丹芪合剂对DM大鼠肾小管BMP-7及其受体表达的影响

目的观察丹芪合剂和依那普利对糖尿病(DM)大鼠肾小管上皮细胞骨形态发生蛋白-7(BMP-7)及其受体ALK-3表达的影响,探讨丹芪合剂的药理机制。方法将SD大鼠分为正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)、糖尿病丹芪合剂组(C组)和糖尿病依那普利组(D组)。以链脲佐菌素复制DM大鼠模型。于实验12周处死大鼠后测定相应生化指标和肾脏指数,PAS染色观察肾组织的形态结构变化;免疫组化检测肾小管上皮细胞BMP-7和FN蛋白的表达;RT-PCR方法检测肾皮质BMP-7和ALK-3 mRNA水平。结果①B组的血糖、甘油三酯和总胆固醇、血肌酐、肾脏指数均显著高于A组并出现明显的蛋白尿,C和D组上述指标除血糖外均明显低于B组。②免疫组化结果显示BMP-7蛋白高表达于A组肾小管上皮细胞胞浆,FN仅有少量表达;B组BMP-7蛋白的表达明显减少,FN表达却明显增多;C和D组肾小管上皮细胞BMP-7蛋白表达显著高于B组,但低于A组,同时FN的表达减少。③RT-PCR结果显示,与A组相比,B组肾皮质BMP-7表达明显减少,且ALK-3 mRNA未见表达,C和D组BMP-7及其受体ALK-3 mRNA表达均显著高于B组,D组ALK-3 mRNA表达甚至高于A组。结论丹芪合剂和依那普利可能通过促进内源性BMP-7及其受体ALK-3的表达,使FN的沉积减少,从而对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。

丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾小管HGF和SnoN表达的影响

目的观察丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾小管HGF和SnoN表达的影响。方法 SD大鼠随机分为4组:正常对照组(N组),糖尿病组(D组),中药丹芪合剂治疗组(Y组),依那普利治疗组(E组)。采用链脲佐菌素尾静脉注射(55mg/kg)的方法复制糖尿病模型。生化方法测血糖、24h尿蛋白、血肌酐、甘油三酯、胆固醇,并计算肾脏指数。HE染色光镜检查肾组织形态学变化。免疫组化观察大鼠肾脏SnoN、HGF、TGF-β1、FN蛋白表达情况,Western blotting检测大鼠肾脏SnoN、HGF、TGF-β1蛋白的表达。结果 D组肾脏指数、血糖、24h尿蛋白、血肌酐、甘油三酯、胆固醇较N组明显升高;Y组和E组与D组大鼠相比,血肌酐、24h尿蛋白量及甘油三酯显著降低。②D组大鼠出现明显的肾脏形态学改变,Y组和E组明显改善。③免疫组化和Western blotting结果显示:D组大鼠SnoN和HGF较N组明显降低,Y组和E组明显高于D组;D组TGF-β1和FN明显高于N组,Y组和E组则较D组明显下降。结论丹芪合剂和依那普利可能通过促进HGF生成,从而抑制TGF-β1的产生,以及促进SnoN表达进而抑制TGF-β1/Smad信号通路,使糖尿病肾病得到改善。

依那普利和丹芪合剂对糖尿病大鼠肾组织结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨依那普利和丹芪合剂对糖尿病大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)及蛋白激酶Cα(PKCα)表达的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组(A组)、糖尿病组(B组)、糖尿病丹芪合剂组(C组)和依那普利组(D组)。尾静脉注射链脲佐菌素复制糖尿病模型。用免疫组化检测肾组织CTGF、PKCα、纤维连接蛋白(FN);Western印迹法检测肾组织CTGF蛋白水平;光镜观察肾组织的形态结构变化;生化方法检测尿蛋白、血糖、血脂和血肌酐。结果:12周后,药物处理的糖尿病大鼠肾组织CTGF、PKCα、FN表达高于正常组,但低于未处理的糖尿病组,血肌酐和尿蛋白水平较低,肾脏病理改变较轻,同时CTGF与PKCα和FN及肾脏指数和肾功能呈显著正相关。丹芪合剂组动物与未处理组相比,血脂水平较低。结论:依那普利和丹芪合剂可能通过PKC信号通路而抑制CTGF的表达,使FN的生成减少,从而对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。

