人间充质干细胞活性因子鞘内注射治疗新生儿中-重度缺氧缺血性脑病的临床研究

目的探究新生儿中-重度缺氧缺血性脑病应用鞘内注射人间充质干细胞活性因子的治疗效果。方法本次实验研究选择的实验对象是2015年11月我院接收并治疗的中-重度缺氧缺血性脑病新生儿患者1例,通过诊断后确诊该患儿为中-重度缺氧缺血性脑病,其表现为肌张力异常、神志改变等现象,选择患儿体外培养的干细胞因子并从腰椎间隙穿刺注入治疗,观察并分析该中-重度缺氧缺血性脑病患儿通过应用鞘内注射人间充质干细胞活性因子的临床效果。结果研究对象是我院接治出生2小时确诊患有中-重度缺氧缺血性脑病的患儿,通过腰椎间穿刺注入人间充质干细胞活性因子,结果显示,患儿精神状态较好,嗜睡现象减轻且肌张力有所改善。且随着时间的增加直至治疗3周,患儿神经行为、肌张力以及原始反射等指标明显改善,且患儿通过检查脑电图和MRI等指标均显示正常。结论针对患有中-重度缺氧缺血性脑病的新生儿选择应用鞘内注射充质干细胞活性因子可以起到较好的效果,短期疗效较为明显,但若将其作为长期治疗药物还需要进一步观察和探究。

血清HIF-1α、NSE、GFAP及相关临床特征与新生儿缺氧缺血性脑病发生风险的关系分析

目的探讨血清低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及相关临床特征与新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)发生风险的关系。方法选取2020年1月—2023年1月苏州大学附属儿童医院收治的85例HIE患儿作为HIE组,另选取同期在该院出生的120例健康新生儿作为对照组,分析两组的临床资料并检测新生儿出生后3 d血清HIF-1α、NSE、GFAP水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HIF-1α、NSE、GFAP水平预测新生儿HIE发病的价值;多因素逐步Logistic回归模型分析新生儿HIE发病的影响因素。结果与对照组相比,HIE组宫内窘迫、脐带异常、羊水污染、1 min Apgar评分≤7分的患儿比例较高(P<0.05),并且血清HIF-1α、NSE、GFAP水平较高(P<0.05);两组孕妇年龄、孕妇文化程度、胎龄、新生儿性别、出生体重、产次、剖宫产、胎膜早破比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,HIF-1α、NSE、GFAP及三者联合预测新生儿HIE发病的敏感性分别为82.7%(95%CI:0.795,0.862)、78.7%(95%CI:0.705,0.849)、84.0%(95%CI:0.803,0.891)、85.3%(95%CI:0.788,0.922),特异性分别为85.3%(95%CI:0.816,0.907)、74.7%(95%CI:0.715,0.796)、72.0%(95%CI:0.692,0.771)、90.5%(95%CI:0.825,0.956),AUC分别为0.907(95%CI:0.884,0.930)、0.850(95%CI:0.816,0.884)、0.893(95%CI:0.827,0.959)、0.936(95%CI:0.905,0.967);多因素逐步Logistic回归分析显示,宫内窘迫[O^R=3.592(95%CI:2.017,6.397)]、脐带异常[O^R=4.905(95%CI:2.862,8.406)]、羊水污染[O^R=7.262(95%CI:3.603,14.637)]、1 min Apgar评分≤7分[O^R=3.139(95%CI:1.954,5.043)]、HIF-1α≥0.463 ng/mL[O^R=2.916(95%CI:1.422,5.980)]、NSE≥12.395μg/L[O^R=3.714(95%CI:1.955,7.056)]、GFAP≥3.962 ng/mL[O^R=3.556(95%CI:2.039,6.202)]均是新生儿HIE发病的危险因素(P<0.05)。结论宫内窘迫、脐带异常、羊水污染、出生后1 min Apgar评分低及血清HIF-1α、NSE、GFAP水平高是新生儿HIE发病的危险因素,临床通过检测血清HIF-1α、NSE、GFAP水平可为临床筛查HIE提供帮助,3项指标联合检测可进一步提高诊断价值。

