧区神经毡有髓纤维多为直径大于１２μｍ的粗纤维，髓鞘厚度不等；树突直径多在１２～１５μｍ之间；突触型式以轴—树突触占优势，易见多个轴突终扣与同一树突形成突触或突触复合体，亦观察到轴—体突触、轴—轴突触和树—树突触。内侧区神经毡内有髓纤维分布稀疏，多为０６～１４μｍ的薄髓纤维；树突数量多，其直径多在１μｍ以下；突触形式有轴—树突触、轴—树突棘突触和轴—体突触。上述结果揭示了ＰＡＧ腹外侧部的内侧区和外侧区神经毡存在构筑差异。

人胎儿中脑水管室管膜的扫描电镜观察

目的：探索脑－脑脊液免疫神经内分泌回路的形态结构。方法：用扫描电镜的方法观察了人胎儿中脑水管室管膜的超微结构。结果：发现中脑水管室管膜上布满了大量的纤毛和微绒毛，并证实了中脑水管室管膜上存在着神经元样细胞，神经胶质样细胞和类组织细胞。纤毛或微绒毛丛中有神经纤维和树突末端。本文对上述结构与其他脑室的超微结构进行了比较，并对其功能进行了讨论。

下丘脑腹内侧核与中脑水管周灰白质间神经网络调节大鼠褐色脂肪组织产热的研究

目的研究下丘脑腹内侧核(VMH)与中脑水管周灰白质尾侧部(cPAG)间是否存在控制大鼠褐色脂肪组织非寒颤产热效应的下行投射网络。方法制作cPAG刺激诱发大鼠褐色脂肪组织产热局部温度上升的动物模型,再将霍乱毒素B(CTb)0.3μl注射入另一组大鼠的cPAG内。结果发现CTb感染的神经细胞以同侧下丘脑腹内侧核吻侧部最多,其次是前乳头核后侧部,而视前区正中部、下丘脑前部、不定带以及对侧下丘脑腹内侧核则较稀疏。结论实验提示从下丘脑腹内侧核到中脑水管周灰白质尾侧部的下行辐射是兴奋大鼠褐色脂肪组织非寒颤产热效应的传出神经回路。

大鼠中脑水管周灰白质的神经递质受体与褐色脂肪组织产热的关系

目的探讨下丘脑腹内侧核(VMH)与中脑水管周灰白质尾侧部(cPAG)下行投射网络神经递质与受体的关系。方法在cPAG注射N-甲基-DF冬氨酸(NMDA)受体阻断剂(AP5)0.3μL,用0.1 mA、33 Hz、0.5 ms电刺激同侧VMH 2 min,观察褐色脂肪组织(BAT)局部温度的变化,比较NMDA受体阻断剂和生理盐水在同侧VMH电刺激时BAT局部温度的变化。结果 0.3μL的AP5在cPAG内注射能显著降低同侧VMH电刺激诱发的BAT局部温度上升。结论 VMH与cPAG间的下行辐射是通过NMDA受体的化学突触传递,兴奋大鼠BAT,产生非寒颤产热效应。

大鼠中脑水管周围灰质各分区向下丘脑orexin阳性神经元分布区的投射及其联系

目的:观察大鼠中脑水管周围灰质(PAG)不同分区神经元发出的投射纤维与下丘脑orexin阳性神经元之间的联系,阐明PAG不同分区神经元支配下丘脑orexin阳性神经元的形态学基础。方法:首先将逆行示踪剂霍乱毒素B(CTb)注射到下丘脑orexin阳性神经元胞体分布区域,免疫组织化学显色观察PAG内CTb逆行标记神经元的分布特点;再将顺行示踪剂生物素化葡聚糖胺(BDA)注射到PAG不同分区,采用免疫组织化学双标记的方法,在下丘脑内观察BDA标记神经纤维及其终末与orexin阳性神经元的重叠分布特点和它们之间的联系。结果:将CTb注射到单侧下丘脑穹窿上区或外侧区后,在注射点同侧PAG的外侧区(lPAG)和腹外侧区(vlPAG)可见大量CTb逆标神经元,背外侧区(dlPAG)及背内侧区(dmPAG)仅见少量标记神经元。注射点对侧PAG区域也可观察到少量CTb标记神经元。将BDA分别注射到单侧dlPAG、lPAG和vlPAG后,在下丘脑双侧均可观察到BDA顺标纤维及其终末,但注射点同侧BDA标记纤维和终末的数量明显多于对侧。源自lPAG和vlPAG的BDA标记纤维及其终末与orexin神经元胞体在穹窿上区形成明确的重叠分布和密切接触,而源自dlPAG的纤维少见与orexin神经元接触。结论:lPAG及vlPAG来源的纤维及其终末与下丘脑内的orexin阳性神经元的分布区域重叠并形成密切接触,可能直接影响orexin神经元的功能。

