自体肿瘤疫苗主动特异性免疫治疗进展期肿瘤的初步研究

目的 :探讨自体肿瘤疫苗的作用机制及临床意义。方法 :30例进展期肿瘤病人术后 ,以自体肿瘤疫苗辅助主动免疫治疗。术后第 4周开始接种 (共 4次 ,每次间隔 7～ 10d) ;接种前 3天及 4次接种后 1w ,采集外周血 ,分离单个核细胞 ,测定CD+8 IFN γ+ ,CD+8 IL 10 + 细胞比例及CD+4 IFN γ+ 、CD+4 IL 10 + 细胞比例 ;同时采集血清检测血清IFN γ、IL 10水平 ;用PPD及自体抗瘤抗原做皮肤迟发型过敏反应试验 ,4 8h后测量红斑、硬结大小 (mm)。临床随访。结果 :自体免疫苗治疗后 :①血清IFN γ水平升高 ,高 (5 98± 2 4 0 )pg ml升至 (11 2 0± 4 76 )pg ml;而IL 10水平由 (2 6 0 4± 12 85 )pg ml降至 (8 12± 3 6 9)pg ml,差异有非常显著性 (P <0 0 5 )。②CD+8 IFN γ+ 双阳性细胞比例由 (3 72± 1 5 6 ) %升至 (8 0 1± 2 5 4 ) % ;CD+4 IFN γ+ 双阳性细胞比例由 (4 5 2± 1 0 8) %升至 (7 94± 2 0 6 ) %。差异有非常显著性 (P <0 0 5 )。③治疗前后病人对自体肿瘤抗原的特异性DTH反应明显增强 (P <0 0 1)。④病人耐受性良好 ,无溃疡等严重副作用发生。⑤随访结果显示 :2 2例病人无瘤生存时间超 3年 ,其中部分病人无瘤生存时间超过 5年。结论 :①自体肿瘤疫苗可激发病人特异性细胞介导的免疫反?

进展期肿瘤主动特异性免疫治疗的临床研究

目的探讨自体肿瘤疫苗的作用机制。方法50例进展期肿瘤患者术后第4周开始以自体肿瘤细胞疫苗行主动特异性免疫治疗。免疫接种共4次,每次间隔7-10 d;接种前3 d及第4次接种后1周,采集外周血,分离单个核细胞,以流式细胞分析术/细胞内细胞因子检测法测定CD8+-IFN-γ+、CD8+-IL-10+细胞及CD4+-INF-γ+、CD4+-IL-10+细胞;用自体肿瘤抗原做皮肤迟发型过敏试验(DTH),48 h后测量红斑、硬结大小(mm)。对DTH反应部位皮肤活检,用免疫组化染色了解局部细胞免疫反应。结果自体肿瘤细胞疫苗治疗后表现为:①CD8+-IFN-γ+阳性细胞由(3.90±1.42)%升至(7.12±2.15)%;CD4+-INF-γ+阳性细胞由(4.19±1.50)%升至(7.20±2.29)%(P<0.05);②与治疗前相比,治疗后患者对自体肿瘤抗原的特异性DTH反应明显增强(P<0.01);③DTH反应部位CD8+T细胞、CD4+T细胞浸润明显增多;④患者耐受性良好。结论自体肿瘤细胞疫苗免疫后,可改善肿瘤患者细胞介导的抗瘤免疫反应;自体肿瘤疫苗可激发患者特异性细胞介导的免疫反应。

自体肿瘤疫苗主动特异性免疫治疗对结肠癌病人细胞免疫功能的影响

目的 探讨自体肿瘤疫苗的作用机制。方法 2 0例结肠癌患者术后 ,以自体肿瘤疫苗行主动免疫治疗。术后第 4周开始免疫接种 (共 4次 ,每次间隔 7～ 10天 ) ;接种前 3天及 4次接种后 1周 ,采集外周血 ,分离单个核细胞 ,测定CD+ 8-IFN -γ+ ,CD+ 8-IL - 10 + ,细胞比例及CD+ 4 -IFN -γ+ 、CD+ 4-IL - 10 + 细胞比例 ;同时采集血清检测血清IFN -γ、IL - 10水平 ;用自体肿瘤抗原做皮肤迟发型过敏反应试验 ,4 8小时后测量红斑、硬结大小 (mm) ;临床随访。结果 自体疫苗治疗后 :血清IFN -γ水平升高 ,由 (6 .2 9± 1.96 )pg/ml升至 (10 .94± 3.2 1) pg/ml;而IL - 10水平由 (2 1.91± 10 .19)pg/ml降至(10 .84± 6 .0 1) pg/ml。有显著性差异 (P <0 .0 5 )。CD+ 8-IFN -γ+ 双阳性细胞比例由 (4.0 2± 1.13) %升至 (8.81± 2 .90 ) % ;CD+ 4 -IFN -γ+ 双阳性细胞比例由 (4.19± 1.10 ) %升至 (6 .99± 1.87) %。有显著性差异 (P <0 .0 5 )。治疗前后患者对自体肿瘤抗原的特异性DTH反应明显增强 (P <0 .0 1)。患者耐受性良好 ,无溃疡等严重副作用发生。 11例无瘤生存时间为 36～ 4 8个月 (仍健在 ) ;6例无瘤生存时间为 11～ 14个月 (仍健在 ) ;3例生存 2 4～ 2 6个月 (死于肝转移 )。

