胎鼠中脑多巴胺细胞混合培养方法探索

目的探索一种新的胚胎大鼠腹侧中脑黑质细胞的混合培养方法,以获得具有高比例多巴胺神经元的原代细胞体系,有利于在体外条件下进行帕金森病(Parkinson's disease,PD)的发病机制和防治的研究。方法分离E15(EmbryonicDay 15)SD胎鼠中脑黑质区域组织,分散为单细胞后,分别用DMEM/F12+10%FBS含血清培养基和Neurobasal+N1无血清培养基设置不同组别进行培养,通过免疫组织化学方法检测在不同培养条件下细胞的生长状态及多巴胺能神经元的比例。结果 DMEM/F12+10%FBS与Neurobasal+N1先后一周交替换液的的培养体系中获得的TH阳性神经元占神经元的比例可达31%左右,明显高于单独使用DMEM/F12+10%FBS培养组(约10%)。结论 DMEM/F12+10%FBS与Neurobasal+N1先后一周交替换液是一种黑质神经元和胶质细胞混合培养并能获得高比例多巴胺神经元的有效培养方法。