丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对纤维化人肾间质成纤维细胞体外增殖及cyclin E蛋白表达的影响

目的研究丹参酮Ⅱ-A磺酸钠(sodium tanshinoneⅡ-A sulfonate,DS-201)对人肾间质纤维化来源的成纤维细胞(human renal interstitial fibroblasts,hRIFs)体外增殖及细胞周期素E(cyclin E)基因表达的影响,探讨该药治疗肾间质纤维化的作用机制。方法体外培养并鉴定hRIFs;用四甲基偶氮唑(MTT)法检测对照组与不同DS-201浓度组hRIFs的增殖活性;用免疫细胞化学S-P法和图像分析技术检测对照组与不同DS-201浓度组hRIFs cyclin E基因的表达。结果随药物浓度的升高和作用时间的延长,抑制率逐渐升高,抑制作用逐渐增强,呈剂量依赖性和时间依赖性。用药组阳性细胞的平均光密度值在第3、5、7、9天显著低于对照组(P<0.05,P<0.01),第1天用药各组与对照组之间无统计学差异(P>0.05)。结论①DS-201对hRIFs体外增殖有显著抑制作用,可能是其治疗肾间质纤维化的机制之一。②DS-201抑制hRIFs体外增殖可能是通过抑制细胞中cyclin E基因的表达,阻滞细胞通过G1/S关卡,延长细胞周期实现的。

丹参酮Ⅱ-A抑制豚鼠单个心肌细胞L型钙电流和缩短动作电位时程效应的相关性分析

目的旨在探讨药物阻断L型钙电流与其缩短心肌细胞动作电位时程（APD）效应之间的相互关系。方法采用膜片钳全细胞式记录方法，同时观察了丹参酮Ⅱ-A（DST）对豚鼠同一个心室肌细胞跨膜电位和L型钙电流的影响，并对药物的有关效应作相关分析。结果DST显著缩短豚鼠心肌单细胞的动作电位时程（APD），呈剂量依赖关系（r=-0.987）;10、20、和40μmol·L-1DST可使L型钙内向峰电流分别减少35.2％、57.7％和74.7％，亦呈浓度依赖方式（r=-0.948）。经相关性分析证实，在本实验采用的DST相应浓度作用下，APDS50、APD90和APD50～10的缩短与L型钙电流峰值的减少之间呈高度正相关（r分别为0.9870、0.9867和0.9896）。结论DST缩短心肌细胞APD和阻断L型钙电流的效应是高度一致的，且以APD50～10表示平台期的长短更合理。

丹参酮Ⅱ-A对大鼠心室肌细胞膜钾电流的影响

目的 研究丹参酮Ⅱ A(tanshinone ,TSN)对酶解分离的大鼠单个心室肌细胞的内向整流钾电流 (Ik1 )和瞬时外向电流 (Ito)的影响。方法 采用膜片钳全细胞记录技术。结果 应用CdCl2 0 .3mmol·L- 1 阻断钙电流发现 :TSN可抑制Ik1 和Ito。 1 0、2 0、40 μmol·L- 1 使Ik1 稳态电流由用药前 - 32 66 5pA± 381 6pA分别降至 - 2 90 1 0pA±52 8 3pA(P <0 .0 5 ,n =7) ,- 2 581 .0pA± 335 .7pA(P <0 .0 1 ,n=7) ,- 1 931 .9pA± 2 1 9.2pA(P <0 .0 1 ,n =7) ,抑制率分别为 1 2 1 %、2 3 4%、32 8%。较低浓度的TSN对Ito的作用不明显 ,较高浓度有抑制作用。 1 0、2 0、40 μmol·L- 1 使Ito峰值由用药前 2 374 4pA± 2 2 2 9pA分别降至 2 1 4 9 4pA± 341 3pA(P >0 .0 5 ,n =7) ,1 893 .1pA± 350 .8pA(P <0 .0 5 ,n=7) ,1 661 .3pA± 360 .0pA(P <0 .0 5 ,n =7) ,抑制率分别为 9%、2 0 1 %、30 0 %。结论 由于TSN对钾通道的阻滞作用 。

