孕晚期妊娠期高血压患者血清串珠素、神经纤毛蛋白-1水平与病情、围生结局的关系

目的 探讨孕晚期妊娠期高血压患者血清串珠素(perlecan)、神经纤毛蛋白-1(NRP-1)水平与病情、围生结局的关系。方法 将2021年1月至2023年1月该院收治的103例孕晚期妊娠期高血压患者作为研究对象,根据病情严重程度将其分为单纯高血压组46例、轻度子痫组35例、重度子痫组22例。记录患者的围生结局情况,分为结局良好组72例和结局不良组31例。采用酶联免疫吸附试验法检测血清perlecan、NRP-1水平,采用受试者工作特性(ROC)曲线分析探讨血清perlecan、NRP-1对孕晚期妊娠期高血压患者围生结局的预测价值,采用多因素Logistic回归分析探讨孕晚期妊娠期高血压患者围生结局的影响因素。结果 轻度子痫组、重度子痫组血清perlecan、NRP-1水平低于单纯高血压组,差异有统计学意义(P<0.05);重度子痫组血清perlecan、NRP-1水平低于轻度子痫组,差异有统计学意义(P<0.05)。结局良好组血清perlecan、NRP-1水平高于结局不良组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清perlecan、NRP-1两项指标联合预测孕晚期妊娠期高血压患者围生结局的临床效能优于单项指标预测。结局不良组年龄≥35岁占比、孕前体重指数(BMI)≥24 kg/m2占比、有流产史占比、收缩压、舒张压、24 h尿蛋白高于结局良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,孕前BMI≥24 kg/m2、有流产史、收缩压高、perlecan≤8.63 nmol/L、NRP-1≤4.37 ng/mL是孕晚期妊娠期高血压患者不良围生结局的独立危险因素(P<0.05)。结论 血清perlecan、NRP-1水平降低与孕晚期妊娠期高血压患者的病情加重及不良围生结局有关,两项指标可作为预测患者围生结局的生物学标志物。

发酵蔬菜来源具抑菌活性明串珠菌的筛选及其细菌素基因簇挖掘

为提高发酵蔬菜的安全性和保藏性,从来自云南传统发酵蔬菜的8株明串珠菌中筛选出1株对食源性致病菌和引起泡菜过酸化的细菌抑制效果好的肠膜明串珠菌AP7。通过排除酸和H2O2影响及蛋白酶敏感性确定AP7的主要抑菌物质,分析其酸稳定性和热稳定性,根据AP7的全基因组序列挖掘潜在的细菌素基因簇。结果表明:排除酸及H2O2的影响后,菌株的发酵上清液仍具有明显抑菌活性,经蛋白酶处理后,抑菌效果明显下降,推测AP7发酵上清液浓缩液中的抑菌物质为细菌素;该细菌素对pH变化敏感,热稳定性高,分子质量在6.51~14.4 kDa;全基因组测序表明,菌株AP7全基因组包含1条染色体(1948310 bp)和2个质粒(37366和20698 bp),GC含量37.7%;存在1个以Enterocin_X_chain_beta细菌素为核心的基因簇,其编码产物预测为带正电的亲水性稳定蛋白,二级结构以α-螺旋为主,三级结构主要由两端松散肽链和中间α-螺旋构成。综上,产细菌素的肠膜明串珠菌AP7具有优良抑菌性能,有潜力应用于酸性食品的发酵和防腐。

肠膜明串珠菌产细菌素最适发酵条件的筛选

为获得肠膜明串珠菌产细菌素的最佳发酵条件,采用琼脂扩散法测定发酵液对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌的抑菌活性,结果发现:产细菌素的最佳培养基是MRS培养基,最适起始pH值为6.4,最适接种的体积分数和接种种龄分别为3%和24 h,产细菌素最适发酵温度和时间分别为30℃和24 h.通过优化发酵条件提高了细菌素的产量.

