基于Caspase-3/Bcl-2/Bax信号通路探究加味旋覆代赭汤治疗食管癌前病变的作用机制

目的:探究加味旋覆代赭汤对食管癌前病变大鼠Caspase-3/Bcl-2/Bax信号通路的调控作用机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为4组,空白组、模型组、中药组、西药组,每组各12只。除空白组外均采用复合造模法制作食管癌前病变大鼠模型,造模成功后,分别进行药物灌胃干预,空白组、模型组用生理盐水灌胃,中药组和西药组分别给予加味旋覆代赭汤、西药(雷贝拉唑+莫沙必利)灌胃,给药8周取材。利用光学显微镜观察食管上皮组织的形态学变化;分别应用蛋白质印迹法(Western-blot)及聚合酶链式反应(PCR)检测食管上皮组织Caspase-3、Bcl-2及Bax的表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠食管上皮病理积分升高(P<0.01);与模型组比较,中药组、西药组大鼠食管上皮病理积分均降低(P<0.01)。PCR及Western-blot检测结果显示,与空白组比较,模型组大鼠Caspase-3、Bax mRNA、蛋白表达均降低(P<0.01);与模型组比较,中药、西药组大鼠Caspase-3、Bax mRNA、蛋白表达均增高(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠食管组织中Bcl-2 m RNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05);与模型组比较,中药组和西药组Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论:加味旋覆代赭汤可能通过下调Bcl-2/Bax比值,增加线粒体外膜通透性,释放凋亡因子,激活Caspase-3,使病变组织发生凋亡,扭转食管上皮异型增生,从而起到治疗食管癌前病变的作用。

丹参酮ⅡA通过抑制JAK2/STAT3通路减轻慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜损伤的机制研究

[目的]研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃黏膜的影响,并基于Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活子3(STAT3)通路探讨其机制。[方法]将80只Wistar大鼠随机分为5组(n=16):正常(Normal)组、模型(Model)组、TanⅡA(5 mg/kg)组、TanⅡA(5 mg/kg)+AG490(JAK2抑制剂,5 mg/kg)组和Tan IIA(5 mg/kg)+C-A1(JAK2激动剂,50 mg/kg)组。除Normal组外,其他4组均采用N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍溶液(MNNG,0.04 g/mL)自由饮联合雷尼替丁灌胃、饥饱失常饮食的综合法构建CAG大鼠模型。各组分别每日1次连续给药治疗12周后,中性红清除法检测胃黏膜血流量,酶联免疫吸附法(ELISA)法检测血清胃泌素(GAS)、血浆胃动素(MTL)及胃黏膜炎症因子水平,苏木精-伊红(HE)染色法观察胃黏膜组织病理学改变并行萎缩评分,TUNEL染色法观察胃黏膜细胞凋亡状况并计算凋亡指数,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法、蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测胃黏膜JAK2/STAT3通路相关mRNA和蛋白表达。[结果]与Model组相比,TanⅡA组大鼠胃黏膜血流量、血清GAS水平、血浆MTL水平均明显升高(P<0.05);胃黏膜中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6等炎症因子水平明显降低(P<0.05);胃黏膜病理学改变明显改善,萎缩评分明显降低(P<0.05);胃黏膜凋亡细胞数量明显减少,凋亡指数明显降低(P<0.05);胃黏膜JAK2、STAT3 mRNA表达量明显降低(P<0.05);B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达量明显升高,Bcl-2相关X蛋白(Bax)、激活型半胱氨酸蛋白酶3(C-Cas-3)、C-Cas-9蛋白表达量及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、胞核核因子-κB(NF-κB)p65/胞浆NF-κB p65表达比值明显降低(P<0.05)。AG490能够明显增强TanⅡA对CAG大鼠各检测指标的调控作用,C-A1则能够明显逆转TanⅡA对CAG大鼠各检测指标的调控作用(P<0.05)。[结论] TanⅡA可能通过抑制JAK2/STAT3通路活化及NF-κB核转位,减轻炎症反应和细胞凋亡,从而减轻CAG大鼠胃黏膜结构和功能损伤。