丹参酮Ⅱ-A对细胞因子IL-6和IL-10的影响

目的:RAW 264.7细胞中,炎症发生时相关的细胞炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)起重要作用。丹参酮Ⅱ-A是传统中药丹参的一种重要的药理成分,它具有一定的抑制炎症的作用。但是,从传统中药丹参提取液中的丹参酮对炎症过程的影响研究较少。该文着重介绍了丹参酮Ⅱ-A在转录水平上对IL-6和IL-10的调节作用。方法:以RAW264.7细胞系作为药物刺激靶细胞,使用不同浓度的丹参酮Ⅱ-A对其进行刺激,分别刺激24h、48h后,半定量RT-PCR检测IL-6和IL-10 mRNA表达量的变化。结果:丹参酮Ⅱ-A可以诱导IL-10的释放,同时也减少IL-6的生成,说明它对炎症因子有一定的调控作用。结论:在炎症发生后,丹参酮Ⅱ-A可有效的调节炎症因子的mRNA表达量,进而减少或消除炎症。

丹参酮Ⅱ-A在RAW264.7细胞系中的抗炎症作用机制

目的:丹参酮Ⅱ-A是丹参的一种重要成分。研究丹参酮Ⅱ-A的抗炎症机制。方法:以小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7作为药物刺激靶细胞,使用不同浓度的分析纯丹参酮Ⅱ-A对RAW264.7细胞系进行刺激,在细胞被刺激24、48h后,使用MTT比色法和半定量RT-PCR法对刺激后的细胞进行检测。结果:通过MTT比色法检测,发现丹参酮Ⅱ-A抑制炎症细胞的增殖,初步计算出丹参酮Ⅱ-A的半抑制浓度(IC50)为43.2μmol/L;在半定量RT-PCR实验中发现,在发生炎症后,丹参酮Ⅱ-A通过抑制磷脂酶A2来减轻炎症。结论:在炎症发生后,丹参酮Ⅱ-A通过抑制磷脂酶A2来达到其抗炎症的作用。

丹参酮Ⅱ-A磺酸钠注射液在体外循环中对心肌缺血／再灌注损伤保护作用的研究

目的研究丹参酮Ⅱ-A磺酸钠注射液在体外循环中对心肌缺血／再灌损伤的保护作用。方法随机选取20例行心脏直视手术的患者，分为对照组和丹参酮Ⅱ-A磺酸钠注射液组。丹参酮Ⅱ-A磺酸钠组于转机前给予丹参酮Ⅱ-A磺酸钠注射液2mg／kg。分别于主动脉插管后（T1）、开放主动脉前1-3min（T2）、主动脉开放后30min（T3）、主动脉开放后120min（T4），主动脉开放后720min（B）共5个时间点进行抽血，测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量；记录主动脉开放至心脏复跳所需时间，心律失常（室速／室颤）的发生率和持续时间。血清中超氧化物歧化酶、丙二醛采用分光光度法测定。结果两组患者围术期血清SOD浓度变化比较：对照组各时间点SOD的变化差异无统计学意义（P〉0．05），丹参酮Ⅱ-A磺酸钠组SOD浓度逐渐上升，在T4时间点达最高值（P〈0．05），T5时间点下降；组间比较，丹参酮Ⅱ-A磺酸钠组在T4时间点较对照组高（P〈0．05）。两组患者血清MDA浓度变化比较：对照组MDA浓度随时间点的推进逐步增高，于T4达最高值（P〈0．05），丹参酮Ⅱ-A磺酸钠组MDA浓度也逐渐升高，在T4时间点达高峰，B时间点下降，两时间点与T1比较差异有统计学意义（P〈0．05），组间比较，T4、L时间点差异有统计学意义（P〈0．05），丹参酮Ⅱ-A磺酸钠组比对照组MDA的上升幅度小。两组患者心律失常的发生情况比较：对照组共出现室颤2例，占20％，室速1例，占10％，丹参酮Ⅱ-A磺酸钠组出现室颤1例，无室速发生；对照组室速室颤持续时间3min，电击除颤后转为窦性心律，丹参酮Ⅱ-A磺酸钠组室颤后36s自动转为窦性心律。主动脉开放至心脏复跳所需时间：对照组所需时间较丹参酮Ⅱ-A磺酸钠组明显较长，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论在体外循环心脏直视手术中，临床剂量的丹参酮Ⅱ-A磺酸钠注射液能使患者血清中的SOD浓度升高，有效降低MDA的浓度，缩短主动脉开放至心脏复跳所需时间，减少心律失常的发生率并缩短其时间，提示丹参酮Ⅱ-A磺酸钠注射液对心肌缺血／再灌注损伤有保护作用。

