二羟丙氧甲基乌嘌呤抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的实验研究

二羟丙氧甲基鸟嘌岭(DHPG),在组织培养中对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)KOS株抑制50%空斑形成的浓度(IC_(50))为0.1μg/ml。DHPG与环胞苷联合应用的抗HSV活性呈协同作用;DHPG分别与无环鸟苷、酞丁安合用有相加作用。0.1和0.05%DHPG溶液滴眼对家兔实验性浅层单纯疱疹病毒角膜炎有显著治疗作用,浓度降低至0.025和0.0l%无明显疗效。对实质层型单疱角膜炎,0.1%DHPG溶液滴眼治疗有效。

人尿8-羟基脱氧鸟嘌呤的HPLC电化学测定方法

目的：建立高效液相色谱-电化学检测法（HPLC-ECD）测定人尿中8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷（8-OHdG）的检测方法。方法：采用Bond Elute C18小柱固相萃取尿液，ODS C18分析柱，8％甲醇醋酸缓冲液为流动相，电化学检测器检测，电极电压750mV。结果：本方法线性范围25～400μg/L，r=0．9892，回收率为91．2％～108．8％，批内和批间精密度分别为3．9％～7．5％和4．3％～8．6％，检测限为2μg/L。结论：本方法操作简便、准确度较好，已应用于正己烷接触者现场尿样的测定。

尿液中黄曲霉毒素──DNA加合物与肝癌关系的前瞻性研究

应用单克隆抗体系和层析柱结合高效液相色谱法测定了５０例肝瘤及２６７名对照尿液中ＡＦＢ１及其代谢物，ＡＦＰ１、ＡＦＭ１及ＡＦ－Ｎ７－乌嘌呤加合物，同时用ＲＩＡ试剂检测其血清中ＨＢｓＡｇ．肝癌病例尿液中含一种或一种以上ＡＦ标志物的检测率显著高于对照，ＲＲ＝４．０．肝癌病例尿液中ＡＦ－Ｎ７－乌嘌呤加成物的检出率也显著高于对照，ＲＲ＝７．６．尿液中如只检出ＡＦＭ１、ＡＦＰ１或ＡＦＢ１，不同时伴有ＡＦ－Ｎ７－乌嘌呤加合物。其发生肝癌的相对危险度比同时伴有ＡＦ－Ｎ７－乌嘌呤加合物者低得多。而且在调整ＨＢｓＡｇ及吸烟等混杂因素后，尿液中ＡＦＰ１或ＡＦＢ１阳性与肝癌的关系无统计学上显著性联系。过表明尿液中ＡＦ标志物，尤其是ＡＦ－Ｎ７－乌嘌呤加合物与肝癌的发生有较强联系并在个体水平上提供了ＡＦ暴露与ＨＢＶ感染对肝癌发生有明显协同作用的证据。在上海，花生及酱油是饮食中ＡＦＢ１的最主要来源，队列对象摄入ＡＦＢ１总量的８０％以上均来自这二种食品。

支气管灌洗液抑癌基因过甲基化对肺癌诊断价值的研究

目的探讨支气管灌洗液抑癌基因过甲基化对肺癌诊断的应用价值。方法选取北京市结核病胸部肿瘤研究所收治怀疑肺癌患者78例,包括肺癌51例和良性病变患者27例,从支气管灌洗液上清和细胞提取DNA,对上清游离DNA进行定量分析,并采用NMSP完成对支气管灌洗液上清和细胞的过甲基化分析,所选择的靶基因包括p16,MGMT以及RASSF1A基因。将NMSP结果与临床诊断比较,计算敏感性和特异性。结果中心型肺癌、周围型肺癌和肺部良性病变支气管灌洗液上清游离DNA含量没有显著差异。支气管灌洗液细胞抑癌基因过甲基化诊断中心型肺癌的敏感性和特异性分别为85.2%和81.5%,诊断周围型肺癌的敏感性和特异性分别为54.2%和81.5%。支气管灌洗液上清和细胞抑癌基因过甲基化诊断中心型肺癌的敏感性和特异性为88.9%和70.4%,诊断周围型肺癌的敏感性和特异性为75.0%和70.4%。结论支气管灌洗液抑癌基因的过甲基化可为肺癌诊断提供帮助。

