主动外排系统介导的大肠杆菌多重耐药性的确证

为检测和证实主动外排系统 (外输泵 )在细菌多重耐药机制中的作用 ,用四环素和水杨酸钠对大肠杆菌质控株进行了体外人工诱导 ,筛选出多重耐药株 ,再用能量抑制剂 CCCP(Carbongl cyanide m- chloropheyhydrazone)对耐药株和质控株进行了环丙沙星摄取抑制试验。结果 :在耐药株 ,其菌体内环丙沙星稳态浓度明显低于质控株 ;多重耐药株在有 CCCP存在时 ,菌体内环丙沙星的浓度随时间的延长而递增 ,而无 CCCP的抑制时 ,菌体内环丙沙星的浓度递增缓慢 ;在质控株 ,不论有无 CCCP存在 ,菌体内环丙沙星的浓度都随时间的延长而呈递增趋势 ,且保持较耐药株明显高的水平。结论 :体外诱导多重耐药大肠杆菌多重耐药性的产生 。

鲍曼不动杆菌主动外排系统AdeABC、AdeIJK与多重耐药相关性

了解本地区鲍曼不动杆菌主动外排系统的分布并探讨其在介导细菌多重耐药中的作用。方法琼脂二倍稀释法检测20种抗菌药物对鲍曼不动杆菌临床分离株的MIC;PCR扩增AdeABC-AdeRS、AdeUK两种RND主动外排系统的结构和调节基因。结果112株鲍曼不动杆菌临床分离株对亚胺培南/西司他丁和美罗培南耐药率分别为0.9%和1.8%,对大多数抗菌药物的耐药率均大于60%,但对多黏菌素B和米诺环素均敏感。75.9%的菌株同时检出adeABC-adeRS和adeIJK主动外排基因,6.3%仅检出adeIJK。同时检出adeABC-adeRS和adeIJK的菌株耐药率较高。结论本地区鲍曼不动杆菌临床分离株多重耐药情况严重。adeABC和adeIJK在鲍曼不动杆菌临床分离株有较高检出率。AdeABC主动外排系统在鲍曼不动杆菌多重耐药性的形成中起重要作用。

主动外排系统acrAB在临床分离肺炎克雷伯菌中的分布和表达

目的:研究临床分离多重耐药肺炎克雷伯菌的耐药机制,检测肺炎克雷伯菌中有无类似大肠埃希菌主动外排系统AcrAB的结构基因acrAB的分布和表达。方法:用聚合酶链反应(PCR)检测acrAB基因在临床分离的肺炎克雷伯菌和肺炎克雷伯菌标准菌株(ATCC 10031)中分布,用逆转录(RT)-PCR测定其 mRNA表达水平,并对 PCR扩增的 ATCC 10031的acsAB基因片段进行序列分析,同大肠埃希菌acrAB基因的相应序列进行同源性比较。结果:在所有被检的临床分离肺炎克雷伯菌和 ATCC 10031的染色体中均发现有类似大肠埃希菌的 acrAB基因;肺炎克雷伯菌多重耐药菌株 acrAB的 mRNA水平显著高于敏感野生株和耐药谱不同的菌株,而耐药谱不同的菌株仅略高于敏感菌株;PCR扩增的 ATCC 10031的 acrAB基因片段同大肠埃希菌acrAB基因相应片段,在核苷 序列上具有很高的同源性。结论:本研究表明在肺炎克雷伯菌中有类似大肠埃希菌的acrAB基因存在,其表达水平决定了多重耐药表型。

鲍曼不动杆菌的多重耐药性与主动外排系统

鲍曼不动杆菌的多重耐药现象日益严重,给临床抗菌药物的应用带来威胁,其多重耐药机制复杂,其中主动外排是主要原因之一。该文系统综述易化子超家族、耐药结节分化超家族和多药及毒物外排家族的5种主动外排系统的结构,外排机制及调节通路,分析多重耐药与主动外排系统的关系,为新型抗菌药物的设计提供新思路。

铜绿假单胞菌主动外排系统研究进展

主动外排系统在铜绿假单胞菌耐药形成过程中起到重要作用,近年来对其的研究也愈来愈多。截止到目前为止,在铜绿假单胞菌中总共发现了13种外排泵,其中12种属于耐药节结细胞分化(resistance nodulation cell division,RND)家族的外排泵,另外1种属于多药和毒物化合物外排家族(multidrug and toxic compound extrusion family,MATE)。本文就铜绿假单胞菌13种外排泵的底物谱、调控机制以及相关的基础研究进展进行综述。

