丹参酸乙对四氯化碳体外损伤原代培养大鼠肝细胞的直接保护作用

四氯化碳体外损伤原代培养大鼠肝细胞的［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷掺入量显著降低，培养液中ＡＬＴ活性显著增高；丹参酸乙（ＳＡ－Ｂ）能有效地阻抑细胞的这种病理变化，均以１０－６ｍｏｌ／Ｌ浓度的ＳＡ－Ｂ的作用最佳。

丹参酸乙的抗氧化作用对大鼠肝星状细胞增生的影响

目的:研究丹参酸乙(salvianolic acid B,SAB)的抗氧化作用对大鼠肝星状细胞(hepatic stallate cells,HSC)增生周期的影响。 方法:采用原位灌注法消化大鼠肝脏,108 g·^(-1)nycodenz密度梯度离心,分离肝星状细胞,分别以不同浓度的SAB或MDA/SAB处理细胞,~3H-TdR掺入法观察细胞的增生能力,流式细胞术分析细胞周期各时相变化及凋亡情况。 结果:1和10 μmol·L^(-1)SAB可显著抑制HSC的增生(2862±1234&2988±407 vs 4986±727,P<0.05,P<0.01),这种作用主要是抑制了细胞周期过程中G_1期向S期的过渡;1和10μmol·L^(-1)SAB均可抑制MDA刺激的HSC增生(3067±731&3042±321vs 4007±587,P<0.05,P<0.01);两组剂量的SAB均不促进HSC的凋亡。 结论:丹参酸乙可抑制体外培养HSC的增生,这种抑制作用与SAB的抗氧化作用有一定的关系。

丹参酸乙对大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原基因表达的影响

目的 :探讨丹参酸乙 (SA B)对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )孵育的新生大鼠心脏成纤维细胞功能的影响。 方法 :将培养的心脏成纤维细胞分成四组 :空白对照组 ;AngⅡ组 :培养基中加了 10 7mol/LAngⅡ ;SA B10 6mol/L组 :培养基中加 10 7mol/LAngⅡ+ 10 6mol/LSA B ;SA B10 4mol/L组 :培养基中加 10 7mol/LAngⅡ + 10 4mol/LSA B。加药后 2 4h分别作3 H TdR细胞增殖测定和采用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)测定Ⅰ、Ⅲ型胶原基因的转录水平。结果 :10 4mol/LSA B可有效抑制由AngⅡ引起的心脏成纤维细胞的增殖。 10 5mol/LSA B可抑制胶原Ⅲ型mRNA的表达量 ,而 10 6mol/LSA B和 10 5mol/LSA B都可显著抑制胶原Ⅰ型mRNA的表达。结论 :丹参酸乙可逆转由AngⅡ引起的心脏成纤维细胞的增殖和Ⅰ、Ⅲ型胶原基因的表达水平。

丹参酸乙对转化生长因子β1刺激的大鼠肝星状细胞的观察

目的 探讨丹参酸乙 (SAB)对转化生长因子 β1(TGFβ1)刺激的大鼠肝星状细胞活化、Ⅰ型胶原及c fos基因表达的影响。方法 原位灌注、消化大鼠肝脏 ,分离肝星状细胞。以不同浓度SAB温育TGFβ1刺激的大鼠肝星状细胞。异硫氰酸胍一步法提取细胞总RNA ,RT PCR法检测目的基因的表达。结果 1μmol/LSAB和 10 μmol/LSAB可分别抑制Ⅰ型胶原及c fos基因表达 ,但 1μmol/LSAB和 10 μmol/LSAB对SMα actinmRNA均无显著影响。 结论 TGFβ1对体外活化的大鼠肝星状细胞表达SMα actinmRNA无明显影响 ,可促进Ⅰ型胶原和c fosmRNA的表达。SAB可抑制TGFβ1促进细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的作用。

丹参酸乙抗慢性乙型肝炎肝纤维化的研究

丹参酸乙(丹参酚酸B盐)为临床肝病治疗常用的活血化瘀中药丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge,SMB)中提取的水溶性成分.本攻关项目在既往国家自然科学基金项目研究工作基础上,进行了药学、毒理学等系统研究,并着重研究了该有效成分抗慢性乙型肝炎肝纤维化的作用和机制.