亚低温对新生儿缺氧缺血性脑病患儿血清泛素羧基末端水解酶-L1、低氧诱导因子-1α表达水平及神经发育结局的影响

目的探讨亚低温对新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)患儿血清泛素羧基末端水解酶-L1(ubiquitin carboxy-terminal hydrolase-L1,UCH-L1)、低氧诱导因子-1a(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)表达水平及预后的影响。方法选取2015年8月至2022年8月邯郸市妇幼保健院新生儿重症监护病房(neonatal intensive care unit,NICU)收治的110例中重度HIE患儿作为研究对象。根据家属是否同意患儿接受亚低温治疗,将患儿分为亚低温治疗组(n=70)和传统治疗组(n=40);亚低温治疗组患儿除常规治疗外,于出生后0~6 h实施选择性头部亚低温治疗。传统治疗组患儿给予常规治疗;治疗前和治疗后第3天,采用酶联免疫吸附实验双抗夹心法检测UCH-L1、HIF-1α表达水平。随访患儿出生后12~15个月神经发育结局。统计学方法采用独立样本t检验、配对t检验、χ^(2)检验或Fisher确切概率法。结果亚低温治疗组与传统治疗组治疗后血清UCH-L1[(1.9±0.4)与(3.1±0.3)μg/L,t=16.495,P<0.001]、HIF-1α表达水平[(1.40±0.22)与(2.75±0.19)μg/L,t=32.486,P<0.001]比较,亚低温治疗组明显低于传统治疗组;亚低温治疗组患儿治疗后血清UCH-L1表达水平低于治疗前[(1.9±0.4)与(3.3±0.5)μg/L,t'=18.293,P<0.01]。亚低温治疗组和传统治疗组在治疗3 d后,虽然两组血清中HIF-1α表达水平均出现高于治疗前[(1.40±0.22)与(1.23±0.29)μg/L,t'=3.907,P<0.001;(2.75±0.19)与(1.27±0.35)μg/L,t'=23.504,P<0.001],但是,亚低温抑制血清HIF-1α表达水平升高的效果明显优于传统治疗组。随访结果显示,亚低温治疗组患儿神经发育正常的比例高于传统治疗组[68.6%(48/70)与32.5%(13/40),χ^(2)=13.408,P<0.001];亚低温治疗组神经发育迟缓的比例低于传统治疗组[11.4%(8/70)与37.5%(15/40),χ^(2)=10.462,P<0.001]。结论亚低温治疗可以明显降低中重度HIE患儿血清UCHL1表达水平,抑制血清HIF-1a表达水平升高的作用明显优于传统治疗,这可能是低温治疗的神经保护机制之一。

新生儿缺氧缺血性脑病血清miR-124与miR-126的表达及临床意义

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)血清微小核糖核酸(miR)-124、miR-126的表达及临床意义。方法选取2019-01—2023-02湘南学院附属医院收治的92例HIE患儿为HIE组,根据病情严重程度分为轻度组44例,中度组27例,重度组21例,另选取同期31名健康新生儿为对照组。采用Spearman相关性分析HIE患儿血清miR-124、miR-126表达与S100B、NSE水平的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-124、miR-126水平对新生儿HIE的诊断价值。结果与对照组比较,HIE组血清miR-124、miR-126表达降低,S100钙结合蛋白B(S100B)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平升高(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组血清miR-124、miR-126表达依次降低,S100B、NSE水平依次升高(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,HIE患儿血清miR-124、miR-126表达与S100B、NSE水平呈负相关(rs=—0.757、—0.781、—0.800、—0.785,P<0.001)。ROC曲线分析显示,血清miR-124、miR-126表达单独和联合诊断新生儿HIE的曲线下面积分别为0.872、0.882、0.946。结论新生儿HIE血清miR-124、miR-126低表达,可能通过神经细胞损伤参与新生儿HIE过程,血清miR-124、miR-126表达联合诊断新生儿HIE的价值较高。

缺氧缺血性脑病新生儿血清miR-139-5p,HDAC4和GFAP表达水平及其临床价值研究

目的分析血清微小核糖核酸(micro RNA,miR)-139-5p,组蛋白去乙酰化酶4(histone deacetylase 4,HDAC4)和胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillary acidic protein,GFAP)与新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)脑损伤严重程度的关系。方法选取2017年1月~2022年3月广元市中心医院分娩的HIE新生儿72例为研究对象(研究组);同期健康的足月新生儿75例为对照组。实时荧光定量PCR检测血清中miR-139-5p,HDAC4表达水平。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清GFAP水平。Logistic回归分析影响HIE患儿重度脑损伤发生的因素。结果与对照组相比,研究组血清GFAP(1.30±0.37ng/L vs 0.50±0.15ng/L),HDAC4相对表达水平(2.05±0.39 vs 1.02±0.21)升高,miR-139-5p相对表达水平(0.63±0.14 vs 1.01±0.22)和NBNA评分(33.20±1.43分vs 39.85±2.23分)降低,差异具有统计学意义(t=17.304,20.046,12.436,21.424,均P<0.05);与轻中度组相比,重度组血清GFAP(1.61±0.47ng/L vs 1.16±0.33ng/L),HDAC4(2.43±0.37 vs 1.87±0.40)相对表达水平升高,miR-139-5p相对表达水平(0.38±0.10 vs 0.74±0.16)和NBNA评分(30.52±1.54分vs 34.46±1.38分)降低,差异具有统计学意义(t=4.690,5.669,9.900,10.884,均P<0.05)。Logistic回归分析显示,miR-139-5p低表达,HDAC4高表达,低NBNA评分,低出生后1 min内Apgar评分是影响HIE患儿重度脑损伤发生的危险因素(Waldχ^(2)=5.772~6.969,OR=1.519~1.709,均P<0.05)。Pearson分析显示,血清miR-139-5p表达水平与GFAP,HDAC4呈负相关(r=-0.416,-0.579,均P<0.05),血清HDAC4表达水平与GFAP呈正相关(r=0.437,P<0.05)。Spearman分析显示,血清mi R-139-5p表达水平与NBNA评分、出生后1 min内Apgar评分、出生后5 min内Apgar评分呈正相关(r=0.398,0.367,0.348,均P<0.05);血清HDAC4表达水平与NBNA评分、出生后1 min内Apgar评分、出生后5 min内Apgar评分呈负相关(r=-0.364,-0.345,-0.332,均P<0.05)。结论HIE患儿血清中miR-139-5p表达降低,HDAC4表达升高,mi R-139-5p,HDAC4与HIE患儿脑损伤严重程度有关。

