棘皮动物弧菌诱导中间球海胆免疫致敏现象分析

为探究中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)是否存在免疫致敏现象,使用棘皮动物弧菌(Vibrio echinoideorum)对中间球海胆进行重复感染(首次、二次菌浓度分别为10^(3)、10^(4) CFU/mL),检测并比较了两次注射感染后不同时间点中间球海胆体腔细胞密度、吞噬能力、酸性磷酸酶(ACP)活力、活性氧(ROS)含量、总抗氧化能力(T-AOC)等相关免疫指标的变化,以及二次感染后免疫致敏组和对照组间成活率的差异。结果表明:与首次感染相比,二次感染时诱导致敏组的体腔细胞总密度、吞噬细胞密度、ACP、ROS和T-AOC等均出现显著上升(P<0.05),且响应时间明显缩短,达到峰值的时间分别提前了36、36、84、12、36 h,且各指标的峰值均显著高于首次感染(P<0.05);二次感染后,诱导致敏组在6 h时的吞噬率(45.41%±6.39%)显著高于对照组(33.17%±1.94%);经过棘皮动物弧菌低浓度诱导后,诱导致敏组存活率(43.33%±10.00%)显著高于未经诱导的阳性对照组(7.78%±10.71%)(P<0.05)。研究表明,低浓度棘皮动物弧菌能诱导中间球海胆产生免疫致敏现象,此结果可为中间球海胆的疾病防控提供新思路。

干露及恢复对中间球海胆抗氧化能力、细胞凋亡和免疫相关基因表达的影响

为研究干法运输对中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)活力的影响,采用低温(4℃)干露胁迫12、24、36 h后再浸润恢复12 h的处理方法,测定了湿质量为(3.57±0.63)g的中间球海胆体腔细胞超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)水平,通过流式细胞仪检测了细胞凋亡情况,利用实时定量PCR分析了不同时间干露胁迫下免疫相关基因LYZ、TLR1及凋亡相关基因Caspase-3和Caspase-9在体腔细胞中的表达情况。结果表明:干露试验组海胆体腔液T-SOD活力、MDA含量和T-AOC水平随干露时间的延长呈现先升高后降低的变化趋势,干露12 h时各指标值均达到最高,随后下降,并于复水12 h时接近对照组(P>0.05);免疫相关基因LYZ和TLR1总体上随干露时间的延长呈先减弱后增强的表达趋势,分别在干露24、36 h时达到峰值,入水恢复12 h时两基因的表达量显著低于对照组(P<0.05);发生凋亡的体腔细胞比率随干露时间延长的变化趋势与T-AOC水平的变化趋势相似,干露12 h时达到最高值,而Caspase-3、Caspase-9基因的表达量具有时间累积效应,分别在干露24、36 h时显著高于对照组和其他处理组(P<0.05)。研究表明,中间球海胆具有一定的耐干露能力,通过抗氧化酶系统维持活性氧自由基的动态平衡,LYZ、TLR1等固有免疫分子和Caspase依赖性细胞凋亡因子在应对干露胁迫、机体维持内稳态的过程中发挥重要作用。

减少拥挤对中间球海胆幼胆行为、生长和抗病的影响

正常水温下,将壳径约1.0 cm的中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)幼胆饲养在长19.6 cm×宽16.8 cm×高18.5 cm的饲养箱中,每箱24只,但彼此接触的拥挤程度不同:高拥挤的H组海胆直接放入饲养箱中;中拥挤的M组饲养箱用横隔分为上中下三层,每层放8只幼胆;低拥挤L组的饲养箱在横向隔间的基础上,每层纵向隔间为2×4的24个小隔间,每个小隔间1只海胆。常规相同饲养管理5周时,评估各组海胆的体尺、口器生长、肠重、肠道形态和管足伸出程度。一周后,在每组中随机取10只健康海胆置于饲养箱中,放入3只死于黑嘴病的海胆尸体,连续5天观察、计算每组海胆的患病率与死亡率,研究减少拥挤对中间球海胆幼胆行为、生长和抗病的影响。结果发现,L组海胆的壳径(17.18±1.51)cm和体质量(2.57±0.59)g显著高于H组[壳径(15.53±1.68)cm,体质量(2.01±0.56)g]。L组海胆的肠重(0.14±0.07)g显著高于H组(0.07±0.03)g,且肠道环状皱襞排列整齐,几乎无组织空化,细胞形态正常。这说明低拥挤环境下海胆对食物的消化能力更强,生长更快。L组海胆的发病率(21.25±13.56)%显著低于H组(67.14±14.96)%。本研究表明降低拥挤程度能有效地提高中间育成幼胆的生长速度和抗病性,为高效率海胆中间育成提供新途径。