桂枝加龙骨牡蛎汤对魄不安于肺不寐大鼠脑组织Caspase-3、Bcl-2、Bax水平的影响

目的:探讨桂枝加龙骨牡蛎汤对魄不安于肺不寐大鼠脑组织Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的影响及其治疗魄不安于肺不寐可能的作用机制。方法:32只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药组和西药组,每组8只。采用水环境小平台法干预9 d建立魄不安于肺不寐大鼠模型,造模成功后,中药组予以桂枝加龙骨牡蛎汤7.6 g·kg-1·d-1灌胃,西药组予以右佐匹克隆片0.1 mg·kg-1·d-1灌胃,对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续14 d,测量体质量。采用免疫组织化学法及蛋白质免疫印迹法检测脑组织中Caspase-3、Bcl-2、Bax表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠体质量减轻(P<0.01),免疫组化检测结果显示,大鼠脑组织Bcl-2的表达显著减少(P<0.01),Caspase-3、Bax表达显著增加(P<0.01),Bcl-2/Bax比率显著减少(P<0.01);Western blot结果显示大鼠脑组织Bcl-2相对表达量显著减少(P<0.01),Bax、Caspase-3相对表达量显著增加(P<0.01)。与模型组比较,中药组及西药组大鼠体质量显著增加(P<0.01),免疫组化检测结果显示,大鼠脑组织Bcl-2表达增加(P<0.05),Caspase-3、Bax表达减少(P<0.05),Bcl-2/Bax比率显著升高(P<0.01);Western blot结果显示大鼠脑组织中Bcl-2相对表达量增加(P<0.05),Bax、Caspase-3相对表达量显著减少(P<0.01)。结论:桂枝加龙骨牡蛎汤改善魄不安于肺不寐大鼠的睡眠可能与增加其脑组织Bcl-2、降低Caspase-3、Bax表达水平有关。

丹参多酚酸盐调控Nrf2/HO-1信号通路对膜性肾病大鼠氧化应激的影响

[目的]基于血清核转录因子2(Nrf2)/血红蛋白氧合酶-1(HO-1)信号通路探讨丹参多酚酸盐对膜性肾病(MN)大鼠氧化应激的影响。[方法] 80只SD雄性大鼠随机选取20只为正常对照组,其余60只大鼠均采用尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)构建MN模型,MN模型大鼠复制成功后随机分为模型组,盐酸贝那普利组(10 mg/kg),丹参多酚酸盐分为低、中、高剂量组(16.7、33.3、66.7 mg/kg)。药物灌胃连续4周,1次/d,正常组和模型组予以相等体积的生理盐水灌胃。治疗后检测大鼠24 h尿蛋白定量(24 h UTP)。给药结束后,经大鼠腹主动脉取血检测血尿素氮(BUN),血清肌酐(Scr),三酰甘油(TG),总胆固醇(TC),总蛋白(TP),白蛋白(ALB)水平;过碘酸-六胺银(PASM)染色观察大鼠肾组织病理形态;免疫荧光检测肾组织免疫球蛋白G(IgG)、补体C3沉积情况;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)表达情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)观察肾组织Nrf2、HO-1蛋白及Nrf2、HO-1 mRNA表达。[结果]与正常组相比,模型组大鼠肾小球出现体积增大、基底膜增厚、“钉突”形成,沿毛细血管襻有补体C3、IgG弥漫性沉积,24 h UTP、血清TG、TC水平显著升高(P<0.01),TP、ALB水平显著降低(P<0.01),BUN、SCr差异无统计学意义;血清中SOD表达显著降低(P<0.01),MDA表达显著升高(P<0.01);肾组织Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组相比,各治疗组大鼠24 h UTP、血清TG、TC水平显著降低(P<0.05或P<0.01),TP、ALB水平显著升高(P<0.01),但丹参多酚酸盐低剂量组改善不明显;各治疗组肾脏病理损害明显改善;SOD表达水平显著升高(P<0.01),MDA表达水平明显降低(P<0.01);Nrf2、HO-1mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。[结论]丹参多酚酸盐可能通过调控Nrf2/HO-1信号通路,缓解肾组织氧化应激,进而保护肾脏及延缓疾病进展。

