番鸭细小病毒国内分离株主要结构蛋白基因的克隆和序列分析

根据国外已发表的番鸭细小病毒(MDPV)FM株基因组核苷酸序列设计1对引物,应用PCR技术扩增MDPV FS株的VP2-VP3蛋白基因片段。将扩增后的VP2-VP3结构蛋白基因克隆到T载体上,MDPV FS株基因大小为1764bp,编码528个氨基酸,对插入片段进行序列测定。结果表明,我国分离的MDPV FS株基因序列与国外发表序列的同源性为98.6%,与已发表的YZ株同源性为99.5%,可见番鸭细小病毒结构蛋白基因较保守。

1株血清4型禽腺病毒的分离与鉴定

对2020年广东地区某种鸡场疑似心包积液-肝炎综合征的患病鸡进行病原检测和分离鉴定,并对分离到的禽腺病毒主要结构蛋白基因进行遗传进化分析。采用PCR扩增和核酸测序分析确定其病原为血清4型禽腺病毒(Fowl aviadenovirus serotype 4,FAdV-4);通过LMH(Chicken Liver Hepatocellular carcinoma cell line,LMH)细胞进行病毒分离,获得FAdV-4毒株CH/GDQY/202010。血凝试验显示,CH/GDQY/202010分离株不能凝集鸡的红细胞;PCR检测结果显示,CH/GDQY/202010分离株无其他外源病毒污染;对该分离株的主要结构蛋白基因(Hexon、Fiber、Peton)分别进行PCR扩增和测序,遗传进化分析显示:CH/GDQY/202010分离株与近几年国内流行的FAdV-4强毒株处于同一个分支上,相似性为100.0%;与ON1、KR5、MX-SHP95和B1-7等较早毒株相比,相似性为95.7%~99.7%。CH/GDQY/202010分离与鉴定为种鸡场进一步完善FAdV-4防控提供依据。