家兔中脑水管的解剖与光镜观察

本文以刀解及HE染色光镜观察,研究家兔中脑水管形态及其室管膜细胞构筑学。家兔中脑水管并非一简单的狭窄全道,可区分为四个部分:①漏斗部,位于其嘴侧端;②峡部,位于上丘嘴侧1/3平面,漏斗部与峡部约占全长的1/3;③开放部,位于上丘尾侧2/3及下丘嘴侧平面,其背腹径显著大于前二部;④下丘隐窝部,位于下丘尾侧平面,呈鸟喙状向背侧凸入下丘。在中脑水管尾侧端与第四脑室嘴侧端之间,有一半透明膜封闭管腔。光镜观察表明,无论在其背侧壁与腹侧壁之间,还是在其嘴尾侧端之间,中脑水管室管膜上皮均有区域性差别。既便在成年动物上,不仅有单层纤毛柱状上皮,而且还有假复层纤毛柱状上皮及复层柱状上皮;但是,其两侧壁室管膜没有什么变化,均由单层纤毛柱状上皮或假复层纤毛柱状上皮所组成。在其背侧壁的室管膜下,常可见一锥形神经胶质细胞群,在背侧正中线上伸展。

电针预处理对切口痛大鼠中脑导水管周围灰质5-HT_(7)受体表达的影响

目的:建立足趾部切口痛大鼠模型,探讨重复电针预处理对切口痛大鼠镇痛效果及其对中脑导水管周围灰质(periaqueductal gray,PAG)5-HT_(7)受体(5-HT_(7)R)表达的影响。方法:40只成年雄性SD大鼠按随机数字表法均等分为对照组(Control,Con组)、切口痛模型组(Incision pain,IP组)、正常+电针预处理组(Control+Electroacupuncture,Con+EA组)、模型+电针预处理组(Incision Pain+Electroacupuncture,IP+EA组)。IP组和IP+EA组大鼠右足趾部行疼痛造模,且造模前,Con+EA组和IP+EA组大鼠行右侧“足三里”穴和“环跳”穴电针刺激(2/10 Hz疏密波,刺激强度数值为1档,每日1次30 min),连续5天。于第1次电针预处理前2 h(T1)、术前2 h(T2)、术后4 h(T3)、术后24 h(T4)测定大鼠机械刺激缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL);酶联免疫吸附法检测脑脊液中5-HT浓度;免疫组化和免疫荧光方法分别检测大鼠PAG中c-Fos和5-HT_(7)R蛋白表达情况。结果:与Con组比较,IP组大鼠T3、T4时间点MWT和TWL均明显降低,脑脊液中5-HT浓度增加,PAG中c-Fos蛋白和5-HT_(7)R表达明显上调(P<0.05);Con+EA组和IP+EA组脑脊液中5-HT含量和PAG中5-HT_(7)R表达均上升(P<0.05)。与IP组相比,IP+EA组大鼠T3、T4时间点的MWT和TWL显著升高,PAG中c-Fos蛋白表达减少,5-HT_(7)R蛋白表达增加(P<0.05)。结论:电针预处理可能通过上调PAG中5-HT_(7)R蛋白表达发挥镇痛作用。

中脑导水管周围灰质参与痛觉调控的研究进展

中脑导水管周围灰质是由包绕在中脑导水管周围神经细胞构成的灰质样结构,其解剖结构及生理功能都极其复杂、重要。中脑导水管周围灰质作为上行痛觉传导及下行痛觉调节系统的重要组成部分,对于痛觉的调控起着至关重要的作用。痛觉是大脑对机体组织损伤或可导致组织损伤的刺激作用产生的一种不愉快的主观感觉,引发疼痛的病因是多方面的,其中病理性疼痛发病机制复杂且难以治愈。本文主要基于中脑导水管周围灰质的解剖结构,就中脑导水管周围灰质在病理性疼痛中的调控作用及其相关机制进行综述。

腹外侧中脑导水管周围灰质参与心血管调节的研究进展

心血管疾病对人类健康造成严重危害,近年腹外侧中脑导水管周围灰质(vlPAG)在心血管中的调节作用受到关注。vlPAG是中脑边缘系结构,其与内脏功能活动的调控以及镇痛作用等有关,并通过多种受体(谷氨酸受体、毒蕈碱受体、大麻素受体等)以及多种神经递质(谷氨酸、内源性大麻素、γ-氨基丁酸等)参与心血管的调控作用。深入研究vlPAG的心血管调节机制对于临床防治相关心血管疾病(高血压、冠心病等)有重要意义。