丹参酸乙对大鼠肝星状细胞细胞内氧化水平及增殖细胞核抗原的影响

目的:研究丹参酸乙(SA-B)对大鼠肝星状细胞细胞内氧化水平及增殖细胞核抗原(PCNA)的影响。方法:原位灌注法分离正常大鼠肝星状细胞,丹参酸乙直接添加于原代培养的肝星状细胞;2`7`-二氟二氢荧光素(DCFH)掺入反映细胞内氧化程度,Western blot蛋白印迹法检测PCNA含量。结果:1μm和10μm丹参酸乙可减低活化的以及经丙二醛(MDA)刺激后的肝星状细胞的细胞内氧化程度。1μm和10μm丹参酸乙都可抑制活化的以及经MDA刺激后的肝星状细胞的PCNA表达量。结论:丹参酸乙可降低细胞内氧化程度,抑制MDA刺激后肝星状细胞PCNA的表达,丹参酸乙的抗氧化和抗增殖这两方面的作用可能有一定的联系。

丹参酸乙对大鼠心脏成纤维细胞增殖和c-fos基因表达的影响

目的探讨丹参酸乙(SA-B)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)孵育的新生大鼠心脏成纤维细胞的影响。方法将培养的心脏成纤维细胞分组加药后,采用 Alamar blue 荧光分析法和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术分别测定细胞增殖和 c-fos 基因的转录水平。结果 10μmol/L SA-B 和100μmol SA-B 可有效抑制由 AngⅡ引起的心脏成纤维细胞增殖(P<0.05)。1μmol/L SA-B 和10μmol/L SA-B 也可有效抑制 c-fos 基因 mRNA的表达(P<0.05)。结论一定浓度的丹参酸乙可抑制由 AngⅡ引起的心脏成纤维细胞的增殖和 c-fos 基因的表达水平。

丹参酸乙对大鼠肝星状细胞α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的 观察丹参酸乙对大鼠肝星状细胞α-平滑肌肌动蛋白的影响。方法 原位灌注、消化法分离正常大鼠肝星状细胞,异硫氰酸胍一步法提取细胞总RNA,RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白基因表达,免疫印迹法分析α-平滑肌肌动蛋白量。结果 10μmol/L SAB可抑制肝星状细胞α-平滑肌肌动蛋白的基因表达,但不能抑制其蛋白表达。细胞经TGFβ1刺激后,不仅1μmol/L SAB甚至10μmol/L SAB均不能抑制a-平滑肌肌动蛋白的基因表达。结论 丹参酸乙在肝星状细胞活化的启动阶段可延缓其活化,对于已活化的细胞丹参酸乙则无逆转作用。

丹参酸乙对大鼠肝细胞增殖及胶原生成的影响

观察丹参酸乙对肝细胞增殖及胶原生成率的影响，探讨其抗肝纤维化作用机制。方法灌流法分离肝细胞进行体外原代培养，［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入检测细胞增殖率，［３Ｈ］－脯氨醉掺入、胶原酶消化法检测胶原生成率，凝胶法测定胶原酶活性。结果丹参酸乙可显著促进肝细胞增殖，提高细胞内总蛋白生成量，降低胶原蛋白生成，抑制胶原生成率；提高细胞分泌的间质型脐原酶活性，抑制细胞外的胶原生成率，均以１０－６ｍｏｌ／Ｌ浓度最好（与对照组比较，Ｐ值＜０．０５）。结论丹参酸乙可促进肝细胞增殖，抑制细胞的胶原生成。在抗肝纤维化治疗中具有特殊的意义。