温度对海刺猬(Glyptocidaris crenularis)和中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)遮蔽行为的影响

本文以贝壳作为遮蔽材料,研究不同温度水平和温度变化下海刺猬(Glyptocidaris crenularis)和中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)的遮蔽行为。温度实验结果表明:海刺猬在5°C条件下具有遮蔽行为的个体数以及利用的贝壳数显著少于15°C和25°C两组(P<0.05),而后两组没有显著差异(P>0.05);中间球海胆在25°C下具有遮蔽行为的个体数以及利用的贝壳数要显著少于15°C和5°C两组(P<0.05),而后两组没有显著差异(P>0.05)。温度变化的结果表明:5°C→20°C组海刺猬遮蔽行为所利用的贝壳数最少(P<0.05),另外两组没有显著差异(P>0.05);25°C→20°C组中间球海胆遮蔽行为所利用的贝壳数最少(P<0.05),另外两组差异不显著(P>0.05)。本研究为海胆行为生态学提供了新的思路和信息。

中间球海胆CS基因克隆及其响应急性高温胁迫的表达模式

【目的】明确中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)柠檬酸合酶(CS)基因(SiCS)的序列特征、组织表达情况及其应对急性高温胁迫的响应规律,为研究SiCS基因功能及揭示其参与中间球海胆高温应答的分子机制提供理论依据。【方法】利用RACE克隆SiCS基因cDNA序列,通过BLASTx、EXPASY Proteomics Server、HMMER、PSIRED v3.3及SWISS-MODEL等在线软件进行生物信息学分析;然后采用分光光度法检测中间球海胆管足和性腺线粒体肿胀度,运用实时荧光定量PCR检测SiCS基因的组织表达规律,并以Epoch酶标仪测定中间球海胆管足和性腺总SiCS活性变化情况。【结果】SiCS基因cDNA序列全长2971 bp,5'端非编码区(5'-UTR)和3'端非编码区(3'-UTR)分别为96和1480 bp,开放阅读框(ORF)为1395 bp,共编码464个氨基酸残基。SiCS蛋白分子量约51.48 kD,理论等电点(pI)为6.09,总平均亲水性(GRAVY)为-0.178,为稳定的温和疏水性蛋白;SiCS蛋白不存在信号肽和跨膜结构域,其二级结构中α-螺旋占43.86%、β-折叠占7.02%、无规则卷曲占49.12%,三维结构模型与野猪CS蛋白晶体结构的一致性为73.97%。SiCS氨基酸序列与紫球海胆(S.purpuratus)的CS氨基酸序列相似性最高,为92.90%。SiCS基因在中间球海胆的5种组织中均有表达,其相对表达量排序为体腔细胞>围口膜>性腺>管足>肠道;总SiCS活性排序则为管足>肠道>围口膜>性腺>体腔细胞;与对照组(20℃)相比,经23和26℃急性高温胁迫后中间球海胆管足和性腺的SiCS基因相对表达量及总SiCS活性均呈波动变化规律,但在不同高湿胁迫下和不同组织中有所差异。【结论】中间球海胆可能通过调整组织中的SiCS基因相对表达及SiCS活性来响应急性高温胁迫,且这种响应策略存在一定的组织和温度特异性,具体表现为性腺对急性高温胁迫较管足更敏感。

