超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法检测牡丹根皮中抗氧化活性成分及其抗氧化能力

为能准确检测复杂基质牡丹根皮样品中的抗氧化活性成分及其抗氧化能力,进行了题示研究,并推测了1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除过程的反应机理。采用70%(体积分数,下同)乙醇溶液超声提取样品2次,过滤后合并滤液,浓缩、离心、稀释,配制成200 g·L^(−1)样品溶液,并进一步稀释成质量浓度为8,40,100,200,500,1000,5000,10000,25000 mg·L^(−1)的样品溶液系列。取上述配制好的样品溶液系列各300μL(不添加样品的为样品对照组)和无水乙醇600μL,再加入50 mg·L^(−1)DPPH溶液600μL,涡旋1 min,避光反应30 min。用70%乙醇溶液稀释200倍,过0.22μm滤膜,采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法(UHPLC-Q-TOF-MS)测量样品加入前后DPPH准分子离子峰面积P_(0)和P,利用100%×(P_(0)-P)/P_(0)计算DPPH自由基清除率。结合自身谱库、标准品谱图以及牡丹根皮相关文献鉴定各抗氧化活性成分。结果显示:样品的质量浓度在8~1000 mg·L^(−1)内与DPPH自由基清除率呈线性关系,较酶标仪法受样品基质和颜色干扰小,且DPPH自由基清除率结果和酶标仪法的基本一致;从牡丹根皮中显著识别出18种抗氧化活性成分,包括15种可鉴定成分(包含两对同分异构体)和3种未知成分,其中氧化芍药苷、丹皮酚、牡丹皮苷H、没食子酰芍药苷、没食子酸甲酯、牡丹皮苷F、对羟基苯甲酸是牡丹根皮中主要的抗氧化活性成分。

超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法筛查饲料中11种镇静剂类药物

为了快速筛查未知饲料样品中的镇静剂类药物,应用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱建立了筛查饲料中11种镇静剂类药物的方法。在不同添加浓度下获得了精确的分子离子质量,质量偏差的绝对值低于3×10-6。11种镇静剂类药物在0.02～1mg/L范围内线性关系良好,相关系数r≥0.99,添加浓度为0.5～5mg/kg时,其添加回收率在50%～120%之间,在饲料基质中的检测限为0.1mg/kg。该方法简便、高效、准确,适于饲料中11种镇静剂类药物的分析检测需求。

QuEChERS-高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法同时测定大米中7种除草剂残留

建立了同时测定大米中西草净、异丙隆、苄嘧磺隆、莎稗磷、乙氧氟草醚、草酮和二甲戊灵7种除草剂残留的QuEChERS-高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(HPLC-MS/MS Triple TOF)方法。样品经V (乙酸乙酯):V (水)=80:20混合溶液提取,以N-丙基乙二胺(PSA)为吸附剂进行基质分散萃取净化,采用HPLC-MS/MS Triple TOF检测,外标法定量。结果表明:7种除草剂在一定的质量浓度范围内,其峰面积与对应的质量浓度间线性关系良好,相关系数均大于0.99;西草净、异丙隆、苄嘧磺隆和莎稗磷在0.001、0.01、0.05 mg/kg 3个添加水平下的平均回收率在75%~108%之间,相对标准偏差(RSD)在1.1%~7.0%(n=5)之间,定量限(LOQ)均为0.001 mg/kg;乙氧氟草醚、草酮和二甲戊灵在0.01、0.05和1 mg/kg 3个添加水平下的平均回收率在81%~108%之间,RSD在2.7%~9.0%之间,LOQ均为0.01 mg/kg。该方法样品前处理简单快速,方法灵敏度、准确度和精密度均符合农药残留检测要求,可用于大米中西草净、异丙隆、苄嘧磺隆、莎稗磷、乙氧氟草醚、草酮和二甲戊灵残留的同时检测。

超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱和超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱用于血浆中苦杏仁苷及其代谢产物野黑樱苷的定性和定量分析