丹芪合剂对糖尿病肾病大鼠肾脏组织TIMP-1,TIMP-2表达的影响

目的观察丹芪合剂对糖尿病(DM)大鼠肾组织金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1),金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响。探讨其延缓肾纤维化的潜在机制。方法 SD大鼠随机分为正常组(A组)、糖尿病组(B组)、糖尿病丹芪合剂组(C组)和依那普利组(D组)。尾静脉注射链脲佐菌素复制糖尿病模型。丹芪合剂和依那普利处理相应DM大鼠。12周后处死大鼠。生化方法检测血糖、血肌酐和尿蛋白。HE染色观察肾脏病理变化。免疫组化检测肾组织TIMP-1、TIMP-2、纤维连接蛋白(FN)和转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白水平;RT-PCR检测TIMP-1和TIMP-2mRNA水平。结果与正常组比较,糖尿病大鼠血糖、血肌酐、蛋白尿、肾脏指数增加,肾组织TIMP-1、TIMP-2蛋白及mRNA、FN及TGF-β1蛋白表达增高。与DM组相比,丹芪合剂组TIMP-1、TIMP-2蛋白和mRNA水平降低,FN沉积减少且血肌酐、蛋白尿减轻,肾脏指数降低且病理改变减轻。同时TGF-β1蛋白减少并与TIMP-1和TIMP-2蛋白呈显著正相关。丹芪合剂组与依那普利组相比,TIMP-1、TIMP-2、TGF-β1、FN表达无明显差异。结论丹芪合剂可能通过抑制TGF-β1而下调TIMP-1、TIMP-2基因和蛋白表达,促进细胞外基质降解,从而延缓糖尿病大鼠肾脏纤维化的进展。

丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾组织PTEN的影响

目的研究丹芪合剂和依那普利对糖尿病(DM)大鼠肾组织第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)表达的影响,探讨丹芪合剂和依那普利治疗糖尿病肾病(DN)的作用及机制。方法将SD大鼠分成对照组、糖尿病组、丹芪合剂治疗组和依那普利治疗组(n=8)。尾静脉注射链脲菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型;12周处死大鼠,检测相应生化指标和计算肾脏指数;观察肾组织病理学改变;免疫组化和Western blotting检测肾组织PTEN、TGF-β1、p-AKT1(Ser473)和FN蛋白的表达;RT-PCR检测PTENmRNA的表达。结果丹芪合剂和依那普利能减轻DM大鼠肾脏肥大,显著改善肾功能,减轻DN肾脏病变及肾间质FN表达,下调TGF-β1和p-AKT1(Ser473)表达,上调PTEN蛋白和mRNA的表达。结论丹芪合剂和依那普利可能通过上调肾组织PTEN表达,抑制AKT1激活,减少FN的沉积,减轻或延缓了DN的病变。

丹芪合剂对糖尿病大鼠肾小管p38MAPK表达的影响

目的:观察丹芪合剂对糖尿病大鼠肾小管p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响,从而探讨其防治糖尿病肾病的机制。方法:设立正常对照组(NG)、糖尿病组(DG)和糖尿病丹芪合剂治疗组(DQT),链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,12周后测定大鼠血糖、血肌酐和24 h尿蛋白及肾脏指数;PAS染色观察肾脏病理变化;免疫组织化学方法检测肾小管p38MAPK和FN蛋白的表达;RT-PCR方法检测肾皮质p38MAPK mRNA的水平。结果:与NG相比,DG大鼠血糖、血肌酐、24 h尿蛋白及肾脏指数均显著升高,肾小管上皮细胞p38MAPK蛋白及mRNA和FN蛋白表达明显增多,DQT除血糖外,血肌酐和24 h尿蛋白均显著下降,p38MAPK蛋白及mRNA和FN蛋白表达明显减少。结论:丹芪合剂可能通过抑制p38MAPK的表达而减少FN的分泌和沉积,延缓糖尿病肾小管间质损害的进程。

丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾脏VEGF mRNA的影响

目的:探讨丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾脏病理结构和血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维素连接蛋白(FN)表达的影响。方法:雄性SD大鼠24只随机分成4组,分别为正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)、依那普利治疗组(E组)以及丹芪合剂治疗组(Y组)。尾静脉注射链脲菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型,12周处死大鼠,生化方法测血糖、血肌酐、胆固醇、甘油三脂及24h尿蛋白量,计算肾脏指数(KI);HE染色光镜观察肾组织形态;免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1、FN的表达;RT-PCR检测肾组织VEGFmRNA表达情况。结果:与C组相比,糖尿病大鼠KI、血糖、血肌酐、胆固醇、甘油三脂、24h尿蛋白量均显著增高并出现蛋白尿,E组和Y组大鼠除血糖、KI外均显著低于D组。免疫组织化学结果显示正常肾组织中TGF-β1几乎没有阳性染色,FN有少量表达,而DN时,TGF-β1和FN表达都显著增加(P<0.01),E组和Y组大鼠,FN和TGF-β1表达下调(P<0.01)。RT-PCR结果提示,与C组相比,D组VEGFmRNA明显上调(P<0.05),而E组和Y组大鼠较D组表达减少。结论:依那普利和丹芪合剂对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与其下调肾组织中VEGFmRNA有关。

丹芪合剂对糖尿病肾病大鼠肾脏组织Snail1表达的影响

目的观察丹芪合剂对糖尿病大鼠肾组织Snail1表达的影响,探讨其肾脏保护的可能机制。方法 SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)、丹芪合剂组(C组)和依那普利组(D组)。尾静脉注射链脲佐菌素复制糖尿病模型。生化方法检测尿蛋白、血糖和血肌酐。免疫组织化学法检测肾组织Snail1、E-钙黏素(E-cadherin)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)蛋白水平;反转录-聚合酶链式反应检测Snail1mRNA水平。结果 12周后,药物处理的糖尿病大鼠肾组织Snail1、FN蛋白表达高于正常对照组,但低于未处理的糖尿病组;E-cadherin表达低于正常对照组但高于糖尿病组。Snail1蛋白与E-cadherin蛋白呈显著负相关。Snail1mRNA与其蛋白表达一致。丹芪合剂组与依那普利组相比,Snail1蛋白和mRNA,以及E-cadherin、FN蛋白表达无明显差异。药物组血肌酐和尿蛋白水平低于糖尿病组,但高于正常对照组。结论丹芪合剂可能通过下调Snail1的表达,抑制上皮细胞-间充质转分化(EMT),使FN的生成减少,从而对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。

丹芪合剂下调糖尿病肾病大鼠肾组织Akt1的表达

目的:观察丹芪合剂对糖尿病大鼠肾组织蛋白激酶B(PKB/Akt1)表达的影响,探讨其保护肾脏的机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病丹芪合剂组(2 g.kg-1)和依那普利组(10 mg.kg-1)。单次尾静脉注射链脲佐菌素复制糖尿病模型。生化方法检测血糖、尿蛋白和血肌酐。免疫组化检测肾组织Akt1、E-钙黏素(E-cadherin)、纤维连接蛋白(FN)蛋白表达;Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白水平;RT-PCR检测Akt1 mRNA水平。结果:丹芪合剂明显降低DM大鼠肾组织Akt1蛋白和mRNA表达(P<0.01);同时上调E-cadherin蛋白表达并下调α-SMA表达,使FN沉积减少(P<0.01);降低DM大鼠血肌酐和尿蛋白水平(P<0.05)。丹芪合剂组与依那普利组之间无统计学差异。结论:丹芪合剂可能通过抑制Akt信号分子,进而抑制上皮细胞-间充质细胞转化,减少FN沉积,对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。