基于SSR-seq技术评估中间球海胆多代选育群体和普通养殖群体的遗传多样性

为明确不同选育群体中间球海胆的遗传多样性和遗传结构,利用SSR-seq技术和15个微卫星位点,对1个家系选育群体(FP)、1个群体选育群体(IP)和1个未经选育的普通养殖群体(CP)的遗传多样性及遗传结构进行了分析。结果显示,15个微卫星位点共检测出112个等位基因,FP、IP、CP 3个群体的平均观测等位基因数(N_(a))分别为5.077、5.133和6.133个,平均有效等位基因(N_(e))分别为2.816、2.873和3.638个,平均观测杂合度(H_(o))分别为0.522、0.441和0.501,平均期望杂合度(H_(e))分别为0.595、0.599和0.667,平均多态性信息含量(PIC)分别为0.546、0.543和0.623。家系选育群体(FP)H_(e)与H_(o)的差值(0.073)低于IP(0.158)和CP(0.166),平均固定指数(F)(0.115)低于IP(0.248)和CP(0.246)。3个群体间遗传分化系数(F_(st))介于0.018~0.176,为中低等程度的遗传分化。分子方差分析(AMOVA)结果显示,3个群体的遗传变异主要源于个体间。主成分分析(PCoA)和聚类进化树结果均显示,3个群体之间的亲缘关系较近,其中IP群体遗传分化程度最高。研究表明,3个中间球海胆群体均具有较高的遗传多样性,多代家系选育和群体选育均未明显降低群体的遗传多样性,家系选育更有利于保持群体的杂合度和控制群体的近交水平,群体选育则会提升群体的遗传分化程度。

中间球海胆人工育苗附着基改良及不同规格种苗养殖效果的比较

人工育苗是我国培育中间球海胆养殖业种苗的主要手段,然而传统的海胆附着基的人工育苗效果不尽如人意,尤其是在控制稚胆剥离损伤方面。目前,海上吊笼养殖是中间球海胆人工养殖最主要的养成方式之一,而随着室内工厂化养殖技术的更新和优化,海胆的室内工厂化养殖产业发展迅速并受到广泛关注。为探明以软质塑料膜作为中间球海胆附着基的育苗效果以及不同规格种苗养殖的效果,分别使用硬质波纹板和软质塑料膜作附着基进行中间球海胆人工育苗,并开展了大、小两种规格(壳径分别为0.5 cm和2.0 cm)的海胆种苗室内工厂化养殖和海区养殖研究,旨在明确软质塑料膜替代传统硬质波纹板作海胆育苗附着基的可行性以及中间球海胆室内工厂化养殖和海区养殖效果的优劣。实验结果表明:软质塑料膜在采苗效率方面与波纹板无异,但在促进稚胆生长和提高存活率方面优势显著(p<0.05);在不同规格中间球海胆种苗的工厂化养殖和海上养成研究中,相同养殖条件下,养殖12月龄的大规格种苗相较于小规格种苗在生长和存活方面优势显著(p<0.05),同时工厂化养殖能确保更高的养殖成活率和更优的生长性能(p<0.05),然而中间球海胆的工厂化养殖在能源成本、物料成本以及人力成本等方面要远高于海上养成。综上所述,建议在中间球海胆的人工育苗中使用软质塑料膜替代硬质波纹板附着基,在海胆人工养殖中应该尽可能选择2.0 cm以上甚至更大规格的中间球海胆种苗。此外,虽然可以通过深海井水进行温度调控,实现中间球海胆的室内工厂化养殖和安全度夏,但是由于各项投入较高,在生产实践中,需要根据预算和养殖预期进行选择。本研究旨在为中间球海胆人工繁育技术革新和室内工厂化养殖提供科学参考。