WT1基因与急性髓系白血病的预后及主动特异性免疫治疗的研究进展

WT1基因位于人类染色体11p13,在80%的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中高表达,是AML预后不良的分子标志,可作为AML预后评估和微小残留病变(minimal residual disease,MRD)监测的有效指标。由于WT1在AML中均有异常高表达,故认为是一种AML抗原,可作为特异性免疫治疗的新靶点。一些小规模的临床试验证实以WT1为靶点的免疫治疗是有效的、安全的,这些免疫治疗可作为那些有高危复发风险及初始标准化疗失败的AML患者的辅助治疗。本文就近几年WT1与AML的预后及有关以WT1为靶点的主动特异性免疫治疗的研究进展予以综述。

肿瘤的主动特异性免疫治疗研究进展

肿瘤特异性抗原的发现和基本确认,机体对肿瘤免疫耐受的原因及克服途径,细胞因子相互作用及其调节机体免疫功能的深入认识,以及分子生物学技术的发展及应用,使肿瘤的主动特异性免疫治疗有了迅猛的发展,并日益接近临床现实.

人结肠癌主动特异性免疫治疗的初步研究

目的：探讨自体肿瘤疫苗的作用机制及临床意义。方法：50例进展期结肠癌病人术后，以自体肿瘤细胞疫苗辅助主动免疫治疗。术后第4周开始免疫接种（共4次，每次间隔7～10天）；接种前3天及第4次接种后1周，采集外周血。采集血清监测血清IFN-γ IL-10水平；用PPD及自体肿瘤抗原做皮肤迟发型过敏试验（DTH），48小时后测量红斑、硬结大小（mm）；对DTH反应部位皮肤活检，用免疫组化染色，了解局部免疫活性细胞浸润；临床随访。结果：自体肿瘤细胞疫苗治疗后：血清IFN-γ水平升高，由（6．01±2．30）pg／ml升至（12．98±4．65）pg／ml；而IL-10水平由（19．80±10．15）pg／ml降至（8．92±4．60）pg／ml，差异有非常显著性（P〈0．05）；治疗前后病人对自体肿瘤抗原的特异性DTH反应明显增强（P〈0．01）；DTH反应部位，CD8^＋T细胞、CD4^＋T细胞及DC细胞浸润明显增多；病人耐受性良好，无溃疡等严重副作用发生；随访结果显示：术后辅助自体肿瘤疫苗主动特异性免疫治疗，可延长结肠癌病人的无瘤生存时间，降低复发率及死亡率。结论：自体肿瘤疫苗可激发病人特异性细胞介导的免疫反应；可改善肿瘤病人的抗瘤免疫反应；自体肿瘤疫苗主动特异性免疫治疗，对于杀灭残留癌细胞、抗转移及复发有重要作用。

以WT1为靶点的恶性肿瘤主动特异性免疫治疗的临床转化研究进展

恶性肿瘤的主动特异性免疫治疗是针对肿瘤细胞相关的抗原靶点,设计使机体产生特异性免疫,从而定向杀灭肿瘤细胞的方法。成肾细胞瘤1(nephroblastoma or Wilm's tumor 1,WT1)是2009年美国国家癌症研究所(National Cancer Institute,NCI)评估所得的最佳恶性肿瘤抗原。目前,国际上已有多个以WT1为靶点的恶性肿瘤的主动特异性免疫治疗项目进入了临床转化研究阶段,主要包括多肽疫苗、DC疫苗和T细胞产品三类,其中galinpepimut-S、WT4869、Vaccell等疫苗均能使恶性肿瘤患者的总生存期大大延长,同时安全性良好。因此以WT1为靶点的恶性肿瘤的主动特异性免疫治疗是恶性肿瘤治疗的一个有前景的发展方向。本文从WT1多肽疫苗、DC疫苗及T细胞产品三个方面介绍近年来国内外临床转化研究的进展。

