丹参凝集素体外表达纯化及诱导胃癌细胞凋亡研究

目的中药活性蛋白具有抗肿瘤效应,丹参是重要的抗肿瘤中药。文章研究丹参凝集素蛋白(SMLP)诱导胃癌细胞凋亡的作用。方法利用蛋白质原核表达系统在体外表达纯化SMLP,并作用于胃癌细胞SGC-7901。实验分为对照组(未处理)和SMLP处理组(终浓度10μmol/L SMLP处理24 h),通过RT-PCR和Western blot检测相关凋亡基因的表达变化,通过流式细胞术和Hoechst染色检测细胞凋亡情况,利用Caspase-3和Caspase-9活性检测试剂盒检测细胞凋亡水平。结果RT-PCR结果显示SMLP处理组Bax的mRNA水平(1.00±0.12)较对照组(0.67±0.10)明显升高(P<0.05)。胃癌细胞经SMLP处理后,剪切型的Caspase-3和Caspase-9的表达水平和活性较对照组明显增加(P<0.05)。对照组细胞核较大,较圆,表面光滑,染色均一。而SMLP处理组细胞,细胞核染色加深,固缩,出现了典型的凋亡形态学特征。对照组细胞早期凋亡水平为6.55%,而SMLP处理组细胞早期凋亡水平达到10.18%,细胞凋亡水平升高。结论体外表达纯化的丹参凝集素蛋白能够促进胃癌细胞SGC-7901凋亡,这对于进一步揭示植物凝集素的功能,以及研究中药活性蛋白抗肿瘤的作用具有重要意义。