不同饵料对中间球海胆摄食与生长及硫酸软骨素积累的影响

【目的】明确海带、江蓠和石莼3种饵料对中间球海胆摄食、壳径增长、体质量增长、性腺颜色及硫酸软骨素积累的影响,为筛选适宜的养殖海胆饵料及合理制定鲜饵料匮乏期的中间球海胆投喂计划提供理论依据。【方法】将中间球海胆按投喂饵料分为海带投喂组、江蓠投喂组和石莼投喂组,在投喂第30、60和90 d,利用游标卡尺测定海胆壳径和壳高,使用天平测定海胆体质量和性腺重量,计算日平均摄食率、饵料系数、壳径特定生长率、体质量特定生长率和性腺指数;通过色度计测定性腺颜色并计算色差;采用酶联免疫分析法(ELISA)测定中间球海胆性腺硫酸软骨素含量和硫酸软骨素合酶活性。【结果】随着投喂时间的推移,各处理组中间球海胆的日平均摄食率呈下降趋势,江蓠投喂组日平均摄食率最高,其次是海带投喂组,石莼投喂组中间球海胆的日平均摄食率最低;在各时间段,饵料系数最高的是江蓠投喂组,其次是海带投喂组,最低的是石莼投喂组,且三者差异显著(P<0.05,下同);随投喂时间的推移,各处理组中间球海胆的壳径特定生长率和体质量特定生长率均呈下降趋势,在相同投喂时间下,各处理组的海胆壳径特定生长率和体质量特定生长率均差异显著,排序均为海带投喂组>石莼投喂组>江蓠投喂组;3个处理组的中间球海胆性腺指数存在一定差异,排序为海带投喂组>石莼投喂组>江蓠投喂组;江蓠投喂组和海带投喂组中间球海胆性腺颜色较优,江蓠投喂组性腺红度在各投喂时间段均最高,且在第90 d江蓠投喂组性腺黄度显著高于其余处理组,海带投喂组性腺亮黄色差在各投喂时间段均最低;江蓠投喂组的中间球海胆性腺硫酸软骨素含量和硫酸软骨素合酶活性最低,海带投喂组和石莼投喂组无显著差异(P>0.05)。【结论】不同饵料对中间球海胆摄食、壳径增长、体质量增长、性腺发育和品质及硫酸软骨素积累存在不同影响,在海带匮乏期可通过投喂石莼和江蓠进行有效补充,从而保障中间球海胆的生长和发育。

不同投喂模式对中间球海胆生长及性腺发育、感官品质和营养品质的影响

本试验旨在探究不同投喂模式对中间球海胆生长及性腺发育、感官品质和营养品质的影响。试验1:设置饲料组(投喂配合饲料)和海带组(投喂海带),每组6只海胆,均持续投喂85 d。试验2:设置饲料组和海带组,每组6只海胆,其中饲料组前85 d投喂配合饲料,后78 d投喂海带;海带组持续投喂海带163 d。结果表明:1)试验1和试验2结束时,海带组海胆的增重率显著高于饲料组(P<0.05)。与试验1相比,试验2饲料组海胆的增重率及海带组海胆的增重率、消化道指数均显著提高(P<0.05)。2)试验1结束时,海带组海胆的性腺指数显著低于饲料组(P<0.05)。试验1和试验2结束时,饲料组海胆性腺的红度(a*)、黄度(b*)值均显著低于海带组(P<0.05),而亮度(L*)值均显著高于海带组(P<0.05)。与试验1相比,试验2饲料组和海带组海胆性腺的L*、a*、b*值均显著提高(P<0.05)。3)试验1结束时,饲料组海胆性腺的硬度显著低于海带组(P<0.05);试验2结束时,饲料组海胆性腺的黏附性和内聚性均显著高于海带组(P<0.05)。与试验1相比,试验2饲料组海胆性腺的内聚性、弹性、胶着性、咀嚼性及海带组海胆性腺的弹性均显著提高(P<0.05)。4)试验1结束时,饲料组海胆性腺的非必需氨基酸(NEAA)和甜味氨基酸含量显著高于海带组(P<0.05);试验2结束时,饲料组海胆性腺的必需氨基酸(EAA)含量显著高于海带组(P<0.05)。与试验1相比,试验2海带组海胆性腺的EAA、总氨基酸(TAA)、NEAA和苦味氨基酸含量均显著提高(P<0.05)。5)试验1和试验2结束时,饲料组海胆性腺的二十碳五烯酸(EPA)含量和n-3/n-6多不饱和脂肪酸(PUFA)显著低于海带组(P<0.05),二十二碳六烯酸(DHA)含量显著高于海带组(P<0.05)。与试验1相比,试验2饲料组和海带组海胆性腺的EPA、∑n-3 PUFA含量和n-3/n-6 PUFA均显著提高(P<0.05),饲料组海胆性腺的二十碳四烯酸(ARA)含量显著提高(P<0.05)。由此可见,投喂配合饲料虽然提高了海胆的性腺指数,但降低了海胆的生长和性腺感官品质。与全程投喂配合饲料相比,使用配合饲料-海带接力的投喂模式可提高海胆性腺的颜色、质地和必需脂肪酸含量。