基于MRI研究血清GH、8-OHdG、HMGB1与新生儿缺氧缺血性脑病临床分度的相关性

目的 研究血清生长素(GH)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、高迁移率族蛋白(HMG)B1与新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)临床分度的相关性。方法 选取2019年1月至2022年12月在秦皇岛市第一医院进行诊断并治疗的120例HIE患儿作为研究组,另选取同期健康新生儿120例作为对照组,比较研究组及对照组、不同临床分度及不同磁共振成像(MRI)评分的血清GH、8-OHdG、HMGB1的差异。采用Spearman相关性分析研究对象临床分度、MRI评分与血清GH、8-OHdG、HMGB1水平的相关性。结果 研究组血清GH低于对照组,8-OHdG、HMGB1高于对照组,差异有统计学意义(t值分别为22.828、48.563、98.440,P<0.05);不同病情患儿的血清GH、8-OHdG、HMGB1水平及MRI评分差异存在统计学意义,进一步两两比较,患儿的血清GH、HMGB1水平从高到低依次为轻度组、中度组及重度组,8-OHdG及MRI评分从高到低依次为重度组、中度组及轻度组(F值分别为13.055、13.150、12.710、14.205,P<0.05);不同MRI评分患儿血清GH、8-OHdG、HMGB1水平差异存在统计学意义,进一步两两比较,患儿的血清GH、HMGB1水平从高到低依次为0~3分组、4~7分及8~10分组,8-OHdG从高到低依次为8~10分组、4~7分组及0~3分组(F值分别为15.432、13.674、19.076,P<0.05);相关性分析结果显示,患儿的临床分度、MRI评分与GH、HMGB1呈负相关性(r值分别为-0.738、-0.666,-0.579、-0.671,P<0.05),与8-OHdG呈正相关性(r值分别为0.617、0.690,P<0.05)。结论 血清GH、8-OHdG、HMGB1与新生儿缺氧缺血性脑病临床分度呈现显著相关性,可作为临床诊断的重要依据。

急性缺血性脑卒中患者血清TIMP-1 HIF-1α水平与梗死灶体积及病情严重程度的关系

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平与梗死灶体积及病情严重程度的关系。方法对168例AIS患者(研究组)和97名健康体检者(对照组)的临床资料进行回顾性分析。比较两组受试者基线资料、及血清TIMP-1、HIF-1α水平。分析AIS患者血清TIMP-1、HIF-1α水平与血压、血脂和血清hs-CRP、Hcy水平的相关性;比较不同梗死灶体积、病情严重程度AIS患者血清TIMP-1、HIF-1α水平;采用Spearman相关性分析探讨AIS患者发病1 d血清TIMP-1、HIF-1α水平与梗死灶体积及病情严重程度的相关性。结果研究组受试者收缩压、舒张压及总胆固醇、三酰甘油、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、同型半胱氨酸(Hcy)、TIMP-1、HIF-1α水平均高于对照组(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇水平低于对照组(P<0.01)。AIS患者血清TIMP-1与hs-CRP、Hcy水平呈显著正相关(P<0.01),血清HIF-1α与三酰甘油水平呈显著负相关(P<0.01)。随着发病时间延长,不同梗死灶体积、不同病情严重程度AIS患者血清TIMP-1、HIF-1α水平逐渐降低,不同梗死灶体积、不同病情严重程度患者两两比较,差异均有统计学意义(P<0.01);随着梗死灶体积增加、病情严重程度的加重,AIS患者血清TIMP-1、HIF-1α水平逐渐升高,不同梗死灶体积、不同病情严重程度患者两两比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。发病1 d,AIS患者血清TIM P-1、HIF-1α水平与梗死灶体积、NIHSS评分均呈显著正相关(P<0.01)。结论AIS患者血清TIMP-1、HIF-1α水平随着发病时间延长不断升高,且与梗死灶体积及病情严重程度有关,可作为早期诊断AIS的血清生化标志物和治疗新靶点,临床应用价值高。

