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猪轮状病毒vp4基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达
被引量:
4
1
作者
宋岩
师东方
+3 位作者
樊琛
刘胜旺
魏华
李一经
《中国病毒学》
CSCD
2005年第1期61-64,共4页
本研究扩增猪轮状病毒中国分离株 JL94株VP4蛋白主要抗原编码区基因(1 756 bp),将测序结果与国外分离株进行比较;将该基因片段同载体pMel BacA连接后,与杆状病毒DNA共转染入昆虫细胞Sf9,经蚀斑筛选纯化重组病毒并再感染Sf9细胞获得 vp4...
本研究扩增猪轮状病毒中国分离株 JL94株VP4蛋白主要抗原编码区基因(1 756 bp),将测序结果与国外分离株进行比较;将该基因片段同载体pMel BacA连接后,与杆状病毒DNA共转染入昆虫细胞Sf9,经蚀斑筛选纯化重组病毒并再感染Sf9细胞获得 vp4 基因的表达,对表达的 VP4 蛋白进行 Western blot分析和血清中和抗体试验。结果表明:JL94株VP4主要抗原编码区基因与国外分离株 CRW 8 株、Gottfried株该基因片段氨基酸同源性分别为96.43%和67%,说明 JL94株与 CRW 8 株属同一 VP4 血清型,而与 Gottfried株属不同血清型。JL94 株VP4主要抗原编码区氨基酸最大变异处位于 aa81 aa207。vp4 基因在昆虫细胞中表达量占细胞总蛋白的 20%,Western Blot证实表达蛋白有良好的生物学活性。所表达的蛋白免疫小鼠产生中和抗体,阻断 JL94 在 MA104 细胞上引起的细胞病变。
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关键词
猪轮状病毒
VP4
基因
主要抗原编码区基因
克隆
真核表达
下载PDF
职称材料
题名
猪轮状病毒vp4基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达
被引量:
4
1
作者
宋岩
师东方
樊琛
刘胜旺
魏华
李一经
机构
东北农业大学动物医学院病原分子生物学实验室
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室
东南大学医学院微生物学教研室
出处
《中国病毒学》
CSCD
2005年第1期61-64,共4页
基金
黑龙江省"十五"攻关项目 (GC01B510)
文摘
本研究扩增猪轮状病毒中国分离株 JL94株VP4蛋白主要抗原编码区基因(1 756 bp),将测序结果与国外分离株进行比较;将该基因片段同载体pMel BacA连接后,与杆状病毒DNA共转染入昆虫细胞Sf9,经蚀斑筛选纯化重组病毒并再感染Sf9细胞获得 vp4 基因的表达,对表达的 VP4 蛋白进行 Western blot分析和血清中和抗体试验。结果表明:JL94株VP4主要抗原编码区基因与国外分离株 CRW 8 株、Gottfried株该基因片段氨基酸同源性分别为96.43%和67%,说明 JL94株与 CRW 8 株属同一 VP4 血清型,而与 Gottfried株属不同血清型。JL94 株VP4主要抗原编码区氨基酸最大变异处位于 aa81 aa207。vp4 基因在昆虫细胞中表达量占细胞总蛋白的 20%,Western Blot证实表达蛋白有良好的生物学活性。所表达的蛋白免疫小鼠产生中和抗体,阻断 JL94 在 MA104 细胞上引起的细胞病变。
关键词
猪轮状病毒
VP4
基因
主要抗原编码区基因
克隆
真核表达
Keywords
Porcine rotavirus(PRV)
vp4 gene
Clone
Major antigen site
Eukaryotic expression
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪轮状病毒vp4基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达
宋岩
师东方
樊琛
刘胜旺
魏华
李一经
《中国病毒学》
CSCD
2005
4
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