正常成人中脑导水管层面脑脊液流动MRI测量:与年龄和性别相关分析

目的对不同年龄、性别的正常成人的中脑导水管层面的脑脊液(CSF)波形、流速和流量进行MRI测量分析比较。方法扫描设备为Philips 1.5T MR,采用中脑导水管MR相位对比法CSF-QF序列扫描,志愿者年龄区间在21-60岁之间,均为健康成年人,分别为21-30岁年龄组、31-40岁年龄组、41-50岁年龄组、51-60岁年龄组,每组20人,每组包含男性和女性各10人,总共为80名志愿者。然后由2名MR操作者使用MR扫描仪自配的流动分析软件,分别独立测量每个志愿者中脑导水管层面脑脊液的流体动力学数据,包括平均流量、平均流速、最大流速。结果所有志愿者中脑导水管层面的脑脊液流量或流速的变化曲线均表现为光滑平整的正弦波形。一致性检验显示2名MR操作者所测量的流体动力学数据的一致性良好(信度系数为0.97-0.99),继而采用2名MR操作者所测量的中脑导水管层面脑脊液的流体动力学数据的平均值做统计学分析。分析表示在各年龄组内,其男性与女性脑脊液的平均流量、平均流速、最大流速均无统计学差异(P>0.05);男性在不同年龄组间,其脑脊液的平均流量、平均流速、最大流速均无统计学差异(P>0.05);女性在不同年龄组间,其脑脊液的平均流量、平均流速、最大流速均无统计学差异(P>0.05)。结论在21-60岁的正常成人中,其中脑导水管层面脑脊液流动的MR测量具有良好的可重复性,其平均流量、平均流速、最大流速均不受年龄和性别影响。

丘脑水平横断面超声评估孕11~13+6周胎儿中脑导水管及其与头臀径的关系的价值研究

目的研究丘脑水平横断面超声评估孕11~13+6周胎儿中脑导水管及其与头臀径的关系的价值。方法选取在我院参加体检的孕妇150例,根据孕周分为3组,其中孕11~11+6周为观察1组、孕11~12+6周为观察2组、孕11~13+6周为观察3组,所有孕妇均接受丘脑水平横断面超声,分析3组胎儿中脑导水管左右径与头臀径的关系。结果观察3组中脑导水管左右径与头臀径>观察2组>观察1组(P<0.05);脑导水管左右径与头臀径的关系为负相关(P<0.05)。结论丘脑水平横断面超声可清晰获取孕11~13+6周胎儿中脑导水管及其与头臀径数据,二者的关系为负相关,以此可有效预测胎儿神经发育异常发生风险,建议临床采纳。

大鼠中脑导水管周围灰质向下丘脑orexin神经元的纤维投射

目的:明确中脑导水管周围灰质(PAG)神经元调节下丘脑orexin神经元的解剖学基础。方法:首先采用逆行示踪技术,将霍乱毒素B亚单位(CTb)作为逆行示踪剂注射到下丘脑orexin神经元胞体分布的区域,免疫组织化学方法染色观察PAG内CTb逆行标记细胞的分布特点;接着采用顺行示踪技术和免疫组化相结合的方法,将生物素化葡聚糖胺(BDA)作为顺行示踪剂注射到PAG,观察下丘脑内BDA标记的神经纤维与orexin神经元的重叠分布特点;最后运用免疫电镜技术观察BDA标记轴突终末与orexin神经元之间的突触联系。结果:CTb注射到单侧下丘脑orexin神经元区域后,在PAG观察到大量CTb标记神经元,注射点同侧标记细胞数明显占优,其中PAG外侧区(lPAG)和腹外侧区(vlPAG)可见大量CTb逆标神经元,背外侧区(dlPAG)和背内侧区(dm PAG)可见少量标记神经元;注射点对侧lPAG及vlPAG区域也观察到少量CTb标记神经元。BDA注射到单侧lPAG后,下丘脑内双侧均可观察到BDA标记的神经纤维,但注射点同侧标记神经纤维数量明显占优。BDA标记纤维与orexin神经元胞体在穹窿背侧接近不定带(ZI)的区域(本文中将此区域称作"穹窿上区")形成显著的重叠分布。透射电镜下观察到BDA标记的轴突终末与orexin神经元之间形成突触联系,且多为非对称性类型。结论:lPAG投射到下丘脑的神经纤维在穹窿上区与orexin神经元形成优势重叠分布、并与orexin神经元的胞体或树突形成以非对称性为主的突触联系,提示orexin神经元可能在lPAG的直接支配下发挥其调节觉醒状态、摄食行为等功能。