左卡尼汀联合胞二磷胆碱对新生儿缺氧缺血性脑病的疗效及血清NO、ET-1的影响

目的 探讨左卡尼汀联合胞二磷胆碱对新生儿缺氧缺血性脑病(NHIE)的疗效及血清一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)的影响。方法 选取2020年4月至2023年1月该院收治的95例NHIE患儿,采用随机数字表法将其分为观察组(47例)和对照组(48例)。对照组给予胞二磷胆碱治疗,观察组给予胞二磷胆碱联合左卡尼汀治疗。治疗14 d后评估患儿疗效,统计患儿原始反射、肌张力及意识的恢复时间。检测患儿治疗前、治疗14 d后的氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]及血管内皮功能指标(NO、ET-1)水平,采用新生儿神经行为评分(NBNA)评估患儿神经功能水平,并观察治疗方案的安全性,采用Pearson相关性分析NBNA与血管内皮功能指标的相关性。结果 观察组治疗总有效率为91.49%,高于对照组的72.92%(P<0.05);观察组原始反射恢复时间、肌张力恢复时间及意识恢复时间较对照组均缩短(P<0.05);治疗前两组NBNA得分差异无统计学意义(t=1.225,P=0.224),治疗后观察组NBNA得分高于对照组(t=6.223,P<0.001);治疗后,两组MDA水平降低,SOD水平升高(P<0.05),观察组治疗后MDA水平低于对照组,SOD水平高于对照组(P<0.05);治疗后,两组NO、ET-1水平均降低(P<0.05),观察组治疗后NO、ET-1水平低于对照组(P<0.05);观察组、对照组药物不良反应率分别为17.02%、8.33%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);Pearson相关性分析显示,NHIE患儿血清NO、ET-1与NBNA得分均呈负相关(r=-0.546、-0.608,P<0.05)。结论 左卡尼汀联合胞二磷胆碱能够提高NHIE的疗效,缩短临床表现恢复时间,改善神经功能、氧化应激反应、血管内皮功能,不会增加药物不良反应,且血管内皮功能指标与NBNA得分均呈负相关,可作为判断NHIE病情的辅助参考指标。

颅脑超声检测大脑中动脉、豆纹动脉血流参数在评估缺氧缺血性脑病新生儿病情中的应用价值

目的:探究颅脑超声检测大脑中动脉、豆纹动脉血流参数在评估缺氧缺血性脑病新生儿病情中的应用价值。方法:分别从2021年3月至2023年5月在本院确诊的缺氧缺血性脑病新生儿和健康新生儿中各抽取60例作为本研究对象,并分别命名为病例组和对照组,两组出生后24h、48h及72h均接受颅脑超声检测,获取大脑中动脉、豆纹动脉血流参数,并将病例组按照病情严重程度分为轻度组、中度组和重度组,应用ROC曲线分析大脑中动脉、豆纹动脉血流参数对缺氧缺血性脑病和评估缺氧缺血性脑病病情严重度的诊断效能。结果:病例组出生后24h、48h及72h大脑中动脉和豆纹动脉的收缩期血流峰值速度和舒张末期血流速度低于对照组,阻力指数高于对照组(P<0.05);病例组不同病情严重度患儿出生后24h、48h及72h大脑中动脉和豆纹动脉的收缩期血流峰值速度、舒张末期血流速度和阻力指数组间差异具有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析发现,大脑中动脉和豆纹动脉的血流参数诊断缺氧缺血性脑病和评估缺氧缺血性脑病病情严重度的效能良好(P<0.05)。结论:颅脑超声检测大脑中动脉、豆纹动脉血流参数在新生儿缺氧缺血性脑病诊断和病情严重度评估中具有良好的诊断效能,可作为评估新生儿神经行为发育异常的依据。

缺氧诱导因子-1α基因多态性与急性缺血性脑卒中遗传易感性研究

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因C1772T位点及G1790A位点基因多肽性与急性缺血性脑卒中(AIS)的遗传易感性。方法选取2020年7月至2022年12月在玉林市中医医院就诊的AIS患者154例作为AIS组,选取同期体检健康者154名作为对照组,比较两组的两个位点基因型和等位基因的分布频率,分析两个位点单核苷酸多态性与AIS遗传易感性的关系。结果对照组男、女性别间及两组男性间HIF-1α-C1772T位点的基因型及等位基因分布频率,差异有统计学意义(P<0.05)。两组性别间G1790A位点的基因型及等位基因分布频率,差异无统计学意义(P>0.05)。二元logistic回归分析结果显示,C1772T位点的CT基因型与AIS患病风险无关(P>0.05),而T等位基因是AIS患病的保护因素(OR=0.527,P<0.05)。G1790A位点的GA基因型与AIS患病风险无关(P>0.05),而A等位基因是AIS患病的保护因素(OR=0.741,P<0.05)。结论HIF-1α的C1772T基因型及两个位点的T、A等位基因与AIS遗传易感性密切相关,而G1790A位点的基因型与AIS患病风险无关。