丹参提取物联合瑞芬太尼通过调控Nrf2信号通路减轻缺氧复氧诱导的心肌细胞损伤

为探讨丹参提取物联合瑞芬太尼在减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤中的作用及其机制。本研究将H9c2心肌细胞分为对照组、模型组、丹参提取物组(Tan I组)、瑞芬太尼组(RPC)组和联合组。对照组细胞不做处理,模型组缺氧/复氧(HR)诱导的心肌细胞损伤模型,Tan I组在模型组的基础上给与1μmol/LTan I孵育24h,RPC组在模型组的基础上给与1μmol/LRPC孵育24h联合组在模型组的基础上同时给与1μmol/L Tan I和1μmol/L RPC孵育24 h。采用CCK-8测定各组细胞活力流式细胞术测定各组细胞凋亡率,采用Western blot测定各组细胞Nrf2和HO-1表达水平进一步转染Nrf2-siRNA分析Nrf2信号通路对Tan I联合RPC保护HR诱导H9c2心肌细胞损伤的影响。结果表明,HR诱导后H9c2心肌细胞的活力显著下降,药物处理后,Tan I组、RPC组和联合组H9c2细胞的细胞活力显著增加,且联合组的细胞活力改善与Tan I组和RPC组相比更显著;HR诱导后H9c2心肌细胞的凋亡率显著升高,药物处理后,Tan I组、RPC组和联合组H9c2细胞的细胞凋亡率显著下降,且联合组的细胞凋亡率下降水平与Tan I组和RPC组相比更显著;HR引起H9c2细胞Nrf2总蛋白表达和核Nrf2蛋白表达水平显著降低,各组给药后增加了总Nrf2蛋白和核Nrf2蛋白的表达,降低了细胞质中的Nrf2蛋白,且与Tan I组和RPC组相比联合组总Nrf2蛋白和核Nrf2蛋白的表达水平显著增高,细胞质中的Nrf2蛋白表达水平显著降低;转染Nrf2-siRNA后,Tan I联合RPC处理的H9c2心肌细胞中Nrf2和HO-1的表达均下降。丹参提取物联合瑞芬太尼可通过调控Nrf2信号通路减轻HR诱导的心肌细胞损伤。

冠心丹参滴丸对急性冠脉综合征合并2型糖尿病病人PCI术后生活质量及血瘀证计分的影响

目的:观察冠心丹参滴丸对急性冠脉综合征(ACS)合并2型糖尿病(T2DM)病人经皮冠状动脉介入(PCI)术后生活质量及血瘀证计分的影响。方法:在我国40所医疗中心纳入2012年2月—2015年12月行PCI治疗的ACS合并T2DM病人,以是否使用冠心丹参滴丸为暴露因素,分为冠心丹参滴丸组和常规治疗组。常规治疗组根据指南推荐进行常规西药治疗,冠心丹参滴丸组在常规西药治疗基础上加用冠心丹参滴丸每次0.4 g,每日3次,疗程为12个月。以西雅图心绞痛量表(SAQ)评分及血瘀证计分为疗效评价指标,采用广义估计方程(GEE)进行统计学分析。结果:650例病人完成了随访,其中冠心丹参滴丸组340例、常规治疗组310例。与常规治疗组比较,冠心丹参滴丸组在治疗第12个月时SAQ总分增加(P<0.05),治疗第6个月、第12个月时血瘀证计分明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:冠心丹参滴丸可改善ACS合并T2DM病人PCI后SAQ评分,降低血瘀证计分,提高病人生活质量。