中脑导水管狭窄:3D-CISS序列的应用

目的 探讨 3D CISS序列 (Three Dimensionalconstructiveinferenceinsteadystate)在非肿瘤性中脑导水管狭窄的临床应用价值。资料与方法 对本组 34例在 1.5T超导MR仪和头颅线圈内行常规SE序列及 3D CISS序列扫描 ,通过对 3D CISS原始图像及MPR多平面重建图像来观察中脑导水管结构。对上述两种序列的图像显示结构进行对比分析。结果 3D CISS显示导水管狭窄病变为 97.0 6 % (33/ 34 ) ,常规SE显示导水管狭窄为 79.41% (2 7/34 )。二者在显示病变方面有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 3D CISS序列结合多平面重建技术在显示中脑导水管狭窄方面更敏感 ,辅助动态播放可观察脑脊液的异常流动 。

中脑导水管周围灰质内注射抗阿片肽血清对神经降压素增强电针镇痛的影响

本工作以钾离子透入引起大鼠甩尾反应作为痛反应指标，观察纳洛酮（ＮＸ）和抗阿片肽血清对大鼠中脑导水管周围灰质（ＰＡＧ）内微量注射神经降压素（ＮＴ）增强电针镇痛作用的影响。结果显示：（１）ＰＡＧ内微量注射ＮＴ后，大鼠电针镇痛效应明显提高；（２）ＰＡＧ内注射大剂量ＮＸ，可以显著减弱ＮＴ增强电针镇痛效应；（３）ＰＡＧ内微量注射抗甲脑啡肽血清和抗β内啡肽血清后，ＮＴ增强电针镇痛的作用明显降低；而ＰＡＧ内微量注射抗强啡肽Ａ１１３血清，对于ＮＴ增强电针镇痛的作用并无明显影响。提示：ＰＡＧ内ＮＴ在针刺镇痛过程中发挥重要作用，ＮＴ增强电针镇痛的作用与甲脑啡肽和β内啡肽有较密切的关系。

刺激大鼠上矢状窦区硬脑膜对中脑导水管周围灰质c-fos蛋白表达的影响

目的 :采用电刺激刺激大鼠上矢状窦区 (superiorsagittalsinus ,SSS)硬脑膜 ,观察中脑导水管周围灰质 (PAG)c fos蛋白的表达 ,以探讨PAG在血管源性头痛 (如偏头痛 )涉及的伤害觉信息的传递中的作用。方法 :以雄性SD大鼠为实验对象 ,在手术暴露其上矢状窦后电刺激SSS区硬脑膜 ,应用免疫组织化学染色技术 ,观察中脑导水管周围灰质c fos蛋白 (Fos)表达的变化。结果 :Fos免疫反应阳性神经元主要位于中脑导水管周围灰质的腹外侧区 ,阳性细胞数头侧至尾侧逐渐增多。空白对照组、假手术对照组、刺激组每张切片的Fos阳性神经元数分别为 7.2± 4 .2、13.6± 4 .3、76 .0± 12 .3。结论 :PAG可能参与血管源性头痛 (如偏头痛 )的痛觉中枢调控。

PC-MR不同解剖定位测量中脑导水管脑脊液流动的可复性研究

目的探讨同一解剖位置不同检查者测量结果间的相关性及可复性。方法选取32例健康志愿者,其中男15例,女17例,年龄18～30岁,平均(25.4±3.4)岁。应用3.0TMR两次测量中脑导水管不同解剖位置的脑脊液(CSF)流动。由两位医师先后对同一志愿者进行独立扫描,所有图像由另一医师进行后处理。选用T2WI正中矢状面定位,先后垂直导水管入口段、中间段、出口段进行扫描。在导水管显示面积最大的幅度图像上沿其边缘绘制ROI,重复3次取其结果平均值。取收缩期向下峰值流速(PPV)、舒张期向上峰值流速(PNV)及绝对每搏出量(ASV)进行对比分析。取2位医师测量结果的平均数用于比较不同解剖定位对测量结果的影响。结果不同解剖定位间平均PPV、PNV存在统计学差异,上段高于下段(P<0.05),两两均数比较,入口段与出口段流速存在差异(P<0.05);而ASV三者间无差异(P>0.05)。不同医师测量相同解剖定位时,两次PPV测量结果相关性以中间段最高,相关系数r=0.94,出口段r=0.82,入口段r=0.78。结论①中脑导水管不同解剖位置的CSF流速存在差异,上段流速高于下段,而ASV无差异;②导水管中间段测量结果可复性最佳,可作为理想的测速位置。

