丹翘液对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症相关因子的抑制效应分析

为研究丹翘液的体外抗炎作用及其抗炎机制,利用LPS诱导巨噬细胞建立炎症模型,MTT法检测不同浓度丹翘液对RAW264.7细胞活力影响;NO测试盒检测丹翘液对LPS诱导的NO释放量的影响;ELISA方法检测丹翘液对LPS诱导的TNF-α、IL-6和PGE2分泌的影响;RT-PCR方法检测丹翘液对LPS诱导的TNF-α、IL-6、COX-2和iNOS基因转录的影响;Western blot检测对细胞核内NF-κB p65蛋白表达的影响。结果显示丹翘液小于700μg·mL-1对细胞无毒性作用;丹翘液各剂量组(100、300、600μg·mL-1)能不同程度地抑制LPS诱导的NO、PGE2、TNF-α和IL-6的分泌;能显著抑制iNOS、COX-2、TNF-α和IL-6基因转录和细胞核内NF-κB p65蛋白表达。丹翘液的抗炎作用机制可能与抑制NF-κB通路激活,进而抑制炎症介质和炎性细胞因子的转录和表达有关。

丹翘灌注液抗炎镇痛作用的研究

研究丹翘灌注液的抗炎镇痛作用。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、棉球致小鼠肉芽肿、小鼠醋酸扭体反应、小鼠福尔马林致痛模型观察丹翘灌注液的抗炎和镇痛作用。40、20、10 g/kg的丹翘灌注液能不同程度的抑制二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀、棉球引起的肉芽肿增生;不同程度的减少醋酸引起的小鼠扭体次数和福尔马林引起的舔足时间。结果表明,丹翘灌注液具有抗炎、镇痛的作用。

丹翘灌注液中连翘苷的含量测定

目的:建立丹翘灌注液中连翘苷的反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定方法。方法:采用SunfireC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水(25∶75),流速:1.0 mL/min;双波长吸光度检测器,检测波长:277 nm;柱温:30℃。结果:连翘苷在0.442-3.978 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率为99.75%,RSD为0.4%。结论:该法灵敏、简便、快速、准确,是测定丹翘灌注液中连翘苷的理想方法,可用于该制剂的质量控制。

HPLC法测定丹翘灌注液中丹参酮Ⅱ_A的含量

测定丹翘灌注液中丹参酮Ⅱ_A含量。采用高效液相色谱法,色谱柱:Kromasil:100-5 C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-水(75:25),流速:1.0 mL/min,柱温:30℃,检测波长:270 nm。结果:丹参酮Ⅱ_A在0.217 6-2.176 0μg范围內线性关系良好(r=0.9997),丹参酮Ⅱ_A的平均回收率为100.03%,RSD为0.57%。丹翘灌注液中丹参酮Ⅱ_A含量为0.9797 mg/mL。结果表明采用高效液相色谱法测定丹翘灌注液中丹参酮Ⅱ_A含量简便、快速、灵敏、准确,可用于该制剂中丹参酮Ⅱ_A的含量测定。