基于网络药理学探究丹参-黄芪药对治疗冠心病合并2型糖尿病的分子机制

目的:通过网络药理学方法研究丹参-黄芪药治疗冠心病(CHD)合并2型糖尿病(T2DM)的分子机制。方法:借助中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和Swiss Target Prediction获得丹参和黄芪的活性成分及对应靶点,利用GeneCards数据库和在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)获取CHD和T2DM的相关靶点。使用Venn2.1.0平台得到相应药物靶点与疾病靶点的交集并将其导入String数据库以构建蛋白相互作用网络,然后将PPI网络导入Cytoscape3.9.1软件构建“药物-有效成分-靶点”,筛选可能发挥治疗作用的核心靶点,将交集靶点导入Metascape数据库进行基因本体(GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析获知其潜在的作用机制,在微生信进行可视化处理。结果:药物共筛选到58个有效成分并得到737个靶点。得到CHD的靶点共2869个,得到T2DM的靶点共2393个,其中交集靶点247个。PPI网络筛选出核心靶点44个。经GO分析和KEGG分析,表明丹参-黄芪可能主要通过调控多条信号通路发挥抗炎、胰岛素抵抗、抗氧化应激的作用来对CHD合并T2DM起到治疗作用。结论:本研究运用网络药理学的分析方法预测丹参-黄芪药对治疗CHD合并T2DM可能的活性成分、关键靶点及作用通路,体现中药治疗疾病具有“多成分、多靶点、多途径”的特点,为其药效物质基础和作用机制研究提供理论基础,印证临床上运用丹参-黄芪药对治疗CHD合并T2DM的可行性。

丹参SmJRB2基因的克隆与功能鉴定

【目的】丹参Salvia miltiorrhiza是治疗心脑血管疾病的常用中药材。解析丹参药效物质合成代谢的分子调控机制能为丹参优质新品种的选育提供科学依据。【方法】基于比较转录组挖掘获得响应甲基茉莉酸(MeJA)诱导的转录因子SmJRB2。采用同源克隆技术克隆获得该基因的编码序列,并进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析SmJRB2基因的组织表达和MeJA诱导表达特征;基于农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的丹参遗传转化技术对SmJRB2基因的功能进行鉴定。【结果】SmJRB2共编码501个氨基酸,属于bHLH转录因子家族的MYC类转录因子。SmJRB2基因在丹参叶片和主根中的表达量最高。SmJRB2基因强烈响应MeJA的诱导,诱导4.0 h时表达量最高。超表达SmJRB2促进丹参酮的积累,抑制表达SmJRB2基因则降低丹参酮的合成。【结论】SmJRB2是丹参酮代谢合成的正向调节因子。

澳洲茄碱通过调控Bcl-2/Bax/caspase-3信号通路促进非小细胞肺癌发生凋亡

目的 探讨龙葵活性成分澳洲茄碱对非小细胞肺癌细胞PC9增殖、凋亡的影响。方法 体外培养PC9细胞,设对照组(0μmol/L)及澳洲茄碱不同剂量组(0、2、5、10、15、20、25μmol/L),CCK-8试剂盒检测澳洲茄碱对PC9细胞的增殖抑制作用;TMRE检测线粒膜电位;caspase3/7活性试剂盒联合GreenNuc?Caspase-3/Annexin V-mCherry染色检测caspase-3活性;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;给药处理或者使用PTEN抑制剂后,Western blot检测细胞中相关蛋白的表达量。结果 与对照组相比,经澳洲茄碱干预24、48、72 h后,PC9细胞的活力均明显降低(P<0.05);经澳洲茄碱干预24 h后,细胞线粒体膜电位明显降低,而细胞凋亡比例明显升高(P<0.05);caspase-3/7活力、活细胞Caspase-3活性及cleaved caspase-3蛋白表达均显著升高(P<0.01);PI3K和Akt磷酸化水平降低(P<0.05);而PTEN、Bax蛋白表达上调(P<0.05);抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达下调(P<0.05)。结论 澳洲茄碱可通过调控Bcl-2/Bax/caspase-3通路及其上游蛋白活性而抑制PC9细胞增殖,促进其凋亡。