中间球海胆南北接力养殖试验

为探索中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)福建—山东两地“南北接力”养殖模式的可行性,于2021年3月至2022年4月在福建连江奇达海域和山东荣成烟墩角海域开展了中间球海胆南北接力海上筏式养殖试验。结果显示,利用鲍筏式养殖设施,定期投喂海带(Laminaria japonica)和龙须菜(Gracilaria lemaneiformis),经过13.5个月的养殖,大规格中间球海胆的壳径达到(61.97±2.38)mm,体质量达(93.13±9.84)g,性腺指数为17.69%±1.84%;中规格中间球海胆的壳径达(58.20±3.03)mm,体质量达(68.43±8.88)g,性腺指数为15.38%±1.44%;小规格中间球海胆的壳径达(51.39±2.41)mm,体质量达(53.28±8.71)g,性腺指数为13.45%±1.39%。综上表明,利用福建、山东南北两地的海水温度季节差异进行中间球海胆海上筏式接力养殖,可大大加快海胆的生长速度,缩短养殖周期,是一种高效的养殖模式,具有较好的推广价值,其中投放大规格的中间球海胆苗种可带来更高的经济效益。

中间球海胆与光棘球海胆杂交及子一代人工育苗技术

研究结果表明,虽然中间球海胆与光棘球海胆的繁殖时间有差异,但通过筛选能够同时得到自然成熟的精卵,在比正常海胆自交精子量高20～40倍的精子作用下,中间球海胆为母本,光棘球海胆为父本,杂交受精率为47 1%,而反交的受精率为1 9%,正反交受精率均低于自交组。在适宜的水温、光照及饵料等培养条件下,两杂交组均能够生长、附着变态,并且变态时间与母本相近。

中间球海胆与光棘球海胆杂交子一代的生长比较研究

通过海胆杂交子一代与两亲本的中间育成、海上筏式养殖的生长对比,表明海胆杂交子一代具有杂交优势,养殖成活率比其母本高10%,且生长快、生殖腺指数高、颜色鲜艳。大连长海县獐子岛杂交海胆达5cm时间比大连凌水养殖的母本中间球海胆提前7个月。

中间球海胆、光棘球海胆及杂交F_1代(中间球海胆♀×光棘球海胆♂)群体遗传多样性AFLP分析

应用AFLP技术对中间球海胆、光棘球海胆及杂交F1代(中间球海胆♀×光棘球海胆♂)群体的遗传多样性进行了分析。结果表明,4对引物共扩增得到272个位点,其中269个多态位点,总的多态位点比例为98.89%。3个群体的香农多样性指数分别为:0.2331±0.1273、0.2005±0.1385和0.2625±0.1067。群体内遗传相似度分别为:0.6876±0.0523、0.6501±0.0548和0.6552±0.0553。分子方差分析(AMOVA)结果表明,变异来源有25.39%来自群体间,有74.61%来自群体内,群体内的遗传多样性比较丰富。尽管杂交海胆在表型上可以明显分成两种类型,但是通过AFLP统计的遗传距离进行的个体聚类却随机聚在一起,不能分成两个群体。

福建沿海试养中间球海胆的初步研究

为探索中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)在福建沿海季节性养殖的可行性,于2018年11月开展了新品种中间球海胆"大金"南移福州海域养殖试验。试养海胆分为大(壳径3 cm)和小(壳径1 cm)两种规格。采用当地现有的鲍养殖海域和设施,定期投喂海带(Laminaria japonica)和龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)。经过6个月的养殖,福州养殖的大规格海胆壳径达(55.90±2.63)mm,体质量(56.30±6.92)g,性腺指数15.02%±1.5%,海胆生殖腺发育处于成熟前期(Ⅲ期),性腺质量良好,且显著高于大连同期养殖的大规格海胆壳径(46.56±3.88)mm和体质量(39.07±5.05)g(P<0.05)。同时,福州养殖的小规格海胆壳径达(40.97±0.87)mm,体质量(23.18±0.37)g,性腺指数9.64%±1.00%。试养结果表明,冬春季中间球海胆可在福建沿海开展季节性养殖,采用现有海上设施和养殖笼,投喂鲜活大型藻类,海胆的生长速度显著优于同期大连养殖。中间球海胆福建沿海南移养殖是满足其日益增长的市场需求的重要途径。