缺氧诱导因子-1α通过调控MDA和SOD抑制急性缺血性脑卒中小胶质细胞焦亡的体外实验研究

目的体外实验探究缺氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)调控丙二醛(malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)对急性期缺血性脑卒中小胶质细胞(BV2)焦亡的调节作用及机制。方法构建小胶质细胞急性期氧糖剥夺复氧模型(OGD/R),应用CCK-8法确定模型最佳干预时机。对HIF-1α进行稳定剂GF-4592过表达和HIF-1α小分子干扰RNA(HIF-1α-siRNA)抑制表达,分为空白组(A组)、OGD/R模型组(B组)、OGD/R+FG-4592干预组(C组)、OGD/R+siRNA阴性对照组(D组)、OGD/R+HIF-1α-siRNA组(E组)。通过CCK-8法检测5组细胞增殖情况,流式细胞技术检测细胞焦亡情况。ELISA检测MDA、SOD、细胞上清IL-18、IL-1β水平。Western blot法检测不同组HIF-1α、GSDMD-D、GSDMD-N、cle-Caspase-1和NLRP3蛋白表达水平。结果确定缺氧6 h复氧12 h为最佳干预时间。与B组和D组比较,C组细胞增殖升高,细胞焦亡降低,MAD、SOD、IL-18、IL-1β水平显著降低,GSDMD-D、GSDMD-N、cle-Caspase-1和NLRP3靶蛋白的表达水平明显降低(P<0.05);而E组细胞增殖降低,细胞焦亡增加,MAD、SOD、IL-18,IL-1β,GSDMD-D、GSDMD-N、cle-Caspase-1和NLRP3靶蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论HIF-1α因子能有效调控小胶质细胞焦亡。HIF-1α可能通过调控MDA和SOD抑制急性缺血性脑卒中小胶质细胞焦亡。

依达拉奉右莰醇对于早期缺血性脑卒中患者血清HIF-1α与IL-6表达水平的影响

目的:探讨依达拉奉右崁醇对早期缺血性脑卒中患者血清缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、白细胞介素6(IL-6)表达水平的影响。方法:选取98例缺血性脑卒中患者为研究对象,按照治疗方式不同分成对照组与观察组,每组各49例。对照组予以常规治疗;观察组采用联合依达拉奉右崁醇治疗,共治疗14 d。于治疗前、治疗后1、3、7、14 d检测并比较两组患者血清HIF-1α、IL-6水平。结果:观察组治疗总有效率高于对照组(P<0.05);治疗前,两组患者血清HIF-1α、IL-6水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后1、3、7、14 d,两组患者血清HIF-1α、IL-6水平均下降,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后30 d,两组患者血清HIF-1α水平均上升,血清IL-6水平无统计学差异(P>0.05),但观察组患者血清HIF-1α水平高于对照组,血清IL-6水平低于对照组(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:依达拉奉右崁醇对早期缺血性脑卒中患者疗效较好,能调节患者血清HIF-1α、IL-6表达水平,且安全性较好。