GABA_A受体部分介导丙泊酚在中脑导水管周围灰质腹外侧区的致痛觉过敏作用

目的观察丙泊酚在vlPAG对大鼠伤害性感受的影响及GABAA受体在其中可能的作用。方法Sprague-Daw ley(SD)♀大鼠随机分组,丙泊酚(Propofol,Pro)和荷包牡丹碱(B icucu lline,B ic)采用中脑导水管周围灰质腹外侧区(ven-trolateral portion of the PAG,vlPAG)注射。行为学实验采用热板法和福尔马林实验,分别以舔后爪潜伏时间(Hot-p latelatency,HPL)和疼痛(累计)评分为指标。免疫组化方法观察丙泊酚在vlPAG对福尔马林单侧足底皮下注射诱发的脊髓背角Fos蛋白表达的影响。结果行为学部分:两种疼痛模型中丙泊酚(10 g.L-1)vlPAG注射引起痛敏(P<0.01)。热板法实验中,丙泊酚vlPAG微量注射的痛敏作用可被相同部位预先注射25 mg.L-1B ic在10和20 m in时间点分别拮抗70%和71%(均P<0.01),在30和40 m in完全拮抗。在福尔马林实验中,丙泊酚vlPAG微量注射使福尔马林疼痛评分增加,此作用可被B ic(25 mg.L-1)在60 m in拮抗57%(P<0.05)。免疫组化部分中,丙泊酚vlPAG微量注射使福尔马林引起的脊髓背角各层FLI阳性细胞数明显增多(P<0.01),B ic vlPAG微量注射(25 mg.L-1)可部分拮抗丙泊酚vlPAG微量注射的作用(P<0.01)。结论在大鼠vlPAG微量注射丙泊酚能产生痛敏作用;GABAA受体部分介导了丙泊酚的以上作用。

PC-MR测量中脑导水管脑脊液流动的影响因素

目的探讨PC-MR不同编码速率(Venc)、扫描解剖定位、扫描线角度及感兴趣区(ROI)面积对中脑导水管脑脊液(CSF)流动测量结果的影响。材料与方法选取52例健康志愿者分两组进行研究,第一组32例,第二组20例。选用T2WI正中矢状面定位,在导水管显示最大的幅度图像上绘制ROI。第一组预置Venc为5、10、20、40、60cm/s垂直导水管中间段扫描。第二组Venc预置20cm/s,先后垂直导水管入口段、中间段、出口段及平行颅顶切迹方向的中间段进行扫描。ROI绘制方法:第一组及第二组导水管3次垂直扫描ROI包埋管腔;第二组中间段的垂直扫描先后绘制2个面积不等的ROI;中间段2次不同角度扫描ROI绘制包埋管腔。取收缩期向下峰值流速(PPV)、舒张期向上峰值流速(PNV)及绝对每搏出量(ASV)进行参数分析。结果第一组结果:Venc5cm/s时26例出现相位混淆,各测量指标明显低于其它Venc组(P<0.05);Venc10-60cm/s组均获得较好的相位图像、各测量指标间无差异(P>0.05)。第二组结果:三组不同解剖定位垂直扫描的速度均数上段高于下段(P<0.05),ASV间无差异(P>0.05);相同解剖定位不同ROI面积流速无差异(P>0.05),ASV结果有差异(P<0.05)。垂直扫描各测量结果大于平行颅顶切迹扫描(P<0.05)。结论①Ven对测量结果有影响:venc5cm/s时测量结果明显偏低;venc10-60cm/s内各指标测量结果间并无差异。②导水管CSF上段流速高于下段,而ASV无差异。③ROI面积不影响流速结果,ASV与ROI面积呈正相关。④垂直扫描测量结果大于倾斜。

褪黑素对大鼠中脑导水管周围灰质内阿片肽释放的影响

本文采用推挽灌流技术、放射免疫测定法 ,观察褪黑素 (melatonin ,MEL)对大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)推挽灌流液中 β 内啡肽 (β Ep)、亮氨酸脑啡肽 (L EK)含量的影响 ,以探讨MEL镇痛效应的中枢机制。结果显示 ,给药组大鼠腹腔注射 (ip)MEL 110mg/kg后 30～ 5 0min ,PAG灌流液中β Ep含量显著增加 ,而L EK含量未见显著变化 ;在推挽灌流同时用 5 0℃热水刺激甩尾法测定痛阈 ,可见ipMEL 110mg/kg后 40min ,大鼠痛阈显著升高。上述结果提示 ,MEL可促进PAG内 β Ep的释放 ,这可能是其发挥镇痛效应的中枢机制之一。