丹参酮IIA上调Nrf2/HO-1信号通路减轻海马神经元氧糖剥夺/复糖复氧损伤

目的:探讨丹参酮IIA(Tan IIA)对海马神经元氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)损伤以及核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1(Nrf2/HO-1)信号通路的影响。方法:体外培养并取对数生长期小鼠海马神经元HT22细胞开展实验,设对照(Control)组、模型(OGD/R)组、Tan IIA(5μg/ml)组、Nrf2激动剂叔丁基对苯二酚(TBHQ,1.6μg/ml)组和Tan IIA(5μg/ml)+TBHQ(1.6μg/ml)组。各组分别给药干预2h后,除Control组外,其它组通过氧糖剥夺6h后复糖复氧24h构建HT22细胞OGD/R损伤模型。MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,二氯荧光素双乙酸盐(DCFH-DA)探针法检测细胞中活性氧(ROS)含量,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化法、钼酸铵法检测超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western Blotting检测Nrf2/HO-1信号通路相关mRNA和蛋白表达。结果:与OGD/R组相比,Tan IIA组、TBHQ组和Tan IIA+TBHQ组HT22细胞活力明显升高、凋亡率明显降低(P<0.05);细胞中ROS、MDA含量明显降低,SOD、CAT活性明显升高(P<0.05);Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达量明显升高,B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达量明显升高,Bcl-2相关X蛋白(Bax)、激活型半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达量及Bax/Bcl-2、Cleaved Caspase-3/Caspase-3比值明显降低(P<0.05)。Tan IIA+TBHQ组对各检测指标的调控作用明显优于Tan IIA组和BHQ组(P<0.05)。结论:Tan IIA对OGD/R损伤海马神经元氧化应激损伤和凋亡具有抑制作用,其机制可能与上调Nrf2/HO-1信号通路有关。

枸杞子-丹参对小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2表达的影响

目的观察枸杞子-丹参对rd10小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2表达的影响。方法将40只rd10小鼠随机分为5组,空白组灌胃生理盐水;对照组灌胃维生素A溶剂;枸杞组灌胃枸杞子中药超微配方颗粒溶液;丹参组灌胃丹参中药超微配方颗粒溶液;枸杞加丹参组(杞参组)灌胃枸杞子加丹参中药超微配方颗粒溶液;8只C57小鼠为野生组,灌胃生理盐水。给药28 d后,RT-qPCR检测小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2 mRNA表达情况,免疫组化、免疫荧光法检测小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2蛋白表达情况。结果 RT-qPCR检测显示:除杞参组外,各组小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2 mRNA相对表达量高于野生组,差异有统计学意义(P<0.05);杞参组小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2 mRNA相对表达量低于空白组、对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化检测显示:各组小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2平均光密度高于野生组,差异均有统计学意义(P<0.05);杞参组Caspase-12前体、Caspase-2蛋白平均光密度低于空白组、对照组、枸杞组、丹参组,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光检测显示:各组小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2蛋白平均荧光强度高于野生组,差异均有统计学意义(P<0.05);杞参组Caspase-12前体、Caspase-2蛋白平均荧光强度低于空白组、对照组、枸杞组、丹参组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论枸杞子-丹参可以抑制rd10小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2 mRNA和蛋白的表达,从而抑制感光细胞的凋亡,维持视网膜正常功能结构,保护视功能。

复方丹参滴丸辅助治疗T2DM并高血压的作用

目的:研究2型糖尿病合并高血压患者采用复方丹参滴丸实施辅助治疗的临床效果。方法:选择2021年1月-2022年1月在我院接受治疗的30例2型糖尿病合并高血压见胸闷、心前区刺痛等症候患者,采取随机分组法将其分成两组。对照组中15例研究对象接受常规降糖降压治疗;治疗组中15例研究对象在常规降糖降压方案基础上,加用复方丹参滴丸进行治疗。对比治疗前后血糖、血压、血脂、血管结构相关指标水平、治疗总有效率。结果:治疗组研究对象治疗前后血糖、血压、血脂、血管结构相关指标水平改善幅度大于对照组(P<0.05);治疗组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。结论:2型糖尿病合并高血压患者采用复方丹参滴丸实施辅助治疗效果明显。