CpG ODN对小鼠哮喘模型气道炎症及信号转导子和转录激活子6(STAT6)表达的影响

目的:研究寡核甘酸免疫刺激序列(CpGoligonucleotides,CpG ODN)对急性支气管哮喘小鼠气道炎症及信号转导子和转录激活子6(STAT6)表达的调控作用。方法:将32只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松干预组和CpG ODN干预组,建立急性哮喘气道炎症模型。对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞总数、嗜酸粒细胞(EOS)分类计数;取左叶肺组织切片做HE染色观察气道和肺组织炎症改变;用免疫组织化学法检测气道上皮组织中STAT6表达。结果:哮喘组小鼠BALF中细胞总数、EOS绝对值显著高于对照组(P<0.05),地塞米松组和CpG ODN组上述炎症细胞计数比哮喘组明显减少(P<0.05)。HE染色示地塞米松组和CpG ODN组小鼠肺组织炎症程度较哮喘组减轻。STAT6在气道上皮细胞表达,哮喘组气道上皮细胞中STAT6表达较对照组增强,地塞米松组和CpG ODN组STAT6表达与哮喘组比较有明显减少(P<0.05),较对照组增加。支气管上皮细胞STAT6蛋白表达与BALF中的EOS绝对值呈显著正相关(r=0.748),而地塞米松组和CpG ODN组之间的作用无统计学差异(P>0.05)。结论:应用地塞米松和CpG ODN均可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道炎症,CpGODN可能通过下调肺组织中STAT6蛋白的过度表达,从而抑制依赖于STAT6/IL-4通路的急性气道炎症,减轻哮喘的症状。

食管癌患者O^6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶基因多态性研究

目的检测中国食管癌高发区居民和高加索居民ＡＧＴ（Ｏ６ａｌｋｙｌｇｕａｎｉｎｅａｌｋｙｌｔｒａｓｆｅｒａｓｅ）的基因多态改变．方法采用ＰＣＲＳＳＣＰ和ＤＮＡ测序方法对河南食管癌高发区居民和高加索居民的癌组织和非癌组织进行基因多态分析．结果多态变异发生于第５外显子的１４３位密码子，并导致该位点的异亮氨酸（ＡＧＴ）被缬氨酸（ＧＴＣ）取代，且１４３位密码子与１７８位密码子的多态改变有一定联系．对９０例中国食管癌高发区居民的食管癌患者的检测发现，２例（２％）存在１４３／１７８密码子同时出现多态变异，同一地区的６０例正常居民中，无一例检测到该类型多态现象，但２８例高加索居民非癌患者中的６例（２１％）也携带有这种多态等位基因．此外，作者还证实河南食管癌高发区人群中存在第８４位密码子基因多态变异，最近在日本居民中也发现这种变化．这种多态变化导致亮氨酸（ＣＴＴ）变为苯丙氨酸（ＴＴＴ）．８４位密码子的多态变异在中国食管癌患者、中国和高加索非癌患者中的检出率分别为１６％，２０％和３６％，该多态改变与１４３／１７８密码子多态改变同时发生的现象只在１例高加索人ＤＮＡ中被检出．结论ＡＧＴ多态改变可能与食管癌的发生有关，其多态分布可?

HAT培养基在杂交瘤细胞应用中的探讨

本文选用抗大肠癌McAb的细胞体和抗霍乱弧菌McAb的细胞株，分别培养于HAT和8－杂氮鸟嘌呤培养基，促使杂交瘤细胞保留和消亡带有HGPRT酶基因的细菌，在通过两种培养基培养的细胞中，其抗体特性和型别与培养前相同，表明杂交瘤细胞存在的HG PRT酶基因与产生抗体的基因是两个各自存在的不同基因，因此，融合后的McAb阳性杂交瘤细胞采用HAT培养基培养，维护其抗体的稳定性。