建立了大鼠灌胃麻杏石甘汤后血浆中苦杏仁苷、野黑樱苷的定性及定量方法。样品经液液萃取净化处理，定性采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱仪（UPLC-QTOF-MS / MS），经 Shim-pack XR-ODS Ⅲ色谱柱（75 mm×2.0 mm，1.6μm）分离，定量采用超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱仪（ UPLC-Q-TRAP-MS），经 Agilent C18色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.7μm）分离，电喷雾负离子化（ ESI）及 MRM 模式测定，流动相均为乙腈-0.1％（ v /v）甲酸水溶液。结果显示苦杏仁苷、野黑樱苷在相应浓度范围内线性关系良好（相关系数分别为0.9990、0.9970），精密度（RSD）小于9.20％，回收率为82.33％~95.25％，检出限（ LOD）约为0.50 ng / mL。本方法快速简便，为血浆样品中苦杏仁苷、野黑樱苷的定性和定量分析提供良好参考。

液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱和超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱用于检测牛肉中的刚果红

建立了牛肉中刚果红的检测方法。定性方法采用液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱对未知物进行质谱谱图库匹配,定量分析采用超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱。牛肉样品中的刚果红经液液萃取净化后,采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18Rapid Resolution HD色谱柱(50mm×2.1mm,1.8μm)进行分离,流动相为95%(体积分数)甲醇,流速为0.2mL/min。AB 4000+三重四极杆质谱仪在电喷雾负离子化(ESI)及MRM模式下定量。结果显示,刚果红在0.03～1mg/L浓度范围内,线性关系良好(相关系数为0.999 8),精密度良好(RSD小于5%),回收率为88%～91%,检出限约为0.01mg/L。本方法快速简便,重现性好,可以为牛肉及其他肉制品中刚果红的定量提供良好的解决方案。

超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法快速分析东革阿里化学成分

应用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对东革阿里提取物的化学成分进行定性分析。采用Agilent Eclipse Plus-C18 RRHD色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱。质谱分析采用电喷雾正离子模式采集,通过对照品比对及高分辨质谱数据解析,鉴定了49种化学成分,包括29种苦木素二萜、4种β-咔巴啉类生物碱、12种铁屎米-6-酮类生物碱、3种联苯新木脂素类及1种角鲨烯型三萜。该方法快速、可靠、高效,能较全面地反映东革阿里的化学成分,可为深入阐明东革阿里的药效物质基础及质量标准研究提供参考。

基于高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法的大豆油甘油三酯组成特性分析

采用高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法研究大豆油甘油三酯组成特性。对大豆油中16种甘油三酯进行了定性和相对含量测定,分别为LLnLn(0.97%～4.72%)、LLLn(9.06%～14.22%)、LLL(23.19%～35.57%)、LOLn(4.64%～7.44%)、PLLn(2.18%～4.48%)、LLO(15.23%～22.74%)、PLL(9.73%～16.18%)、LOO(3.49%～6.48%)、PLO+SLL(2.90%～9.86%)、PPL(0.81%～1.06%)、OOO(1.23%～2.90%)、OLS(1.56%～4.82%)、POO(0.30%～1.06%)、SSL(0.47%～0.96%)和POS(0.15%～0.51%)。其中,相对含量较高的依次是LLL、LLO、PLL和LLLn,占大豆油总甘油三酯的57.21%～88.71%。该分析研究可为大豆油品质鉴定及油脂掺伪鉴别提供理论依据。

新型QuEChERS方法结合高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法快速测定鱼肉中14种激素