丹参酮提取物调控JAK2/STAT3通路对AD大鼠炎症反应、学习记忆能力及海马神经元凋亡的影响

分析丹参酮提取物(Tan E)调控Janus激酶2/信号转导和转录激活因子3(JAK2/STAT3)通路对阿尔茨海默病(AD)大鼠炎症反应、学习记忆能力及海马神经元凋亡的影响。方法 选择30只健康SD大鼠,分为正常对照组、AD组、Tan E低剂量组、高剂量组及JAK2/STAT3通路激活剂(DUSP19)组。比较各组大鼠炎症反应、学习记忆能力及海马神经元凋亡情况,比较各组大鼠海马脑组织中JAK2/STAT3通路蛋白表达情况。结果 AD组白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平相较于正常对照组明显升高(P<0.05);Tan E低、高剂量组IL-6、TNF-α、IL-1β水平相较于AD组明显下降;高剂量组IL-6、TNF-α、IL-1β水平相较于低剂量组明显下降(P<0.05)。AD组穿越平台次数相较于正常对照组明显降低(P<0.05);Tan E低、高剂量组穿越平台次数相较于AD组升高,且高剂量组学习记忆能力相较于低剂量组升高(P<0.05)。AD组神经元细胞凋亡率相较于正常对照组明显升高,神经元细胞数目明显下降;an E低、高剂量组神经元细胞凋亡率相较于AD组明显下降,神经元细胞数目明显增加(P<0.05)。AD组JAK2、STAT3表达相较于正常对照组明显升高(P<0.05);Tan E低、高剂量组JAK2、STAT3表达相较于AD组明显降低(P<0.05);DUSP19组JAK2、STAT3表达相较于Tan E剂量组明显升高(P<0.05)。结论 Tan E可有效提高AD大鼠模型学习记忆能力,改善脑组织炎症性反应并抑制其海马区神经元凋亡,具有一定的神经元保护作用。

复方丹参滴丸联合氨氯地平治疗原发性高血压的疗效及对血清Hcy、β2-微球蛋白、VEGF水平的影响

目的研究复方丹参滴丸以及氨氯地平联用对原发性高血压的疗效及对血清同型半胱氨酸(Hcy)、β2-微球蛋白、血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平的影响。方法选取2020年1月—2022年12月格尔木市人民医院收治的80例原发性高血压患者作为研究对象,依据随机数表法将其分为观察组和对照组,每组40例。对照组采用氨氯地平治疗,观察组在对照组治疗基础上联用复方丹参滴丸。评估并比较两组患者的眩晕昏蒙、项背强硬、肢体麻木、胸闷胸痛症状,且检测并比较血清Hcy、β2-微球蛋白和VEGF水平。结果观察组的有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者的眩晕昏蒙、项背强硬、肢体麻木和胸闷胸痛症状积分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者的眩晕昏蒙、项背强硬、肢体麻木和胸闷胸痛症状积分均明显降低(P<0.05),且观察组患者的眩晕昏蒙、项背强硬、肢体麻木和胸闷胸痛症状积分更低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者的血清Hcy、β2-微球蛋白和VEGF水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者的血清Hcy、β2-微球蛋白和VEGF水平均明显降低(P<0.05),且观察组患者的血清Hcy、β2-微球蛋白和VEGF水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论复方丹参滴丸以及氨氯地平联用对原发性高血压有显著的疗效,能明显降低Hcy、β2-微球蛋白和VEGF水平。

基于caspase-3/Bcl-2/Bax信号通路探究SMAC基因对肺腺癌细胞紫杉醇敏感度及细胞活性的影响

目的基于caspase-3/Bcl2/Bax信号通路探究SMAC基因对肺腺癌细胞紫杉醇敏感度及细胞活性的影响。方法建立肺腺癌紫杉醇耐药细胞株A549/Taxol,将细胞分为pcDNANC组(转染pcDNA-NC空白载体)、pcDNA-SMAC组(转染pcDNA-SMAC载体)、siRNA-NC组(转染siRNANC空病毒载体)和siRNA-SMAC组(转染siRNA-SMAC慢病毒载体)。qRT-PCR法检测细胞中SMAC mRNA表达;MTT法检测细胞敏感度;克隆实验法检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡能力;Western blot法检测细胞中caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果肺腺癌A549细胞较BEAS-2B正常细胞中SMAC mRNA表达明显降低(P<0.05)。pcDNA-SMAC组较pcDNA-NC组细胞中SMAC mRNA表达显著升高(P<0.05)。和siRNA-NC组相比,siRNA-SMAC组细胞中SMAC mRNA表达显著降低(P<0.05)。和pcDNA-NC组相比,pcDNA-SMAC组细胞IC_(50)、细胞克隆数、细胞侵袭能力及Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax比值均显著降低,细胞耐药指数逆转倍数为2.51倍,细胞凋亡能力及caspase-3和Bax蛋白表达明显高于pcDNA-NC组(P<0.05)。和siRNA-NC组相比,siRNA-SMAC组细胞IC_(50)、细胞克隆数、细胞侵袭能力及Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax比值均显著升高,细胞凋亡能力及caspase-3和Bax蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论高表达SMAC可增加肺腺癌细胞的紫杉醇敏感度、抑制细胞增长和侵袭、促进细胞凋亡,且对caspase-3/Bcl-2/Bax信号通路有一定调控作用。