鲍曼不动杆菌主动外排系统和NDM-1基因分布特征及与耐药表型的关系

目的了解鲍曼不动杆菌主动外排系统(外排泵)基因和新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1)基因的分布情况,并分析其与细菌耐药表型的关系。方法采用琼脂二倍稀释法检测13种抗生素对81株鲍曼不动杆菌临床分离株的最低抑菌浓度(MICs),根据外排泵抑制剂PAβN处理前后MICs的变化判定外排泵表型。利用PCR扩增技术检测外排泵基因adeABC、adeIJK和adeFGH以及NDM-1基因blaNDM-1在临床分离株中的分布特征,根据外排泵基因的检出情况将临床分离株进行分组并比较耐药率。结果 81株鲍曼不动杆菌对临床常用的13种抗生素普遍耐药,43株(53%)外排泵表型试验阳性,对米诺环素的耐药率最低(30.9%),其次为亚胺培南,对其余抗生素的耐药率均超过60%,对头孢西丁和复方新诺明的耐药率较高,分别为97.5%和93.8%。在AdeABC外排泵基因阳性的菌株中,adeB、adeS和adeR的检出率分别为78%、78%和74%;在AdeIJK和AdeFGH外排泵基因中,adeJ、adeL、adeF、adeG和adeH的检出率均>90%;外排泵基因adeB、adeJ和adeG全部阳性的60株鲍曼不动杆菌的多重耐药最为严重,耐药基因阳性组的耐药率明显高于相对基因阴性组。32株鲍曼不动杆菌被检测出携带blaNDM-1基因。结论本地区鲍曼不动杆菌临床分离株多重耐药情况严重,存在blaNDM-1基因的克隆传播。AdeABC、AdeIJK和adeFGH外排泵基因在鲍曼不动杆菌临床分离株中的检出率较高。主动外排系统和NDM-1在鲍曼不动杆菌多重耐药性的形成中起重要作用。

伤寒沙门菌多重耐药主动外排系统基因检测与序列分析

目的 :以聚合酶链反应 (PCR)检测伤寒沙门菌敏感株 2 75及其第 2代诱导耐药菌OM 2、182acrB主动外排基因并分析序列。方法 :参考伤寒沙门菌基因库序列 (No .AL6 2 72 6 7)设计引物 ,对伤寒沙门菌 2 75、OM 2、182PCR扩增acrB基因 ,以证实acrAB外排系统的存在 ,并对 3株伤寒沙门菌扩增所得的acrB测序并分析其序列。结果 :伤寒沙门菌 2 75、OM 2、182PCR均扩增出 4 4 9bp的产物带 ,序列分析示伤寒沙门菌 2 75、OM 2仅 2处碱基与参考序列不同 (同源性 99.5 5 % ) ,推定编码的氨基酸相同 (同源性 10 0 % ) ,伤寒沙门菌 182除 2处碱基不同外 ,另有 2处存在碱基插入 ,因其序列已被打乱 ,无法进行氨基酸推测。结论 :伤寒沙门菌存在主动外排系统 ,是产生高水平耐药及多重耐药的基础。

铜绿假单胞菌主动外排系统MexAB-OprM的研究进展

医院感染在感染性疾病中占有相当比例。院内感染的病原菌中,铜绿假单胞菌的感染高居榜首,且耐药状况十分严重。主动外排系统是细菌存在耐药性并发生获得性多重耐药的主要原因。M exAB-OprM型外排系统因具有广谱的外排活性成为铜绿假单胞菌最具临床意义的药物外排系统。本文对细菌主动外排系统的分类,PA M exAB-OprM外排系统的组成、结构、重要作用及表达调控予以综述,并对其治疗研究作出展望。

多重耐药鲍曼不动杆菌主动外排系统adeA的分布

目的探讨主动外排系统adeA与鲍曼不动杆菌多重耐药的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)筛选鲍曼不动杆菌的主动外排基因adeA,应用琼脂稀释法检测主动外排抑制剂碳酰氰间氯苯腙(CCCP)联合抗菌药物对多重耐药鲍曼不动杆菌生长的影响。结果收集的60株鲍曼不动杆菌临床分离株对亚胺培南、美罗培南耐药率分别80.0%和81.7%,对其它大多数抗菌药物的耐药率为90%以上;60株临床分离株检测出adeA主动外排基因52株,检出率为86.7%;CCCP可减少多重耐药鲍曼不动杆菌对抗菌药物的外排作用,增加抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的抑制率。结论鲍曼不动杆菌是医院感染重要的多重耐药病原菌,adeA主动外排作用可能在本地区鲍曼不动杆菌多重耐药中发挥非常重要的作用。

主动外排系统与结核分枝杆菌耐药

目前结核分枝杆菌的耐药问题已引起研究人员的广泛关注,结核分枝杆菌的主动外排系统是引起细菌多药耐药的主要原因之一。本文主要介绍了与耐药相关的几类主动外排系统各家族成员的结构及生物学功能等,以及其抑制剂的研究进展。

淋病奈瑟菌多重传递耐药主动外排系统的研究进展

淋病奈瑟菌多重传递耐药系统属于细菌的主动外排系统,与淋球菌多重耐药的发生有密切关系。本文就该系统的组成、功能、基因调控及与淋球菌多重耐药间关系等方面的研究现状作一概述,并讨论对该系统进一步研究的意义。