血清sLOX-1、VILIP-1和脑红蛋白在新生儿缺氧缺血性脑病病情和预后判断中的价值

目的探讨血清可溶性血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、视锥蛋白样蛋白-1(VILIP-1)和脑红蛋白在新生儿缺氧缺血性脑病病情和预后判断中的临床价值。方法选择2019年1月至2021年12月该院收治的135例新生儿缺氧缺血性脑病患儿纳入观察组。选择同期在该院体检的75例健康足月新生儿纳入对照组。观察两组血清sLOX-1、VILIP-1和脑红蛋白水平变化,分析血清sLOX-1、VILIP-1和脑红蛋白水平与新生儿缺氧缺血性脑病严重程度的关系,对临床指标与患儿预后的关系进行单因素和多因素分析,探讨血清sLOX-1、VILIP-1和脑红蛋白预测患儿发生预后不良的价值。结果观察组的血清sLOX-1、VILIP-1和脑红蛋白水平明显高于对照组(P<0.01)。血清sLOX-1、VILIP-1和脑红蛋白水平随着疾病严重程度的升高而升高(P<0.01)。新生儿缺氧缺血性脑病患儿的预后不良与Apgar评分、开始治疗日龄、sLOX-1、VILIP-1和脑红蛋白水平有关(P<0.01),而与性别、孕周、日龄、胎龄、生产方式、出生时体质量、体温、心率、脐带异常,以及母体贫血、妊娠期糖尿病和妊娠期高血压无关(P>0.05)。多因素分析发现,血清sLOX-1>888.02 ng/L、VILIP-1>0.83μg/L和脑红蛋白>24.22 pg/mL是新生儿缺氧缺血性脑病患儿预后不良的独立危险因素(P<0.01)。血清sLOX-1、VILIP-1和脑红蛋白水平在预测新生儿缺氧缺血性脑病预后不良方面具有较高的价值,联合检测的灵敏度为96.9%,特异度为86.4%,曲线下面积(AUC)为0.971,明显高于sLOX-1(Z=2.289,P=0.022)、VILIP-1(Z=2.635,P=0.008)和脑红蛋白(Z=3.263,P=0.001)单项指标检测,而3项指标之间的AUC差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清sLOX-1、VILIP-1和脑红蛋白水平与新生儿缺氧缺血性脑病的严重程度有密切联系,是患儿预后不良的独立危险因素,在预测预后不良方面具有较高的效能。

新生儿缺氧缺血性脑病血清miR-384与炎症反应、神经行为的相关分析

目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)血清微小分子核糖核酸-384(miR-384)表达水平与炎症反应、辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)失衡及神经行为的相关性。方法 选择2015年10月至2020年10月唐山市妇幼保健院收治的106例HIE患儿为HIE组,另选取同期同院产科分娩的90例健康新生儿为对照组。参考HIE分度标准将患儿分成轻、中、重度组,比较各组血清miR-384、白介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Treg、Th17、Th17/Treg与新生儿神经行为量表(NBNA)评分。经Pearson线性相关分析HIE患儿血清miR-384与炎症因子、Treg、Th17、Th17/Treg、NBNA评分的相关性。结果 HIE组血清miR-384、Treg水平及NBNA评分低于对照组,Th17、Th17/Treg、IL-6、CRP、TNF-α水平高于对照组,差异均有统计学意义(t值介于-21.533~30.802之间,P<0.05);HIE轻、中、重度组血清miR-384、Treg水平及NBNA评分均依次降低,Th17、Th17/Treg、IL-6、CRP、TNF-α水平均依次升高,差异有统计学意义(F值介于82.368~513.891之间,P<0.05);HIE患儿血清miR-384与IL-6、CRP、TNF-α、Th17、Th17/Treg呈负相关(r值介于-0.867~-0.406之间,P<0.05),与Treg、NBNA评分呈正相关(r值分别为0.671、0.776,P<0.05)。结论 HIE患儿病情越重,miR-384水平下降越明显;miR-384表达与患儿的炎症反应、Th17/Treg免疫平衡及神经行为能力密切相关。

基于HIF-1α/VEGF通路探讨土家族麝针疗法“活血生新”干预缺血性脑卒中大鼠的作用机制

目的 探讨土家族麝针疗法对缺血性脑卒中大鼠运动功能的康复作用,分析缺氧诱导因子(HIF)-1α/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路在缺血性脑卒中发生、发展和转归中的作用机制。方法 采用改良线栓法复制缺血性脑中风大鼠模型。筛选Zea-longa评分为1~3分的大鼠,随机分为模型组、土家族麝针组、针刺组,另设立假手术组,每组15只,土家族麝针组以自制麝针刺激大鼠对侧头皮运动区肌层;针刺组以普通针灸同法治疗,持续治疗3个疗程。假手术组和模型组不做任何处理。在治疗前和每个疗程治疗结束后,每组随机选取6只大鼠进行平衡木实验检测其神经运动功能变化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中的VEGF和HIF-1α含量;Western印迹检测海马中VEGF受体(VEGFR)2与酪氨酸蛋白激酶家族成员(Src)蛋白的表达。结果 治疗前,与假手术组相比,模型组、土家族麝针组和针刺组运动功能明显降低,血浆中VEGF和HIF-1α含量明显增高(P<0.05);治疗3个疗程后,与模型组比较,麝针组和针刺组的运动功能明显提高,血浆中HIF-1α和VEGF含量明显升高,大鼠海马中VEGFR2相对表达量明显升高,Src蛋白相对表达量明显降低(P<0.05);与针刺组相比,麝针组神经运动功能恢复明显较好,血浆中VEGF和HIF-1α含量明显高于针刺组(P<0.05)。麝针组海马中VEGFR2相对表达明显升高,Src蛋白相对表达明显降低(P<0.05)。结论 土家族麝针疗法对缺血性脑卒中所致运动功能障碍的康复有明显促进作用,可能是通过调节HIF-1α/VEGF信号通路以“活血化瘀生新”而实现的。