丹参酮Ⅱ-A硫酸钠对低氧诱导肺血管平滑肌细胞增殖的影响

应用免疫细胞化学、流式细胞术和核酸原位杂交技术观测丹参酮 - A硫酸钠 ( DS2 0 1)对肺动脉平滑肌细胞( PASMC)增殖的影响。结果发现 :DS2 0 1能明显地阻抑 PASMC由 G0 /G1 期进入 S期 ( P<0 .0 5 ) ;使 PASMC增殖细胞核抗原 ( PCNA)的表达及 PDGF- A和 B链 m RNA的表达均显著降低 ( P<0 .0 1)。提示 :DS2 0 1可能通过下调 PDGFm RNA基因表达而有效抑制 HECCM诱导的 PASMC增殖。

丹参酮Ⅱ-A磺酸钠联合低分子肝素治疗原发性肾病综合征的疗效观察

目的:观察常规治疗基础上丹参酮Ⅱ-A磺酸钠联合低分子肝素对原发性肾病综合征(PNS)的治疗效果及安全性。方法:将45例原发性肾病综合征患者随机分为两组,分别为常规治疗组(对照组)22例及丹参酮Ⅱ-A磺酸钠联合低分子肝素治疗组(治疗组)23例。对照组给予激素、潘生丁、利尿剂等药物治疗,治疗组在此基础上加用丹参酮Ⅱ-A磺酸钠及低分子肝素。结果:经2周治疗后,治疗组甘油三脂、胆固醇、24h尿蛋白定量、血肌酐均明显下降(P<0.05),血浆蛋白明显上升(P<0.05)。结论:在常规治疗基础上丹参酮Ⅱ-A磺酸钠联合低分子肝素治疗PNS是一种有效安全的方法。

活血聪耳方联合丹参酮Ⅱ-A磺酸钠治疗分泌性中耳炎急性期的疗效及对中医证候积分的影响

目的研究活血聪耳方联合丹参酮Ⅱ-A磺酸钠(SⅡ-AS)治疗分泌性中耳炎(SOM)急性期的疗效及对中医证候积分的影响。方法选择从2015年9月~2016年7月在医院治疗的SOM急性期患者74例作为研究对象。依照简单数字随机表法将患者分成观察组37例以及对照组37例,两组均常规给予抗生素及抗过敏药物,同时给予复方呋喃西林滴鼻液和地塞米松注射液混合配液喷鼻,对照组在此基础上加用SⅡ-AS,观察组在对照组的基础上另给予活血聪耳方,两组疗程均为10天,不同时期的中医症候积分,听阈值的恢复率以及不良反应。结果观察组的总有效率是94.59%,明显高于对照组的78.38%,差异有统计学意义(χ~2=4.163,P=0.041)。治疗后观察组的耳痛、耳闷、耳鸣、听力下降、鼓膜内陷、中耳积液、纯音测听、舌象及脉象的中医症候积分均分别低于对照组差异均有统计学意义(P=0.000)。观察组听阈值的恢复率是91.89%,明显高于对照组的72.97%,差异有统计学意义(P=0.032)。治疗后观察组有2例患者出现皮疹,发生率是5.41%,对照组有1例患者出现皮疹,发生率是2.70%,两组相比,差异无统计学意义(P=0.556)。结论利用活血聪耳方与SⅡ-A S联合治疗SOM急性期患者,可取得较好的疗效,且能改善患者的中医证候及炎症状态,安全性较高,值得给予推广。