串珠素表达下调参与低氧对大鼠心肌微血管内皮细胞增殖的抑制作用

低氧可以抑制内皮细胞增殖,但是其机理目前尚不清楚。串珠素在调节内皮细胞增殖中发挥着重要作用。为了探讨串珠素是否参与低氧对内皮细胞增殖的抑制,将大鼠心肌微血管内皮细胞在低氧或常氧状态下培养12 h后,用实时定量RT-PCR方法检测串珠素mRNA的表达。结果发现:低氧可以明显抑制串珠素mRNA的表达,与常氧状态下串珠素mRNA表达水平比较,差异显著(P<0．05)。与此同时,低氧状态下或用串珠素抗体中和内源性串珠素,内皮细胞的增殖和对成纤维细胞生长因子的反应明显降低,粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)表达和细胞外信号调节激酶1／2(extracellular signal- regulated kinase,ERK1／2)活性明显下降。结果提示,串珠素表达下调可能通过抑制FAK介导的ERK1/2依赖的信号转导途径,参与低氧对大鼠心肌微血管内皮细胞增殖的抑制作用。

串珠素小干扰RNA对结直肠癌细胞增殖的影响

目的评估串珠素小干扰RNA(siRNA)对肿瘤细胞增殖的影响。方法体外培养HCT15和HT29结直肠癌细胞,将构建好的串珠素siRNA载体转染培养细胞中,荧光显微镜下观察转染效率,qRT-PCR法检测串珠素mRNA表达,Western blot法检测串珠素蛋白表达,MTS法检测串珠素siRNA对肿瘤细胞增殖的影响。结果串珠素siRNA转染肿瘤细胞48 h后,肿瘤细胞串珠素mRNA、蛋白水平均出现降低(P<0.05)。串珠素siRNA对肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.01)。结论串珠素siRNA对结直肠癌肿瘤细胞增殖具有显著的抑制效果。

氧诱导小鼠视网膜新生血管发生中乙酰肝素酶及串珠素的表达

目的研究小鼠视网膜新生血管发生过程中乙酰肝素酶(HPA)及其作用底物串珠素在视网膜中的表达。方法将65只新生幼鼠于生后7d在体积分数(75±2)%高氧环境中饲养5d后,再置于相对低氧环境中诱导产生视网膜新生血管为高氧诱导组。另外65只新生幼鼠在正常环境中饲养作为正常对照组。分别在小鼠生后第12、13、17、21、30天通过荧光素眼底血管造影(FFA)和视网膜病理切片观察视网膜新生血管的形态变化。通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测不同时间点视网膜组织中HPA和串珠素在mRNA水平的变化,Western blot检测不同时间点视网膜组织中HPA在蛋白水平的表达变化。结果高氧诱导组与正常对照组的HPA mRNA表达水平差异有统计学意义(Fgroup=16.303,P=0.000),各时间点的HPAmRNA表达水平差异有统计学意义(Ftime=18.614,P=0.000),生后第12、13、17、21天相应时间点2组小鼠视网膜HPAmRNA的表达水平差异均有统计学意义(P=0.001,P=0.000,P=0.000,P=0.001)。高氧诱导组与正常对照组HPA蛋白表达水平差异有统计学意义(Fgroup=458.134,P=0.000),各时间点的HPA蛋白表达水平差异有统计学意义(Ftime=78.466,P=0.000)。高氧诱导组与正常对照组的串珠素mRNA表达水平差异有统计学意义(Fgroup=7.351,P=0.013),各时间点的串珠素mRNA表达水平差异有统计学意义(Ftime=9.098,P=0.000)。生后第13、17、21天的高氧诱导组小鼠视网膜串珠素mRNA的表达水平与正常对照组相应时间点,差异均有统计学意义(P=0.048,P=0.000,P=0.003)。伴随着视网膜新生血管的增多和消退,HPA在基因和蛋白水平及串珠素在基因水平的表达均呈先升高后降低的趋势。结论HPA及其作用底物可能是促进视网膜新生血管生长的重要因素。