丹芪合剂对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞骨形态发生蛋白-7和蛋白激酶Cα表达的影响

目的观察丹芪合剂对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞骨形态发生蛋白-7(BMP-7)、蛋白激酶Cα(PKCα)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响,以期进一步探讨丹芪合剂防治糖尿病肾病的作用机制。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组和丹芪合剂组,以链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型,喂养12周后处死大鼠,生化方法测定大鼠血糖、血肌酐(Scr)和24h尿蛋白及肾脏指数;PAS染色观察肾脏病理改变;免疫组化检测肾小管上皮细胞BMP-7、PKCα、AngⅡ和FN蛋白的表达;RT-PCR方法检测肾皮质BMP-7、PKCα和AngⅡmRNA的水平。结果与对照组相比,模型组大鼠血糖、Scr、24h尿蛋白及肾脏指数均显著升高,肾小管上皮细胞PKCα、AngⅡ的蛋白及mRNA、FN蛋白的表达明显增多,而BMP-7蛋白和mRNA的表达明显减少;丹芪合剂组上述升高指标均显著低于模型组,并且PKCαmRNA未见表达,同时BMP-7蛋白和mRNA的表达却明显增加;相关分析显示模型组、丹芪合剂组肾小管上皮细胞BMP-7分别与PKCα、AngⅡ和FN蛋白的表达呈显著负相关(P<0.05)。结论丹芪合剂可能通过下调肾小管上皮细胞PKCα和AngⅡ及上调BMP-7表达,使FN的沉积减少,从而发挥对糖尿病大鼠肾小管间质损伤的保护作用。

丹芪合剂对糖尿病大鼠肾组织Smurf 2信号通路的调节作用研究

目的:观察丹芪合剂对糖尿病(DM)大鼠肾组织Smad泛素化调节因子2(Smurf 2)表达的影响,初步探讨丹芪合剂抑制糖尿病肾病(DN)的分子机制。方法:链脲佐菌素诱导1型DM大鼠模型,分为正常组、DM组和丹芪合剂1.8 g·kg-1治疗组;12周处死各组大鼠,HE染色观察胰腺和肾组织病理学改变;免疫组化和Western blot测肾组织Smurf 2、核转录共抑制因子(SnoN)、转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化Smad 2和Smad 3表达。结果:与正常组相比,DM组肾组织Smurf 2蛋白显著增加,SnoN蛋白表达下调,TGF-β1、磷酸化Smad 2和磷酸化Smad 3蛋白上调;与DM组相比,丹芪合剂治疗组Smurf 2蛋白显著减少,SnoN蛋白上调,TGF-β1和磷酸化Smad 2蛋白下调,磷酸化Smad 3无显著差异。结论:丹芪合剂作用机制可能与减少Smurf 2蛋白表达、进而抑制SnoN蛋白泛素化降解有关。

丹芪护肝合剂治疗慢性乙型肝炎98例临床观察

目的丹芪护肝合剂治疗慢性乙型肝炎临床疗效观察。方法从门诊和住院病例中,随机分为治疗组和对照组,治疗组服用丹芪护肝合剂,对照组服用肝毒净颗粒,分别观察疗效。结果治疗组和对照组在治疗6个月后,有效率差异无统计学意义(P>0.05)。结论丹芪护肝合剂治疗慢性乙型肝炎值得进一步的临床应用研究。

黄芪丹参合剂对气虚血瘀型冠心病经皮冠状动脉介入治疗术后肾脏保护的临床研究

目的探讨黄芪丹参合剂对气虚血瘀型冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后肾脏功能的保护作用。方法将300例气虚血瘀型冠心病PCI术患者随机分为对照组和观察组,每组150例,对照组PCI围术期行常规水化疗法,观察组在对照组基础上加服黄芪丹参合剂。分别于术前及术后24、48 h行肾功能指标血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(eGFR)及血清胱抑素C(CysC)、β2微球蛋白(β2MG)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)的测定,并观察记录两组术后48h内造影剂肾病(CIN)及出院1个月不良事件发生情况。结果术后24 h,两组Scr、BUN、CysC、β2MG、NGAL相比术前均明显增高(P<0.05),eGFR相比术前均明显降低(P<0.05);术后48h,观察组上述血液指标均基本恢复至术前水平(P>0.05),而对照组与术前相比差异有统计学意义(P<0.05);在术后24 h、48 h的比较上,观察组Scr、BUN、CysC、β2MG、NGAL均明显低于对照组(P<0.05),eGFR均明显高于对照组(P<0.05)。观察组术后48 h内CIN发生率低于对照组(6.67%vs 20.67%),差异均有统计学意义(P<0.05);两组出院1个月不良事件发生率对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芪丹参合剂对气虚血瘀型冠心病患者PCI术后肾脏功能具有保护作用,能够有效预防CIN的发生。