IL-37在新生儿缺氧缺血性脑病中的表达及意义

目的 探讨白细胞介素(IL)-37在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的表达及意义。方法 选取在滨海县人民医院新生儿科住院的45例新生儿HIE患儿参与该项研究,其中轻度16例(HIE-1组),中度15例(HIE-2组),重度14例(HIE-3组),同时选择同期足月健康新生儿15例作为对照组(HC组)。采用Luminex 200液相芯片仪检测各组血清细胞因子IL-37、IL-18、IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;体外通过脂多糖(LPS)刺激培养人脑微血管内皮细胞(HBMEC),分为空白对照组、LPS刺激组和IL-37+LPS组,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组HBMEC培养上清液中IL-18 mRNA、IL-1β mRNA、IL-6 mRNA及TNF-α mRNA表达水平。结果 与HC组相比,HIE-2组、HIE-3组患儿血清IL-37水平降低(P<0.05),HIE-3组降低更为明显(P<0.05)。与HC组相比,HIE-2组、HIE-3组患儿血清IL-18、IL-1β、IL-6及TNF-α水平升高(P<0.05),且HIE-3组升高更为明显(P<0.05)。新生儿HIE患儿血清IL-37水平与血清IL-18(r=-0.465 2,P=0.001 3)、IL-6(r=-0.338 4,P=0.023 0)、TNF-α(r=-0.319 9,P=0.032 2)、IL-1β(r=-0.358 8,P=0.015 5)水平均呈负相关。体外实验显示,与空白组[(2.15±1.17)%]相比,LPS刺激组HBMEC凋亡率[(9.43±3.25)%]增加(P<0.05);与LPS刺激组相比,IL-37+LPS刺激组HBMEC凋亡率[(4.08±2.41)%]降低(P<0.05)。与空白组相比,LPS刺激组HBMEC中IL-18 mRNA、IL-6 mRNA、TNF-α mRNA和IL-1β mRNA表达水平明显升高(P<0.05);与LPS刺激组相比,IL-37+LPS刺激组IL-18 mRNA、IL-6 mRNA、TNF-α mRNA和IL-1β mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论 IL-37可能通过降低促炎性细胞因子IL-18、IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,减轻HIE过程中的炎症反应。

水通道蛋白-4与缺氧缺血性脑病患儿严重程度的相关性及对预后的评估价值

目的探讨水通道蛋白-4(AQP4)与缺氧缺血性脑病(HIE)患儿严重程度的相关性及对预后的评估价值。方法选取2019年6月—2021年5月武汉市第一医院收治的137例HIE患儿为研究对象。依据影像学检查结果,将HIE患儿分为轻度组、中度组和重度组,分别有75例、37例和25例。比较不同严重程度HIE患儿脑脊液AQP4水平。统计HIE患儿28 d生存情况,依据患儿是否存活分为死亡组和生存组,分别有34例和103例。比较死亡组和存活组HIE患儿的临床资料。多因素Logistic回归分析影响HIE患儿预后的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析脑脊液AQP4水平对HIE患儿预后的评估价值。结果重度组脑脊液AQP4水平较中度组、轻度组高,中度组较轻度组高(P<0.05)。死亡组与存活组患儿性别、分娩孕周、日龄、分娩方式、出生时体重、胆固醇、白蛋白、血尿素、脐带异常、母体贫血比较,差异无统计学意义(P>0.05),死亡组Apgar评分低于存活组,开始治疗日龄长于存活组,重度病情程度占比、C反应蛋白、白细胞介素-8、肿瘤坏死因子-α及AQP4水平高于存活组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示:开始治疗日龄[OR=2.907(95%CI:1.049,3.758)]、病情程度为重度[OR=3.843(95%CI:1.853,8.027)]、AQP4[OR=4.175(95%CI:2.146,10.482)]是导致HIE患儿死亡的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,脑脊液AQP4水平对HIE患儿预后评估的最佳截断值为21.07 g/L,敏感性、特异性及AUC分别为76.47%(95%CI:58.43,88.62)、58.44%(95%CI:76.80,91.35)、0.821(95%CI:0.747,0.881)。结论脑脊液AQP4水平与HIE患儿的病情严重程度及预后有关,且脑脊液AQP4水平对HIE患儿预后的评估效能良好。