串珠素的生理与病理生理作用

串珠素 (perlecan)是细胞外基质中主要的蛋白聚糖之一 ,由核心蛋白和硫酸肝素侧链组成 ,可以通过调节生长因子的结合和活性影响血管壁细胞的增殖、迁移 ,并影响细胞与基质的粘附 ,在机体心血管和软骨发育。

串珠镰刀菌孢子表面的一种凝集素

用 0 .2 %SDS磷酸缓冲液从串珠镰刀菌 (Fusariummoniliforme)孢子表面抽提蛋白质。孢子表面蛋白经DEAE Sepharose阴离子交换柱层析和SephacrylS 10 0分子筛柱层析 ,分离和纯化了一种凝集素。该凝集素的分子量为 70kDa ,糖含量为 19.8% ,对兔血红细胞有很强的凝集活性 ,凝集活性被半乳糖特异性地抑制。

串珠素对bFGF诱导的心肌微血管内皮细胞增殖的影响

目的观察串珠素对bFGF诱导的心肌微血管内皮细胞增殖的影响。方法分离并培养SD大鼠心肌微血管内皮细胞,经VIII因子相关抗原抗体鉴定和常规处理后,随机分为对照组、bFGF组、缺氧组、缺氧+bFGF组、PD98059组和串珠素阻断组,以[3H]-TdR掺入法测定内皮细胞增殖反应。结果缺氧+bFGF组内皮细胞[3H]-TdR掺入率较对照组和bFGF组明显升高,是对照组的11.12倍(P<0.05),bFGF组的4.05倍(P<0.05),表明串珠素和bFGF联合作用可以明显刺激内皮细胞增殖,这种联合作用较单独的串珠素或bFGF作用明显;PD98059组内皮细胞[3H]-TdR掺入率较缺氧+bF-GF组下降了93.40%(P<0.05),表明PD98059可以抑制串珠素与bFGF对内皮细胞的增殖作用。结论串珠素可以增强bFGF对心肌微血管内皮细胞的增殖作用,ERK介导了串珠素对bFGF的作用。

串珠素在血管损伤反应过程中作用的研究进展

串珠素是组成血管壁的主要硫酸肝素蛋白多糖。许多研究表明,它在血管损伤反应过程中对平滑肌细胞、内皮细胞以及一些生长因子都有一定的特殊作用。本文就串珠素在血管损伤反应过程中的作用作一综述。

串珠素对大鼠平滑肌细胞增殖的影响及其机制的研究

目的观察串珠素对于大鼠血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)增殖反应的影响以及细胞信号转导机制。方法以3H-TdR掺入法测定VSMCs增殖,Westernblot方法检测FAK表达。结果Perlecan加强碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)引起的VSMCs增殖反应,并诱导粘着斑激酶(focaladhesionkinase,FAK)表达上调。Perlecan抗体消除Perle-can促进bFGF致VSMCs增殖反应,并抑制FAK表达。结论串珠素增强bFGF致大鼠平滑肌细胞的增殖反应,其机制涉及FAK表达上调。

串珠素在骨骼肌神经支配恢复过程中的作用

串珠素(perlecan)是硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparan sulphate proteoglycan,HSPG)家族中的一种,作为一种蛋白多糖,它广泛分布于细胞膜与细胞外基质中。许多研究表明,串珠素广泛参与上皮生长粘附、运动终板的恢复以及软骨的形成。本文就串珠素在骨骼肌神经支配恢复过程的作用作一综述。

串珠素在大鼠牙髓损伤修复过程中的时空表达

目的:研究大鼠牙髓损伤修复过程中串珠素的时空表达变化及作用机制。方法 :选用24只雄性SD大鼠,通过暴露一侧大鼠上颌磨牙牙髓建立牙髓损伤模型,对侧未损伤磨牙作为对照组,术后1、3、5、7 d取标本,脱钙后石蜡包埋,近远中向沿牙体长轴4μm切片,采用免疫组织化学染色观察串珠素和β1整合素的表达变化,平均吸光度法计算相对表达量,采用SPSS19.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果:与对照组相比,实验组串珠素染色强度增加,阳性染色位置随着炎症损伤的进展方向而转移,各组平均光密度均高于对照组(F=9.511,P<0.05),并以1 d组升高最为明显。β1整合素染色在牙髓损伤后3 d开始,在炎症牙髓和相对正常牙髓中阳性表达,3、5、7 d组的平均吸光度均显著高于对照组(F=124.18,P<0.05)。结论:串珠素在牙髓组织损伤后防御机制中可能通过调节血管生成和炎症细胞浸润而发挥作用。