胶质瘤主动特异性免疫治疗新进展

恶性胶质瘤是中枢神经系统最常见的肿瘤,虽手术、放疗、化疗技术已有很大的进步,但其预后仍无改善。随着分子生物学和肿瘤免疫学的发展,胶质瘤的主动特异性免疫治疗策略如树突状细胞(DC)疫苗、热休克蛋白(HSP)、通过交叉免疫反应打破肿瘤诱导的免疫耐受的分子疫苗以及B7、IFN-γ、GM-CSF等前炎性免疫基因治疗等已引起人们极大的注意并显示出令人鼓舞的应用前景。本文主要围绕这几方面作一综述。

瘤苗特异性主动免疫治疗及其机制的实验研究

围绕中药莪术及其有效成分β-榄香烯的抗癌作用与原理的研究,用多种小鼠可移植性瘤株,比较系统、深入地研究了中药(莪术油、β-揽香烯等)、化学药品(MMC、戊二醛等)、放射能(^(60)Co、X线等)及/或病毒(痘苗病毒、新城鸡瘟病毒)等处理的肿瘤细胞疫苗或其膜组分(Mfr)的主动免疫防治效应及其规律和机制,获得了明显的可重复的阳性结果,解决了有关瘤苗制备、保存和使用方法等一系列问题.

融合基因GM-CSF/IL-2转基因瘤苗在肝癌特异性免疫治疗中的应用

目的制备人白细胞介素2(hIL-2)与鼠粒-单核细胞集落刺激因子(mGM-CSF)融合基因修饰的H22肝癌全细胞瘤苗,探索融合基因GM-CSF/IL-2转基因瘤苗,在肝癌主动免疫治疗中特异性抗肿瘤作用。方法用含hIL-2与mGM-CSF融合基因的真核表达载体在体外转染H22肝癌细胞,制成疫苗,皮下接种Balb/c小鼠,同时建立Balb/c小鼠荷瘤模型,ELISA法检测H22/pcDNA3.1(+)-GM-CSF/IL-2瘤苗免疫组小鼠与各对照组小鼠(分别接种H22/pcDNA3.1(+)瘤苗、H22瘤苗、PBS)血清中IL-10、IFN-γ水平,观察小鼠存活期;同时用51Cr释放法测定H22/pcDNA3.1(+)-GM-CSF/IL-2瘤苗免疫组小鼠与各对照组小鼠(单纯荷瘤组、正常组)脾细胞对亲本H22肝癌细胞的杀伤活性。结果成功制备了含有hIL-2与mGM-CSF融合基因的H22肝癌瘤苗,转基因瘤苗免疫组小鼠的脾细胞在体外对亲本H22肝癌细胞的杀伤率为38.3%,显著高于对照组小鼠的脾细胞对亲本H22肝癌细胞的杀伤率(分别为13.6%和7.5%),也高于其对S180细胞的杀伤率(9.1%)(P<0.05)。转基因瘤苗免疫组小鼠血清IFN-γ较对照组明显升高(P<0.01),血清IL-10较对照组明显降低(P<0.01)。同时,转基因瘤苗免疫组小鼠生存期亦有明显延长。结论转染hIL-2与mGM-CSF融合基因的同系肿瘤细胞瘤苗可激发特异性细胞介导的免疫反应,改善抗肿瘤免疫反应,延长荷瘤小鼠生存期。

妇科肿瘤的特异性主动免疫治疗进展

肿瘤的特异性主动免疫治疗(SAIT),即用肿瘤疫苗刺激机体产生针对肿瘤特异性抗原的免疫反应,作为癌症患者手术、化疗或放疗的一种辅助治疗,目的是克服因肿瘤产物造成的免疫抑制状态,增强肿瘤相关抗原(TAA)的免疫原性,以刺激特异性免疫来攻击肿瘤细胞。肿瘤疫苗包括细胞疫苗。

新型全细胞瘤苗对荷肝癌小鼠的主动免疫治疗

目的 建立小鼠肝脏种植性肝癌模型，评价添加新型佐剂的全细胞肿瘤瘤苗的治疗效果，包括免疫学参数及小鼠存活期，探讨该肿瘤瘤苗的作用机制。方法Ｂａｌｂ／ｃ小鼠肝脏成功接种肿瘤后，分成４组，各组行不同的治疗。第１组单纯切除肿瘤，不做免疫治疗；第Ⅱ组切除肿瘤，用新型细胞瘤苗进行免疫治疗；第Ⅲ组不切除肿瘤，用新型瘤苗进行免疫治疗；第Ⅳ组为对照组，只进行开腹、关腹。第２８天处死各组半数小鼠，取血检测血清中ＩＬ－１０和ＩＦＮ－γ的水平；取脾用ＦＡＣＳ检测ＣＤ４／ＣＤ8 和 ＩＦＮ－γ／ＩＬ－１０双阳性细胞的比例。各组所余小鼠继续饲养，鹏存活期。结果第腴血清ＩＦＮ-γ的水平较其余组明显升高（ｐ＜０.０１）；血清 ＩＬ－１０的水平较其他组明显降低（ｐ＜０．０１）；ＣＤ８＋／ＩＦＮ－γ+细胞的比例明显高于其他各组（ｐ＜０.０１）； ＣＤ８+／ＩＬ－１０+细胞的比例明显低于其他各组（ｐ＜０.０１）；ＣＤ４＋／ＩＦＮ-γ+细胞的比例明显高于靴各组（ｐ＜０.０１）；ＣＤ４＋／ＩＬ－１０＋细胞的比例明显低于其他各组（ｐ＜０.０１）．同时，第Ⅱ组荷瘤小鼠的生存期亦有明显延长。各组肺或淋巴结转移无统计学意义。