丹参酮Ⅱ-a结合打压植骨治疗股骨头缺血性坏死的疗效分析

股骨头缺血性坏死（ ANFH）是骨科常见病，青壮年多见，病情进展快，股骨头受累面积大，早期若没有采取有效措施，股骨头塌陷出现创伤性关节炎，最后不得不行人工髋关节置换治疗。中医学认为股骨头缺血坏死的病因病机为肾精亏虚、气血不足、筋骨失养或寒湿凝结阻碍气血运行。早期以血瘀气滞为重，故治疗上应以活血祛瘀为主。丹参可以改善微循环，增加局部血流量改善局部缺血、缺氧的情况，改善血瘀患者的血流变学特征，促进组织的修复和再生，丹参酮Ⅱ-a是丹参的脂溶性成分，具有丹参的主要药效。本试验利用浸泡丹参酮Ⅱ-a的自体松质骨和同种异体骨治疗股骨头缺血性坏死，观察治疗股骨头坏死的疗效。

丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对房颤大鼠模型心房肌细胞Kv1.5钾通道表达影响的研究

目的:观察丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对房颤大鼠心房肌细胞电重构及细胞膜钾离子通道的影响。方法:制备房颤动物模型,荧光定量PCR技术测定心房肌细胞Kv1.5钾通道基因表达,HE染色观察心房肌细胞超微结构变化。结果:丹参酮Ⅱ-A磺酸钠、胺碘酮能明显改善房颤大鼠心房肌细胞钾通道Kv1.5基因表达减低水平(P<0.05)及心房肌细胞组织超微结构。结论:丹参酮Ⅱ-A磺酸钠能够通过改善房颤大鼠钾通道Kv1.5基因表达下调所引发的心房电重构,从而预防和治疗房颤。

丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对兔在体心室电生理及实验性心律失常的影响

目的:研究丹参酮Ⅱ-A磺酸钠(TSN)对兔在体心室电生理及实验性心律失常的影响。方法:使用心室壁插入自制电极,观察TSN(0.5,1,2,4 mg/kg)对兔心室电生理影响;采用BaCl2、氯仿-肾上腺素等诱发心律失常模型研究TSN对心律失常的影响。结果:小剂量TSN对兔心室电生理无明显影响,大剂量则能显著延长心室的相对不应期、有效不应期、室颤阈;且能降低BaCl2、氯仿-肾上腺素等诱发心律失常。结论:TSN可能具有增加心电稳定性并减少心律失常发生的作用。

刺五加联合丹参酮Ⅱ-A治疗脑梗死41例疗效观察

目的:探讨刺五加联合丹参酮治疗脑梗死的疗效。方法:采用刺五加与丹参酮为治疗组,低分子右旋糖酐与维脑路通联合治疗为对照组治疗脑梗死前后检测指标对比分析。结果:治疗前后观察组血液流变学、凝血、神经功能缺损程度评分和日常生活能力、MCA血液动力学检测指标优于对照组。结论:刺五加与丹参酮联合用药治疗脑梗死疗效优于低分子右旋糖酐与维脑路通。