串珠素在咀嚼肌中的表达及意义

目的通过对串珠素核心蛋白多克隆抗体的研究,探讨串珠素在咀嚼肌中的表达特点。方法将串珠素片段插入到pET32a表达载体中,经EcoR I+Sal I酶切鉴定后将正确的质粒转化DH5α大肠杆菌,挑克隆后接种于新鲜LB中。对数培养后经聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白免疫印迹技术检测融合蛋白的表达,并通过免疫组化检测串珠素在咀嚼肌中的表达。结果聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示在IPTG诱导组出现明显的蛋白表达,而未经IPTG诱导的大肠杆菌及pET32a空载体均未见表达条带。蛋白免疫印迹结果亦显示插入pET32a载体的序列表达成功。免疫组化示串珠素在咀嚼肌中有显著表达,在肌膜处呈带状聚集。结论分子克隆技术可以对串珠素进行扩增,不同品系的串珠素蛋白间有交叉免疫原性,串珠素在咀嚼肌肌纤维中有广泛分布。

大鼠骨骼肌失神经支配后串珠素和突触素表达的变化

目的:研究串珠素在骨骼肌失神经支配后的表达和神经肌接头的变化。方法:成年SD大鼠30只,左侧坐骨神经切断,右侧正常对照。术后1、2、4周取材。免疫组化检测腓肠肌中串珠素和突触素表达,图像分析表达水平。结果:所有受试大鼠坐骨神经切断后相关肌肉进行性萎缩。神经切断4周后骨骼肌串珠素的表达显著降低(P<0.05),突触素表达也下降,但差异无统计学意义。结论:串珠素在骨骼肌失神经后的表达变化比突触素更明显。

串珠素在大鼠牙髓损伤修复过程中表达变化的实验研究

目的:探讨串珠素在牙髓损伤修复过程中的表达变化及其可能的作用。方法:取雄性SD大鼠48只,随机分为4组(n=12)。建立大鼠一侧上颌第一磨牙牙髓损伤模型,另一侧同名牙作为正常对照组;分别于损伤后1、3、5、7 d各取1组目标牙样本,采用免疫组化染色和Real-time PCR观察检测各组牙髓组织中串珠素的表达变化,并采用单因素方差分析比较各组间的差异。结果:免疫组化染色显示,牙髓损伤后,牙髓组织中串珠素染色强度增加,各实验组的平均光密度均明显高于正常对照组(P<0.05),并以1 d组升高最为明显;RT-PCR检测显示,与正常对照组相比,串珠素mRNA的相对表达量在牙髓损伤后1 d明显下降,此后随时间延长逐渐回升,损伤后7 d时回升最明显,但仍明显低于对照组(P<0.05)。结论:串珠素在牙髓组织损伤后的防御机制中起一定的作用,但其表达的增加并不是由其生物合成增加所致。