3种饵料模式对中间球海胆生长、性腺产量和性腺品质的影响

研究了3种饵料模式对中间球海胆整个生长周期的生长速度及商品规格性腺产量和品质的影响。选取6月龄中间球海胆,以3种饵料模式海带(E1)、海带+贻贝(E2)、玉米+贻贝(E3)养殖至商品规格,期间每隔2个月对海胆的壳径和体质量进行测量,实验结束时,对海胆的性腺湿重、性腺水分和性腺颜色等进行测量和分析。结果显示:在海胆的各生长阶段,饵料模式对其壳径和体质量均具有极显著影响,3种模式下海胆的壳径和体质量均为E2>E1>E3。饵料模式对海胆大部分生长阶段壳径和体质量的特定生长率具有极显著影响,3种模式下海胆壳径和体质量的特定生长率均为E2≥E1>E3。饵料模式对商品规格海胆性腺产量和性腺品质具有显著或极显著影响,对于性腺湿重,E2模式[雌性:(7.58±1.21)g,雄性:(7.74±1.95)g]表现最优,其次是E1模式[雌性:(4.50±1.20)g,雄性:(4.87±1.02)g],最后为E3模式[雌性:(2.66±1.02)g,雄性:(2.32±0.75)g];对于性腺指数,E2模式(雌性:15.07%±1.84%,雄性:15.83%±3.01%)表现最优,其次为E1模式(雌性:10.49%±2.71%,雄性:11.27%±2.45%)和E3模式(雌性:12.48%±4.33%,雄性:12.78%±3.73%);对于性腺水分和性腺颜色,E2和E1模式表现最优,E3模式表现较差。饵料模式对不同性别海胆的影响差别较小。实验结果表明,单一投喂海带,中间球海胆即可获得较好的壳生长,而添加动物性蛋白可以明显的提高其体质量和性腺产量,海带+贻贝这一模式可应用于提高海胆养殖效率,而玉米对促进海胆的体生长和性腺产量和品质均无有益效果,即使添加动物性蛋白,玉米+贻贝这一模式也很难替代海带有效地养殖中间球海胆。

饵料、家系及二者交互作用对中间球海胆生长、摄食与变异的影响

为研究饵料、家系及二者交互作用对中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)生长、摄食及变异的影响,利用两种饵料—裙带菜(Undaria pinnitafida)和配合饲料,对6个中间球海胆全同胞家系进行了60 d投喂,实验结束时测量了实验海胆的终末体重(FBW)和总摄食量,并计算了体重特定生长率(SGR)、饵料系数(FCR)和体重变异系数的变化(ΔCV),利用双因素及单因素方差分析的方法,检验了饵料、家系及二者交互作用对FBW、SGR、FCR及ΔCV的影响。结果表明,饵料与家系的交互作用对FBW和ΔCV无显著影响,摄食裙带菜的海胆较摄食配合饲料的海胆在终末体重(FBW)和整齐度(ΔCV)上表现出极显著的优势(P<0.01),不同家系间海胆的FBW和ΔCV也有显著差异(P<0.05)。饵料与家系的交互作用对体重SGR和FCR均有极显著影响(P<0.01),在各家系内,裙带菜投喂下海胆体重SGR均极显著优于配合饲料投喂(P<0.01);饵料系数(FCR)均极显著高于配合饲料投喂(P<0.01);对于每种饵料,不同家系间SGR也均具有显著差异(P<0.05),FCR亦是如此。两种饵料下家系SGR排位基本一致,说明家系与饵料在SGR上的交互作用是由于不同饵料下家系对SGR的影响程度有差异造成的,而家系FCR排位出现了较大变化则说明FCR受到交互作用的影响是由于不同饵料对不同家系的投喂效果不同造成的。本研究结果表明,家系选择可用于对中间球海胆生长、饵料系数和整齐度的遗传改良,饵料对这些性状的表现有显著的影响,对饵料系数进行家系选育时应注意家系与饵料的交互作用问题。