浅谈肝癌的免疫治疗

近十年来,肝癌的免度治疗随着细胞生物学、分子生物学及生物工程技术的兴起,有着突飞猛进的发展。特别是肝癌疫苗的研究进展,为人类最终征服肝癌增强了信心。目前,肝癌的免疫治疗分为:特异性主动免疫治疗、特异性被动免疫治疗、过继性免疫治疗及非特异性生物反应调节等四类。

利播仃(Lipostn)肿瘤疫苗诱发BALB/c小鼠的抗肿瘤免疫作用Ⅱ——细胞免疫

前文阐述了利播仃肿瘤诱发BALB／c小鼠的体液免疫．激活B淋巴细胞，使其分泌高滴度、高特异性及有细胞毒的抗体。对于主动特异性免疫治疗肿瘤的疫苗来说，仅有此作用是不够的，必须能激活机体的免疫系统，发挥免疫功能，产生细胞免疫，对肿瘤细胞发起多方位的主动攻击。这就是肿瘤疫苗的主动特异性免疫治疗肿瘤的独特之处。

自体瘤苗应用前后患者免疫功能的变化

目的:研究胃肠道肿瘤术后患者应用自体瘤苗治疗前后细胞免疫功能的变化,并探讨主动特异性免疫治疗的临床应用价值。方法:选取41例胃肠道肿瘤患者为实验研究对象,随机分成两组,实验治疗组:20例,术后行主动特异性免疫治疗,同时行常规化疗。实验对照组:21例,术后行常规化疗。并以正常人群为正常对照组。检测实验组治疗前后外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率、CD4+/CD8+比值及NK细胞活性。结果:41例胃肠道肿瘤术后患者实验治疗前外周血T细胞亚群CD3+细胞百分率、CD4+/CD8+比值显著性下降,CD8+细胞百分率显著性升高(与正常人群比较)。实验治疗组治疗后CD3+、CD4+细胞百分率、CD4+/CD8+比值显著性升高,NK细胞活性显著性增加,CD8+细胞百分率显著性下降;实验对照组治疗前后无显著性变化(自身比较)。结论:胃肠道肿瘤患者的免疫功能是低下的,自体瘤苗治疗可以提高肿瘤患者的免疫功能。自体瘤苗治疗与化疗有协同作用,并减少化疗的不良反应。主动特异性免疫治疗可以作为肿瘤综合治疗的辅助手段之一。

白血病瘤苗对荷瘤小鼠细胞免疫功能影响的研究

目的 :探讨白血病细胞疫苗主动免疫治疗在血液恶性肿瘤中的作用。方法 :建立红白血病荷瘤小鼠 ,用自制的 3种不同的白血病细胞瘤苗进行主动免疫治疗 ,用MTT比色法测其治疗 2周和 4周的小鼠Mφ和CTL的杀伤活性 ,并与对照组相比较。结果 :①随着肿瘤细胞在小鼠体内的增长 ,小鼠的细胞免疫功能受到严重抑制 ,特异性细胞免疫功能的抑制滞后于非特异性细胞免疫功能。②灭活肿瘤细胞 +IFA +细胞因子 (rGM CSF +rIL 2 +rIL 6 )的肿瘤疫苗在提高荷瘤小鼠的细胞免疫功能方面 ,尤其是特异性细胞免疫功能方面优于灭活肿瘤细胞 +IFA肿瘤疫苗 ,而仅含灭活肿瘤细胞的疫苗作用不明显。结论 :灭活肿瘤细胞 +IFA +细胞因子 (rGM CSF +rIL 2 +rIL 6 )的肿瘤疫苗在血液恶性肿瘤的特异性主动免疫治疗中很有潜力。

肿瘤基因疫苗的研究进展

肿瘤基因疫苗是肿瘤主动特异性免疫治疗的核心。本文就肿瘤基因疫苗的构建、靶基因的选择以及免疫效应等方面的研究进展作一综述。