丹参酮Ⅱ-a综合治疗早期及超早期股骨头坏死30例临床分析

目的:探讨丹参酮Ⅱ-a综合治疗早期(Ⅰ期)、超早期(0期)股骨头坏死的临床效果。方法:2008年5月-2012年5月应用丹参酮Ⅱ-a辅助治疗早期(Ⅰ期)、超早期(0期)股骨头坏死患者30例42髋。0期患者应用丹参酮Ⅱ-a静脉输入,同时口服我院制剂鹿龟生骨丸;Ⅰ期患者行细针股骨头髓心减压,术中行丹参酮Ⅱ-a灌注并留置导管,术后定时灌注7天后静脉输入丹参酮Ⅱ-a1周,后改口服丹参片和鹿龟生骨丸。分别评估治疗前、后髋关节Harris评分,影像学检查观察股骨头坏死的进展情况。结果:本组病例全部获得随访,随访时间13-16月,平均14.2月。0期、Ⅰ期股骨头坏死患者治疗后髋关节Harris评分明显高于治疗前(P<0.05),疼痛明显减轻。MRI检查,0期患者4髋进展为Ⅰ期、1髋进展为Ⅱ期;Ⅰ期患者20髋异常信号区面积无扩大或信号强度减轻,8髋坏死征象有所加重。结论:丹参酮Ⅱ-a辅助治疗早期(Ⅰ期)、超早期(0期)股骨头坏死效果明显、可靠,可以减轻患者的症状,改善髋关节功能。

丹参酮Ⅱ-A对大鼠成骨细胞体外增殖分化的影响

目的:研究丹参酮Ⅱ-A(Ts II-A)对大鼠成骨细胞(OB)体外增殖分化的影响。方法:分离、培养、纯化SD乳鼠颅盖骨OB,选择传代至第3代的OB进行细胞形态学鉴定;将第3代OB分为实验组及对照组,实验组给予5×10-3mg/L、5×10-2mg/L及5×10-1mg/L Ts II-A处理,对照组OB加入与实验组等量的完全培养基DMEM;于接种后第1、3、5、7天4个时间点观察Ts II-A对OB增殖的影响;于接种后第5天检测OB中碱性磷酸酶(ALP)活性。结果:分离、培养所得的细胞符合OB的形态学特征;与对照组比较,实验组不同浓度Ts II-A对OB均有促增殖的作用(P<0.05),其中5×10-2mg/L浓度组促增殖作用最大;培养OB至第5天时实验组中ALP活性高于对照组(P<0.05)。结论:Ts II-A在一定的作用时间内,对体外培养的OB具有促增殖分化作用。

丹参酮Ⅱ-A对大鼠成骨细胞BMP-2表达的影响

目的:观察丹参酮Ⅱ-A(TsⅡ-A)对大鼠大鼠成骨细胞(OB)中骨形成蛋白-2(BMP-2)mRNA表达的影响。方法:培养原代大鼠OB并传代接种后采用Cell Counting Kit-8试剂盒比色法检测5×10^(-3)、5×10^(-2)以及5×10^(-1)mg/L 3个浓度的TsⅡ-A(统称实验组)和对照组(0 mg/L TsⅡ-A)在第1、3、5、7天对OB的促增殖作用;RT-q PCR检测各组OB BMP-2 mRNA的表达。结果:不同浓度TsⅡ-A对OB均有促增殖的作用(P<0.05),其中5×10^(-2)mg/L浓度组促增殖作用最大;在各时间段中,组间比较OB BMP-2 mRNA表达量,实验组均高于对照组(P<0.05);各实验组组内比较,OB BMP-2 mRNA表达趋势为第7天>第5天>第3天>第1天(P<0.05)。结论:TSⅡ-A在一定的作用时间内可促进OB增殖,并上调OB中BMP-2 mRNA表达水平。

丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对大鼠油酸致急性肺损伤纤维化的干预效应

目的通过给予丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对油酸性诱导急性肺损伤纤维化大鼠进行干预,探讨其可能的作用机制和疗效。方法动物随机分成正常对照组、模型组、丹参酮治疗组,制备大鼠油酸型急性肺损伤纤维化大鼠模型,丹参酮治疗组大鼠腹腔注射丹参酮Ⅱ-A磺酸钠注射液10mg/kg连续14 d,分别于末次给药后第7天和14天(停药7d和14d)各组随机处死12只大鼠取材,观察模型大鼠体重变化,测定动脉血液PaO_2、PaO_2/FiO_2值,肺指数及湿干重比,血清IL-1、TNF-α、PCⅢ、TGF-β1水平,进行肺组织病理学检查。结果各组动物体重差异不明显,与模型组相比,丹参酮治疗组动物动脉血氧分压(PaO_2)和氧合指数(PaO_2/FiO_2)明显升高(P<0.05),肺指数和湿干重比值明显降低(P<0.05),IL-1、TNF-α、PCⅢ、TGF-β1水平显著降低(P<0.05),肺组织病理学损伤明显减轻,肺损伤组织学半定量评分(IQA)分值显著降低(P<0.05)。结论丹参酮对急性肺损伤纤维化大鼠模型具有一定的治疗保护作用,其可能机制与调节炎症因子有关。

丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对大鼠油酸致急性肺损伤纤维化的干预效应研究

目的:通过给予丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对油酸性诱导急性肺损伤纤维化大鼠进行干预,探讨其可能的作用机制和疗效。方法:动物随机分成正常对照组、模型组、丹参酮治疗组,制备大鼠油酸型急性肺损伤纤维化大鼠模型,丹参酮治疗组大鼠腹腔注射丹参酮Ⅱ-A磺酸钠注射液10 mg/kg连续14 d,分别于末次给药后第7天和第14天(停药7 d和14 d)各组随机处死12只大鼠,观察模型大鼠体重变化,测定动脉血液动脉血氧分压(PaO2)、氧合指数(PaO2/FiO2)值,肺指数及湿干重比,血清IL-1、TNF-α、PCⅢ水平,进行肺组织病理学检查。结果:各组动物体重差异无统计学意义(P>0.05),与模型组相比,丹参酮治疗组动物PaO2和PaO2/Fi O2明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),肺指数和湿干重比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α、PCⅢ以及IL-1水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),肺组织病理学损伤明显减轻。结论:丹参酮对急性肺损伤纤维化大鼠模型具有一定的治疗保护作用,其可能机制与调节炎性因子有关。

胰激肽原酶联合丹参酮Ⅱ-A磺酸钠治疗早期糖尿病肾病的疗效分析

目的观察胰激肽原酶联合丹参酮Ⅱ-A磺酸钠治疗早期糖尿病肾病的疗效。方法选择早期糖尿病患者肾病患者83例,随机分为对照组和治疗组,给予胰激肽原酶40U,肌肉注射,1次/d。同时加用丹参酮Ⅱ-A磺酸钠注射液60mg加入生理盐水250mL,1次/d,静脉滴注,4周为1个疗程。结果治疗组治疗后24h尿蛋白定量检查各项指标均低于对照组,两组治疗后数值亦低于治疗组,差异具有统计学意义(P<0.05)。SCr、BUN均较治疗前有所下降。结论胰激肽原酶联合丹参酮Ⅱ-A磺酸钠治疗早期糖尿病肾病有显著疗效,值得推广应用。

丹参酮Ⅱ-A磺酸钠联合低分子肝素治疗慢性阻塞性肺病并发高粘血症疗效观察

目的观察常规治疗基础上丹参酮Ⅱ-A磺酸钠联合低分子肝素对慢性阻塞性肺病并发高粘血症的治疗效果及安全性。方法将92例慢性阻塞性肺病并发高粘血症患者随机分别分为两个治疗组,分常规治疗组(未使用丹参酮Ⅱ-A磺酸钠联合低分子肝素)47例及治疗组(治疗组)45例。对照组给予抗生素、潘生丁、氨茶碱等药物治疗,治疗组在此基础上加用丹参酮Ⅱ-A磺酸钠及低分子肝素。结果经2周治疗后,治疗组甘油三脂、胆固醇、全血粘稠度、血浆粘稠度、血浆纤维蛋白明显改善。结论在常规治疗基础上丹参酮Ⅱ-A磺酸钠联合低分子肝素治疗慢性阻塞性肺病并发高粘血症是一种有效安全的方法 。