白细胞介素-11及其受体在新生缺氧缺血性脑病大鼠模型中的表达

目的探讨白细胞介素-11(IL-11)和IL-11受体蛋白(IL-11Rα)在缺氧缺血性脑病(HIE)新生大鼠模型中的表达。方法7日龄Sprague-Dawley新生大鼠分为假手术组(Sham组9只)和模型组(HIE组21只),HIE组行右颈动脉结扎、8%O2+92%N2的低氧环境缺氧2 h建立HIE模型,Sham组不结扎和不缺氧;造模48 h后观取两组各6只大鼠观察翻正反射、负趋地性试验和Longa评分等短期行为学表现,之后麻醉处死大鼠取脑组织HE染色、观察大鼠大脑皮层及海马组织学改变;于造模后6 h取Sham组3只大鼠,HIE组于造模后6、12、24、48、72 h时各取3只大鼠取脑组织,采用免疫印迹(Western blot)法IL-11、IL-11Rα和糖蛋白130(GP130)的表达。结果与Sham组比较,HIE组大鼠翻正反射、负趋地性试验时间显著延长(P<0.01),Longa评分升高;与Sham组比较,HIE组大鼠脑干组织结构不清晰、脑细胞丢失、海马和皮层细胞坏死严重;HIE模型大鼠脑组织IL-11的表达呈现先降低后升高,与Sham组比较,在72 h时差异有统计学意义(P<0.05);IL-11Rα和GP130的表达趋势为先增后减,与Sham组比较,IL-11Rα和GP130在24 h时明显升高(P<0.01或P<0.01)。结论HIE模型新生大鼠神经功能缺损,脑组织损伤明显,内源性IL-11及其受体可能参与新生大鼠缺氧缺血性脑损伤疾病的发生及发展过程。

脑络欣通抗缺血性脑卒中后脂质过氧化和对线粒体损伤的保护作用研究

目的 探究脑络欣通抗缺血性脑卒中后脂质过氧化损伤和对线粒体损伤的保护作用。方法 取SPF级雄性SD大鼠采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,按照Zea Longa评分标准进行神经功能评分。将评分2~3分的模型动物随机分为模型组,脑络欣通低、中、高剂量组,另设正常组和假手术组。造模24 h后开始灌胃给药,早晚各一次,连续7 d,正常组和假手术组灌胃生理盐水。观察脑络欣通对大鼠生活状态、体重、神经功能评分、脑组织病理学、脂质过氧化物(LPO)含量、4-羟基烯醛(4-HNE)水平、线粒体形态结构和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响。结果 与模型组相比,脑络欣通可提高大鼠生活质量,增加大鼠体重,提高神经功能评分,减少LPO、4-HNE、HIF-1α的累积,并对脑组织病理学损伤和线粒体结构有一定的保护作用。结论 脑络欣通可以通过抑制缺血性脑卒中后的脂质过氧化以及保护线粒体损伤从而发挥神经保护作用。

血清25-羟基维生素D、Th17/Treg细胞失衡与新生儿缺氧缺血性脑病预后的相关性研究

目的:探究缺氧缺血性脑病(HIE)患儿血清25-羟基维生素D[25(OH)D]及Th17/Treg细胞水平的变化及其与患儿预后的关系。方法:选取2019-01-2021-01本院收治的79例HIE患儿(HIE组),根据临床分度分为中度组(46例)和重度组(33例);根据HIE组患儿神经发育随访情况将其分为神经发育正常组(52例)和不良神经发育组(27例)。选取同时期本院健康新生儿79例为对照组。利用流式细胞术检测外周血中Treg细胞比率、Th17细胞比率并计算Th1/Th17细胞比率;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中25(OH)D、白细胞介素(IL)-17、IL-23及IL-10和转化生长因子-β(TGF-β)水平。Cox风险比例回归模型评估HIE患儿预后不良的影响因素;采用Pearson法分析Th17/Treg与25(OH)D之间的相关性。结果:与对照组相比,HIE组血清中IL-17、IL-23水平、Th17细胞比率及Th17/Treg细胞比率较高(P<0.05),25(OH)D、IL-10、TGF-β水平、Treg细胞比率较低(P<0.05);与中度组相比,重度组血清中IL-17、IL-23水平、Th17细胞比率及Th17/Treg细胞比率较高(P<0.05),25(OH)D、IL-10、TGF-β水平、Treg细胞比率较低(P<0.05);与中度组相比,重度组入院时、治疗14天后的NBNA评分较低(P<0.05)。与神经发育正常组相比,不良神经发育组入院时、治疗14天后的NBNA评分较低(P<0.05);血清中IL-17、IL-23水平、Th17细胞比率及Th17/Treg细胞比率较高(P<0.05),25(OH)D、IL-10、TGF-β水平、Treg细胞比率较低(P<0.05)。多因素Cox分析显示,低水平25(OH)D、Th17/Treg细胞失衡是影响HIE患儿不良预后的危险因素(P<0.05)。HIE患儿Th17/Treg与25(OH)D负相关(r=-0.680,P<0.05)。结论:HIE患儿血清25(OH)D呈低表达,外周血单个核细胞Th17/Treg细胞比率存在免疫失衡,25(OH)D缺乏和Th17/Treg细胞失衡可能与HIE预后不良有关。