建立了一种新型QuEChERS前处理方法,结合高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（LC-Q-TOF/MS）技术对鱼肉中14种激素进行快速筛查测定。样品加入水分散基质后采用乙腈提取,提取液经增强型基质去脂吸附剂（EMRlipid）脱脂,盐析后采用PSA吸附剂进一步净化并浓缩,然后用LC-Q-TOF/MS方法检测分析。所有药物在线性范围内线性良好,定量限范围为1.4-6.7μg/kg。3个添加水平（n=6）下草鱼基质的平均回收率为75.4%-103.6%,相对标准偏差（RSD）为2.4%-9.5%;大黄鱼基质的平均回收率为73.4%-101.5%,相对标准偏差（RSD）为2.4%-9.1%。该方法利用精确质量数匹配和自建标准谱库检索,实现快速筛查,并使用多级特征碎片离子进行确证,具有操作简便、结果准确等优点,适用于不同鱼肉基质,可作为鱼肉中14种激素类药物的高通量筛查和确认检测方法。本研究为监测鱼肉中激素类药物的风险提供了有效的技术手段。

超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法测定人体尿液中14种内源性甾体激素含量

样品5.000 0g,加pH 6.8的磷酸缓冲溶液2.0mL、β-葡萄糖醛酸甙酶150μL混合,于55℃培养2h,冷却至室温,用乙醚5mL超声5min,提取2次。合并提取液,经氮气吹干后,加甲醇(3+7)溶液5mL溶解残渣,再经Oasis HLB固相萃取柱净化,用甲醇-乙腈(1+1)溶液5mL洗脱。净化液经氮气吹干,用乙腈(95+5)溶解并稀释至1mL后进行色谱分离,以HSS T3色谱柱为固定相,以不同体积比的乙腈和含0.1%(体积分数)甲酸的5mmol·L^(-1)乙酸铵溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱。质谱分析中采用电喷雾离子源和全信息串联质谱采集模式。14种内源性甾体激素的质量分数在一定范围内与其峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)在0.5~5.0μg·kg^(-1)之间。按标准加入法在3个浓度水平上进行回收试验,回收率在80.6%~99.2%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.1%~7.9%之间。

超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法筛查人全血中150种药物与毒物

采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法(UPLC-TOF/MSE)筛查人全血中的150种药物与毒物。人全血样品经液液萃取后,用ACQUITY UPLC HSS C_(18)色谱柱分离,以不同体积比的pH 3.0的5mmol·L^(-1)甲酸铵溶液以及1%(体积分数)甲酸-乙腈溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱,质谱采用电喷雾电离正离子模式全扫描筛查。150种药物与毒物的检出限(3S/N)在0.2~25μg·L^(-1)之间。67种化合物的基质效应在17.4%~126%之间,提取回收率在29.7%~114%之间。

超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法快速鉴别生晒参中的皂苷类成分

目的采用超高效液相色谱与串联四极杆飞行时间质谱联用技术,快速全面鉴别生晒参中人参皂苷类成分。方法色谱分离采用Agilent Zorbax RRHD Eclipse Plus C18色谱柱;流动相为水(含0.1%甲酸,A)和乙腈(含0.1%甲酸,B),梯度洗脱。质谱定性采用高分辨飞行时间质谱,电喷雾双喷离子源(Dual AJS ESI),负离子模式。结果11 min内对生晒参中的95个皂苷类成分进行了鉴别。结论本研究为目前生晒参的质量控制提供了可行的依据。

超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法快速筛查食物中有毒化合物

以一起化学物质引起的食物中毒事件为例,建立超高效液相色谱–串联四极杆飞行时间质谱(UPLC–QTOF–MS)法快速筛查食物中有毒化合物的方法。用乙腈提取样品,采用基于QuEChERS原则的净化技术,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸–甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,经ACQUITY UPLC BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱分离。采用全信息串联质谱(MS^(E))模式对样品进行质谱(ESI^(+))全信息采集,一次进样分析能够得到被分析物的一级和二级精确质量质谱数据,采用一级离子和二级质谱碎片进行标准质谱库匹配。在可疑食物及中毒人员血液中检出莫能菌素,确认了本次事件是由莫能菌素引起的食物中毒,建立了莫能菌素的质谱数据库。该方法适用于突发性化学中毒事件的快速筛查和检测。