丹参酮ⅡA对鼠脑缺血再灌注损伤Bcl-2和caspase-3表达的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA(Tan ⅡA)对缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2及caspase-3蛋白表达的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、Tan ⅡA低剂量治疗组和Tan ⅡA高剂量治疗组,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。Tan ⅡA高、低剂量治疗组于术前连续灌胃给予高、低剂量Tan ⅡA3d,每天1次。用免疫组化法观察缺血90min再灌注24h大鼠额顶部皮质Bcl-2和caspase-3蛋白表达,并进行2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色和HE染色观察脑梗死体积及病理形态学变化。结果:脑缺血再灌注24h,缺血再灌注组Bcl-2和caspase-3表达增加,与假手术组比较,差异具有显著性意义(P<0.05);与缺血再灌注组比较,Tan ⅡA高、低剂量治疗组均显著增加Bcl-2表达,减少caspase-3表达,高、低剂量组之间差异亦具有显著性意义(P<0.05)。Tan ⅡA高、低剂量治疗组脑梗死体积较缺血再灌注组减小,高、低剂量组之间差异具有显著性意义(P<0.05)。Tan ⅡA高、低剂量治疗组脑组织缺血损伤病理学改变明显轻于缺血再灌注组,TanⅡA高剂量治疗组缺血改变亦轻于低剂量治疗组。结论:Tan ⅡA对缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能与增加Bcl-2蛋白表达同时降低caspase-3蛋白表达有关。

丹参川芎嗪注射液对缺血性脑卒中患者血流变及外周血BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白水平的影响

目的：观察丹参川芎嗪注射液治疗缺血性脑卒中的临床疗效,并探讨其对血流变学及外周血BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白含量的影响。方法：2012年1月~2013年12月在河北医科大学第二医院神经内科收治的缺血性脑卒中患者96例,患者按随机数字表分为对照组和观察组,两组患者均接受常规基础治疗,观察组患者在常规治疗基础上接受丹参川芎嗪注射液进行治疗,疗程均为4周。治疗前及治疗4周评估患者神经功能缺损严重程度、患侧肢体运动功能、日常生活能力和生活质量,测定血流变学指标及外周血BCL-2、BAX和Caspase-3蛋白含量。结果：（1）治疗4周时观察组患者NIHSS评分均较对照组患者显著降低（P〈0.01）,而FMI、MBI和SIS较对照组患者显著升高（P〈0.01）;（2）治疗4周时观察组患者HCT、ESR、WBV和FIB均较对照组患者显著降低（P〈0.01）;（3）治疗4周时观察组患者外周血BCL-2蛋白含量较对照组患者显著升高（P〈0.01）,而BAX和Caspase-3蛋白含量较对照组患者显著降低（P〈0.01）。结论：丹参川芎嗪注射液对缺血性脑卒中具有显著疗效,可改善患者的神经功能、患侧肢体运动功能、日常生活能力和生活质量,其机制可能与调节BCL-2、BAX与Caspase-3蛋白表达进而抑制细胞凋亡以及改善患者血流变学有关。