主动外排系统与念珠菌的多重耐药

近年真菌感染大幅度增加 ,随着三唑类抗真菌药大剂量、长疗程使用 ,多重耐药株感染导致的治疗失败也呈增加趋势 ,对耐药念珠菌的研究发现 ,多重耐药与真菌细胞膜上主动外排泵的活化密切相关 ;与多重耐药相关的主动外排系统有ATP结合盒超家族 (cdr1与cdr2 )和主要易化因子超家族 (CaMDR和flu1) ,临床分离的敏感株和耐药株应用Southernblot及限制性核酸内切酶片段长度多态性分析表明 ,两者在基因型上无明显的差异 ,而Northernblot发现 ,两者在主动外排泵基因的mRNA上差异明显 ,表明耐药的发生是源于基因表达的异常而不是基因扩增所致 ,而启动子区上游 5 0 0bp的碱基序列分析 ,未发现能增加基因表达的突变 ,进一步的研究发现 ,基因表达的增加源于反式调节因子对启动子的激活。

江西省多重耐药铜绿假单胞菌主动外排系统耐药与相关机制研究

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa ，PA ）所涉及耐药机制相当复杂，包括抗生素灭活酶或修饰酶的生成、外膜低渗透性、外膜孔蛋白缺失、生物膜形成和主动外排等［1］。其中外排泵系统是 PA 主要的耐药机制。我们对 MexAB‐OprM 、MexCD‐OprJ 、MexEF‐OprN 、MexXY‐OprM4种主动外排系统在江西省地区南昌大学第一附属医院，九江市第一人民医院等几家医院多重耐药铜绿假单胞菌中高表达情况、可能调控机制进行研究，为临床治疗和药物开发提供思路和依据。

铜绿假单胞菌主动外排系统与耐药性关系的研究

铜绿假单胞菌是一种重要的院内感染条件致病菌,常感染癌症患者、烧伤患者等机体免疫力低下的患者,它对多种不同理化性质的药物高度耐药,其主动外排系统在耐药性中起主要作用.主要研究了铜绿假单胞菌主动外排泵的类型、组成及对抗生素耐药性的影响.

主动外排系统介导的乳中双歧杆菌耐药性的确证

了解双歧杆菌对环丙沙星的耐药关系,确证其耐药机制——外排系统的存在。对双歧杆菌标准菌株和从酸奶中分离的4株双歧杆菌菌株进行环丙沙星的耐药性试验,从中筛选出耐药菌株,再用质子泵抑制剂2,4-二硝基酚结合荧光分光光度法检测了耐药菌株和标准菌株对环丙沙星的摄取情况。通过对比2,4-二硝基酚存在与否菌体对环丙沙星的摄取量变化,从而确证了双歧杆菌外排系统的存在。实验表明:双歧杆菌有外排系统作用介导的对环丙沙星耐药的机制。

不动杆菌属菌种主动外排系统的研究进展

不动杆菌属是一种非发酵糖的革兰阴性球杆菌，广泛分布于自然界及健康人的皮肤表面，耐受干燥及普通消毒剂，是院内感染的重要病原菌，主要引起医院获得性肺炎、败血症、尿道感染，以及免疫缺陷患者、术后患者感染。近年来，对碳青霉烯类抗生素耐药的不动杆菌已成为国际社会讨论的热点话题之一，因为一旦亚胺培南耐药，就意味着对现有多种抗菌药物耐药，如今已出现越来越多的泛耐药不动杆菌造成院内感染暴发流行的报道，值得我们关注。

多重耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM、MexXY-OprM主动外排系统的耐药作用

目的探讨MexAB-OprM、MexXY-OprM主动外排系统(外排泵)在多重耐药铜绿假单胞菌耐药机制中的作用。方法选取25株外科监护室分离的多重耐药铜绿假单胞菌,用实时定量RT- PCR测定结构基因mexA、mexX的mRNA表达水平来判断MexAB-OprM、MexXY-OprM外排泵表达情况；用PCR分别扩增其调控基因mexR、mexZ,并对其产物测序,用Blast软件在GenBank与已知序列比较,研究其过度表达的机理。结果25株多重耐药铜绿假单胞菌中,14株高表达MexAB-OprM系统(56％),3株高表达MexXY-OprM系统(12％),这3株菌同时高表达2种外排泵。在8株mexA高表达的菌株中,5株菌发生mexR基因突变,出现氨基酸替代,1株mexR提前出现终止密码子,2株菌未发现mexR基因突变。2株mexX高表达的菌株均发生基因mexZ突变,出现氨基酸替代。结论主动外排系统MexAB-OprM、MexXY-OprM在多重耐药铜绿假单胞菌中过度表达,是此菌多重耐药机制之一；外排泵MexAB-OprM、MexXY-OprM高表达分别与调控基因mexR、mexZ发生变异有关,同时存在其他调控机制。

主动外排系统介导阴沟肠杆菌耐药机制新进展

阴沟肠杆菌（ECL）是存在于人和动物肠道内的正常菌群，由阴沟肠杆菌导致的感染多与严重的基础疾病，以及长期应用广谱抗菌药物和免疫抑制剂等因素有关，已成为院内获得性感染越来越重要的病原菌。近年来，由于长期和不合理使用广谱抗菌药物，使细菌产生多药耐药性（MDR）成为全球医疗难题。