超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法定性定量检测硫化胶中促进剂DPG

利用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法,以乙腈+水(含体积分数为0. 000 3的甲酸)为流动相进行梯度洗脱,采用ESI正离子模式,对硫化胶中促进剂DPG进行定性定量分析。结果表明,在质量浓度为1～1 000ng·mL^(-1)范围内,促进剂DPG溶液标准曲线线性关系良好,相关因数为0. 993,检出限为0. 01 ng·mL^(-1),回收率为94. 0%～100. 5%。

液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱快速筛查食品中违禁着色剂

目的建立一种快速筛查食品中违禁着色剂的液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(liquid chromatography-tandem quadrupole time of flight mass spectrometry,LC-QTOF-MS)检测方法。方法收集102种着色剂名称、CAS号、中性分子式、结构式等信息并录入到PCDL软件中。配制相应着色剂溶液后,在MS模式下采集一级谱图数据。确认一级质谱数据后,在Targeted MS/MS模式下给予目标离子10~60 e V的碰撞能,获取二级谱图数据。结果本研究建立了102种着色剂(其中可食用色素16种、违禁工业染料86种)的一级和二级质谱谱库,同时分离了8组相近中性分子量着色剂。结论该方法快速、准确、灵敏,适合筛查食品中未知违禁添加的着色剂并可以快速分离定量。

基于超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱和网络药理学探讨通脉颗粒治疗脑卒中的作用机制

目的基于超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UHPLC-QTOF-MS)和网络药理学方法,探讨通脉颗粒治疗脑卒中的作用机制。方法采用UHPLC-QTOF-MS技术鉴定通脉颗粒的化学成分;通过TCMSP、TTD和PubMed等数据库检索通脉颗粒活性成分作用靶点和脑卒中相关靶点;采用STRING数据库构建关键靶点的蛋白互作网络;采用DAVID数据库对关键靶点进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果从通脉颗粒中鉴定出丹酚酸B、葛根素和藁本内酯等96个化学成分,筛选到38个活性成分和作用于脑卒中靶点55个,核心靶点包括前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)、核因子κB(NFκB)和核因子红细胞系2相关因子2(NRF2)等,关键通路主要涉及缺氧诱导因子1(HIF-1)、肿瘤坏死因子(TNF)和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)等。结论通脉颗粒中丹酚酸B、葛根素和藁本内酯等主要活性成分,通过作用于PTGS2、NFκB和NRF2等靶点,调控HIF-1、TNF和PI3K-Akt等信号通路发挥抗脑卒中的作用。

基于超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱技术的白术化学成分快速识别研究

目的:探讨超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱技术对中药白术化学成分进行快速识别。方法:通过采取超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法对白术药材化学成分进行识别研究,使用水-乙腈流动相梯度洗脱,并将其研究数据以软件Masslynx4.1进行分析处理。结果:对其数据进行分析后得到白术的24个峰信号,20种化学成分。结论:超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱技术可快速识别白术的化学成分,识别方法较为准确,灵敏度高。

超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法测定壬苯醇醚分子量分布及n值

目的:研究并建立超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法测定壬苯醇醚低聚物的分子量分布及n值,并用国内外多批次壬苯醇醚样品进行考察。方法:采用Techmate STV SUNSHELL Peptide C_(18)(100 mm×2.1 mm,2.6μm,300A)色谱柱,以0.1%三氟乙酸水溶液(A)-0.1%三氟乙酸乙腈溶液(B)为流动相,线性梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温60℃,进样量5μL。采用串联四极杆飞行时间质谱检测器,离子源为Dual ESI,氩气为碰撞气,以正离子模式,采集范围m/z 50~3000进行检测。采用ChemDraw19.0软件绘制相关结构,通过MassHunter PCDL Manager软件建立数据库,并编辑计算公式。结果:用新建立的方法对国内外生产的6批壬苯醇醚原料药的重均分子量及数均分子量进行了测定,并计算得到结构中n值的范围,结果发现国内外产品之间以及同一企业不同批次产品之间的重均分子量及数均分子量均有一定差异;产品结构中的n值也各不相同。数均分子量范围在664.6~686.8(n值约为10);重均分子量范围在677.1~715.5(n值约为11)。结论:此类低聚物药物的分子量分布及n值亟需在生产过程及质量标准中增加控制;新建立的方法灵敏度高,精密度和重现性好,可以满足测定壬苯醇醚原料药的分子量分布及n值的需要,为此类低聚物分子量分布的测定提供了解决方案,同时为《中华人民共和国药典》标准提高及修订提供了依据。

