抗白念珠菌鸡卵黄抗体的制备及温度对其效价的影响

目的:制备抗白念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)并检测其生物学性能。方法:白念珠菌标准菌株10231灭活后作为抗原免疫25周龄产蛋海蓝鸡,从水溶法提取鸡卵黄IgY抗体。用考马斯亮蓝染色法测定IgY抗体提取液的蛋白浓度。用Tris-tric ine电泳测定提取蛋白的相对分子质量、纯度,W estern b lot确定蛋白来源。以免疫组织化学检验抗白念珠菌IgY抗体与白念珠菌结合的特异性。ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的抗菌效价。结果:IgY抗体液中蛋白浓度为7.9 g/L,IgY抗体的纯度达到91.5%。提取的IgY抗体与鸡血清和正常鸡IgY抗体具有同源性。提取的IgY抗体可与白念珠菌发生特异性结合。ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的效价达到1∶12 000。结论:研究得到的IgY,产量和纯度高,效价好,体温条件下48 h效价没有降低。在体外能够特异性地与白念珠菌结合。