清肺通络方调控Caspase-1对肺炎支原体诱导人正常肺上皮细胞BEAS-2B焦亡的干预作用

【目的】探讨清肺通络方(桑白皮、地骨皮等)对肺炎支原体(MP)诱导人正常肺上皮细胞BEAS-2B由半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路介导的细胞焦亡的干预作用。【方法】建立MP感染的BEAS-2B细胞模型,分别给予清肺通络方、Caspase-1抑制剂干预。制备过表达Caspase-1质粒,转染MP感染的BEAS-2B细胞,给予清肺通络方干预。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖活性,Western Blot法检测细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、消皮素D(GSDMD)、消皮素D-N端片段(GSDMD-N)的表达水平,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测细胞因子白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平,生化法检测乳酸脱氢酶(LDH)和Na+-K+-ATP酶活性,流式细胞术检测细胞焦亡。【结果】MP感染BEAS-2B细胞增殖活性明显降低,细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达水平均明显升高,下游细胞因子IL-1β和IL-18水平也显著升高,LDH活性明显升高,Na+-K+-ATP酶活性明显下降,细胞焦亡率显著上升。应用清肺通络方、Caspase-1抑制剂干预MP感染BEAS-2B细胞,及应用清肺通络方干预过表达Caspase-1质粒转染的MP感染BEAS-2B细胞后,细胞增殖活性均升高,细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达水平降低,下游细胞因子IL-1β和IL-18水平均显著降低,LDH活性明显降低、Na+-K+-ATP酶活性明显上升,细胞焦亡率明显下降。【结论】MP感染BEAS-2B细胞后,激活Caspase-1/GSDMD通路,促进炎症因子释放,使细胞结构受损,最终导致细胞焦亡。清肺通络方可以抑制Caspase-1/GSDMD通路的激活,减轻炎症反应,减轻细胞损伤,抑制细胞焦亡。

丹参酮ⅡA对慢性肾衰竭大鼠肾组织内质网应激相关分子GRP78、CHOP和Caspase-12表达的影响

目的:探究丹参酮ⅡA对慢性肾衰竭大鼠肾功能的保护作用机制。方法:60只SD雄性大鼠,随机分成5组,分别为:A正常组,B假手术组,C模型组,D模型+丹参酮ⅡA低剂量组,E模型+丹参酮ⅡA高剂量组。4周、8周、12周检测各组肌酐、尿素氮水平。12周时Tunel法检测细胞凋亡,Western blot法检测GRP78、CHOP和Caspase-12表达。结果:(1)C组较A组4周、8周、12周时肌酐、尿素氮升高(P<0.05);D组、E组分别与C组比较:8周、12周时较模型组肌酐、尿素氮水平下降(P<0.05);E组较D组12周时肌酐、尿素氮水平下降(P<0.05)。(2)C组凋亡细胞较A组、B组增多(P<0.05)。D组、E组凋亡细胞较C组减少(P<0.05),E组较D组凋亡细胞减少(P<0.05)。(3)C组与A组相比,GRP78、CHOP和Caspase-12表达均明显升高(P<0.05);D组、E组与C组相比:GRP78、CHOP和Caspase-12表达均下降(P<0.05);E组与D组比较:GRP78、CHOP和Caspase-12表达进一步下降(P<0.05)。结论:TanⅡA能够改善CRF大鼠肾功能,抑制细胞凋亡,其机制可能是通过调节内质网应激相关分子GRP78、CHOP和Caspase-12表达水平实现。

丹参酮ⅡA对心肌缺血再灌注BCL-2和Caspase-3表达的影响

为探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对心肌缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2及Caspase-3蛋白表达的影响,将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、TanⅡA低剂量治疗组和TanⅡA高剂量治疗组。用定量PCR方法观察缺血再灌注大鼠心肌Bcl-2和Caspase-3 mRNA表达,并采用末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡。结果为缺血再灌注组Bcl-2和Caspase-3表达增加;与缺血再灌注组比较,TanⅡA高、低剂量治疗组均显著增加Bcl-2表达,减少Caspase-3表达。TanⅡA高、低剂量治疗组心肌梗死体积较缺血再灌注组减小。TanⅡA高、低剂量治疗组心肌细胞凋亡明显轻于缺血再灌注组,TanⅡA高剂量治疗组细胞凋亡亦轻于低剂量治疗组。TanⅡA对缺血再灌注心肌损伤能抑制其细胞凋亡,对心肌具有保护作用,其机制可能与增加Bcl-2蛋白表达同时降低Caspase-3蛋白表达有关。