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术的荆莲核消方化学成分分析

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MSE),结合UNIFI软件对荆莲核消方(JLHXF)进行化学成分解析。使用Supelco Ascentis?Express C18色谱柱(3.0 mm×50 mm,2.7μm)在乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)的流动相体系下进行梯度洗脱;利用电喷雾离子源(ESI)在正、负离子模式下进行扫描,借助UNIFI软件及相关文献对成分进行分析鉴定。通过UPLC-Q-TOF-MSE技术在正、负离子模式下采集复方的质谱数据,通过化合物的精确相对分子质量和串联质谱数据采用UNIFI软件辅助解析,结合对照品质谱信息及相关文献,共鉴定和推断出187个化学成分,其中黄酮类化合物77个、有机酸类化合物41个、萜类化合物26个、苯丙素类化合物24个、苯酞类化合物12个以及其他类化合物7个。UPLC-Q-TOF-MSE技术可快速鉴定出荆莲核消方中的化学成分,准确性较高,为该方药效物质基础研究提供了可靠依据。

超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法分析强骨饮化学成分

目的建立鉴定强骨饮化学成分的超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)法。方法色谱柱为Kromasil 100-5-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈(正离子模式)和0.5 mmol/L乙酸铵水溶液-乙腈(负离子模式),梯度洗脱,在正、负离子模式下对强骨饮进行质谱检测。根据质谱仪捕捉的化合物精准相对分子质量及二级碎片离子信息,与Agilent TCM Library-V20-04-17数据库的信息比对及查阅相关文献,对强骨饮的化学成分进行定性分析。结果共鉴定出35种化学成分,其中有机酸类10种,黄酮类、环烯醚萜类各4种,酯类3种,糖苷类、皂苷类、氨基酸类、生物碱类、核苷类、色酮类各2种,黄烷醇类、嘌呤类各1种。结论该研究首次对强骨饮的化学成分进行了全面定性分析,为后期质量控制和确定其可能的药效物质基础研究提供了参考。

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱技术分析不同乳酸菌发酵桑叶化学成分的变化

比较不同乳酸菌发酵工艺对桑叶化学成分的影响,筛选优势菌种。采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱检测桑叶中的化学成分,通过对照品、分子质量、质谱裂解规律和文献信息鉴定桑叶甲醇提取液的化学成分。利用SIMCA 14.1软件建立桑叶各发酵品的主成分分析(principal component analysis,PCA)模型和偏最小二乘判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)模型,获取PCA得分图、PLS-DA载荷图和变量投影重要性(variable importance in projection,VIP)值,筛选桑叶发酵前后的差异物质。本实验鉴定出了41个化学成分,PCA结果提示经不同发酵工艺发酵后的桑叶组间差异性较大,PLS-DA筛选出VIP值>1的11个化学成分,可作为发酵前后差异性的化学标记物,分别为大波斯菊苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷、金丝桃苷、3,4-二咖啡酰奎宁酸、橙黄决明素、水杨酸、染料木苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、鸟苷、异麦角甾苷、毛蕊花糖苷;将其综合加权评分后发现鼠李糖乳杆菌发酵桑叶中有效成分含量最高。桑叶发酵前后化学成分含量发生显著变化,黄酮类成分是区分桑叶不同发酵品最重要的化合物类别,鼠李糖乳杆菌为桑叶的优势发酵菌种。