中间球海胆繁殖前后性腺中脂类和脂肪酸含量变化

为研究中间球海胆Strongylocentrotus intermedius繁殖前后性腺中脂类和脂肪酸含量的变化,采用毛细管气相色谱法对排精/卵前后的中间球海胆性腺中脂类和脂肪酸组成进行了分析比较。结果表明:中间球海胆排精/卵前,雌、雄个体在性腺指数和性腺含水率上无显著性差异(P>0.05),雌性个体性腺中脂类含量显著高于雄性个体(P<0.05);排精/卵前后,海胆性腺中磷脂含量均较高,是海胆脂类的重要组分,排精/卵后,海胆性腺中游离脂肪酸和甘油三酯显著下降(P<0.05),胆固醇在雌性性腺中出现了显著升高(P<0.05);雌、雄海胆性腺中脂肪酸组成种类基本相同,共检测到24种脂肪酸,其中C_(20∶4(n-6))和C_(20∶5(n-3))是主要的不饱和脂肪酸组分,排精/卵后,雄性个体性腺中C_(18∶1(n-9))含量显著升高(P<0.05),雌性个体C_(18∶0)含量显著升高(P<0.05)。本研究结果可为海胆亲本营养繁殖学的研究提供基础数据和理论依据。

中间球海胆“红斑病”病原弧菌致病机理的研究

用平板玻璃纸覆盖技术获得中间球海胆Strongylocentroyusintermedius“红斑病”致病弧菌的胞外产物 (ECP), 并分析了其主要成分。结果表明, 胞外产物中淀粉酶、酪蛋白酶、明胶酶、卵磷脂酶具有活性, 并经感染试验证实, 该胞外产物对海胆有与菌体相同的致病性; 温度可影响胞外产物的蛋白质总含量和酶活性; 胞外产物的剂量对海胆感染率影响显著 (P<0 05 ), 而作用时间对感染率的影响不显著。

中间球海胆(♀)×光棘球海胆(♂)F_1代的生殖腺特征

对中间球海胆(♀)与光棘球海胆(♂)杂交F1代的生殖腺特征进行了研究,并与母本中间球海胆进行了比较。试验结果表明,中间球海胆的生殖腺颜色一般呈橙色或橘黄色(不同发育时期有所不同),结构致密;杂交海胆中有约90%表现为橙色和橘黄色,约10%呈黄色和浅棕色,约20%的个体生殖腺结构疏松,且和发育周期及色泽无关。杂交海胆的生殖腺指数与中间球海胆的变化基本一致,并且雌雄个体差别不明显。杂交海胆在生殖腺发育的整个过程中,生殖腺指数虽然也出现周期性的变化,但组织切片观察发现杂交海胆生殖腺发育不能象母本一样有明显分期,只有个别雌性个体能产生成熟卵细胞,雄性个体未见成熟精子。

饲料脂肪水平对中间球海胆幼胆生长、消化酶和热胁迫后抗氧化酶活力的影响

为了确定中间球海胆Strongylocentrotus intermedius幼胆饲料中适宜的脂肪水平,采用摄食生长试验探讨了饲料中脂肪水平（3%、6%、9%、12%和15%）对海胆幼胆存活、生长、消化酶和热胁迫后抗氧化酶活力的影响,试验共进行96 d。结果表明：试验结束时,6%饲料脂肪水平组海胆增重率最高,显著高于15%脂肪组（P〈0.05）;随着饲料脂肪水平的升高,中间球海胆消化道中脂肪酶活力显著升高（P〈0.05）,淀粉酶活力显著下降（P〈0.05）,胃蛋白酶活力有下降趋势（P〉0.05）;饲料脂肪水平显著影响热胁迫后海胆体腔液中抗氧化酶活力,其中热胁迫2 h后,12%脂肪组超氧化物歧化酶（SOD）活力最高,显著高于15%脂肪组（P〈0.05）;热胁迫6 h后,海胆体腔液过氧化氢酶（CAT）活力最高值出现在6%脂肪组,且高于12%和15%脂肪组。研究表明,6%饲料脂肪水平时中间球海胆幼胆的生长速率最快,6%~12%饲料脂肪水平能够显著提高热胁迫后海胆的抗氧化能力。