丹参注射液离子导入治疗视网膜静脉阻塞疗效及对结膜分泌物中乙酰肝素酶、串珠素表达的影响

目的观察丹参注射液离子导入治疗视网膜静脉阻塞的临床疗效,并分析其对结膜分泌物中乙酰肝素酶及串珠素表达的影响。方法将90例(180眼)视网膜静脉阻塞患者按照随机数字法分为2组,对照组45例(90眼)予雷珠单抗注射液玻璃体腔注射治疗,治疗组45例(90眼)在对照组基础上加用丹参注射液离子导入治疗。2组均连续治疗3个月后统计疗效,比较2组治疗前后结膜分泌物中乙酰肝素酶及串珠素水平表达情况,比较2组治疗前后视网膜电图(PERG)指标b波潜伏期、波幅变化情况,比较2组治疗前后黄斑中心凹视网膜厚度(CMT)及视网膜循环时间(RCT)变化情况,观察2组治疗期间出现的不良反应情况。结果治疗组总有效率97.78%(88/90),不良反应总发生率11.11%(5/45),对照组总有效率90.00%(81/90),不良反应总发生率4.44%(2/45),治疗组总有效率高于对照组(P<0.05),但2组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后结膜分泌物中乙酰肝素酶及串珠素水平均降低(P<0.05),且治疗组治疗后乙酰肝素酶及串珠素水平均低于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后PERG的b波波幅均升高(P<0.05),潜伏期均缩短(P<0.05),且治疗组治疗后b波波幅高于对照组(P<0.05),潜伏期短于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后CMT及RCT均降低(P<0.05),且治疗组治疗后CMT及RCT均低于对照组(P<0.05)。结论丹参注射液离子导入治疗视网膜静脉阻塞临床疗效确切,可有效改善患者黄斑功能,减轻眼底病变程度,提高视力,且安全性高,其作用机制可能与抑制乙酰肝素酶及串珠素的过度表达有关。

串珠素调节血管生成的研究进展

细胞外基质的主要硫酸肝素类蛋白聚糖串珠素通过与血管壁细胞、生长因子和细胞外基质相互作用而调节血管生物学行为,最新研究发现串珠素参与血管生成的调节,其在新生血管形成与功能完善中的作用开始受到关注,本文简述串珠素在血管生成中的作用。

假肠膜明串珠菌产细菌素复配抑菌液的筛选及保鲜效果研究

目的筛选出最优的假肠膜明串珠菌产细菌素复配抑菌液,同时探究抑菌液对冷鲜鸡肉的保鲜效果。方法以冷鲜鸡肉及其主要腐败菌为研究对象,研究假肠膜明串珠菌产细菌素的最佳生长周期,并利用假肠膜明串珠菌产细菌素抑菌液、乳酸链球菌素抑菌液、假肠膜明串珠菌产细菌素和柚子精油复配抑菌抑菌液以及假肠膜明串珠菌产细菌素和茶多酚复配抑菌液分别浸泡鸡肉,从肉的pH、汁液流失率、色度、菌落总数、挥发性盐基氮和感官评定等方面评价其对鸡肉冷藏品质的影响,比较以上几种抑菌液对鸡肉的保鲜效果,筛选出最佳的抑菌液。结果假肠膜明串珠菌产细菌素的生长周期与其抑菌活性呈一定正相关。实验组的4种抑菌液均能延缓冷鲜鸡肉劣变,但1.5%假肠膜明串珠菌产细菌素抑菌液对冷鲜鸡肉保鲜效果有限。而40 mg/L乳酸链球菌素、1.5%假肠膜明串珠菌产细菌素和10%柚子精油复配抑菌液的保鲜效果较好,尤其在以1.5%假肠膜明串珠菌产细菌素和10%柚子精油复配抑菌液处理时,对冷鲜鸡肉的保鲜作用最强。结论1.5%假肠膜明串珠菌产细菌素和10%柚子精油复配抑菌液对冷鲜鸡肉具有最佳的保鲜效果。

妊娠期糖尿病胎盘病理与串珠素关系研究

目的:探讨妊娠期糖尿病胎盘的病理改变及其与串珠素表达的关系。方法:取妊娠期糖尿病及正常妊娠足月分娩胎盘各30例,石蜡切片,光镜下观察两组胎盘形态,免疫组织化学法标记胎盘组织中串珠素的表达水平。结果:病例组胎盘存在明显的干绒毛小动脉增生、绒毛成熟不良及毛细血管充盈现象,串珠素表达水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:妊娠期糖尿病导致胎盘血管病理改变与串珠素的表达水平增高有关。