丹芍化纤方对CCl_4损伤大鼠原代肝细胞保护作用的研究

目的探讨丹芍化纤方抗肝纤维化作用的机制。方法采用Ⅳ型胶原酶消化及Ficoll密度梯度离心的方法,分离、培养大鼠肝细胞,先加入5%、10%和20%药物血清干预体外培养的肝细胞24h,再用四氯化碳(CCl4)蒸熏法制造肝细胞损伤模型。分别用MTT法及荧光实时定量PT-PCR(RealTimeRT-PCR)法检测CCl4损伤肝细胞的增殖、天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3(cysteinylaspartate-specificprotease,cas-pase-3)mRNA表达,并检测细胞培养上清中的谷草转氨酶(aspartatetransaminase,AST)活性。结果丹芍化纤方药物血清能促进损伤肝细胞的增殖,下调肝细胞内caspase-3mRNA的表达,降低培养上清中的AST活性,与正常大鼠血清比较差异有显著性,呈明显的血清浓度依赖关系。结论丹芍化纤方抗肝纤维化机制与其抑制肝细胞凋亡、保护肝细胞免受损害有关。

丹芍化纤方对大鼠肺纤维化NF-κB与氧化应激的影响

目的观察博莱霉素致大鼠肺纤维化中核转氯因子-κB(NF-κB)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的变化及丹芍化纤方对其的影响。方法选取SD大鼠30只,随机分为正常对照组(正常组)、肺纤维化模型组(模型组)和丹芍化纤方治疗组(丹芍组),每组各10只。正常组气管内滴注生理盐水,模型组和丹芍组气管内一次性灌注博来霉素5 mg/kg诱导肺纤维化,丹芍组于造模第2天开始每天给予丹芍化纤方灌胃(0.8 g/kg)治疗,正常组及模型组则给予等量生理盐水灌胃。实验第28天称大鼠体重,处死各组大鼠,称肺湿重并收集肺组织,行苏木精-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色观察肺组织病理变化;比色法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)、SOD及MDA变化;采用免疫组织化学的方法检测肺组织中NF-κB蛋白的表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠肺组织中MDA含量及NF-κB表达明显升高,而SOD酶活性则显著下降。与模型组比较,丹芍组大鼠肺组织中MDA含量及NF-κB蛋白表达明显降低,但仍较正常组高;SOD酶活性显著回升,但未恢复正常水平。结论丹芍化纤方早期应用可在一定程度上减轻博来霉素诱导的肺泡炎症反应及肺纤维化进展,对肺纤维化具有一定的治疗作用。丹芍化纤方对肺纤维化的干预机制可能与提高肺组织SOD酶活性、对抗氧化应激、抑制肺组织中NF-κB的表达、减轻肺泡炎症有关。