乌拉尔甘草醇提物抑制树突状细胞成熟及治疗哮喘的作用

目的研究乌拉尔甘草醇提物(GUEE)对树突状细胞(DC)成熟的调节作用及在naïve BALB/c小鼠和卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠模型中对OVA的佐剂效应。方法制备GUEE,体外检测不同浓度GUEE对DC成熟及其分泌的细胞因子的影响,以及对细菌脂多糖(LPS)诱导的DC成熟的影响。采用显微镜观察GUEE对小鼠骨髓来源DC形态变化,流式细胞术检测DC表面分子表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测DC培养上清中白细胞介素IL-1β(IL-1β)、IL-6、IL-12和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。通过脚掌注射不同浓度GUEE,24 h后分离引流淋巴结,流式细胞术检测DC成熟状态。与OVA联合免疫naïve小鼠,流式细胞术检测调节性T细胞(Treg)的变化。建立OVA蛋白诱导的小鼠哮喘模型,研究GUEE作为耐受佐剂是否对哮喘小鼠有抗原特异性的治疗作用。采用苏木精-伊红染色法(HE)和过碘酸雪夫染色(PAS)检测肺组织病理学变化,ELISA检测血清中抗体水平,流式细胞术检测脾脏中Tregs及CD4^(+)T细胞表达干扰素-γ(IFN-γ)和IL-4的水平。结果GUEE在体内外均抑制了LPS诱导的DC成熟(均P<0.05),并在有或无LPS的情况下均降低了促炎细胞因子IL-1β、IL-6、IL-12和TNF-α的水平(均P<0.05)。此外,OVA和GUEE联合免疫小鼠,明显增加小鼠脾脏中Tregs的比例(P<0.05)。在哮喘小鼠中,OVA与GUEE联合免疫和GUEE单独治疗可改善肺组织炎症反应,同时降低血清中IgG1水平和脾脏中CD4^(+)IL-4^(+)T细胞的比例,并提高Tregs比例(均P<0.05)。结论GUEE单独或作为耐受佐剂可通过抑制DC成熟、辅助型T细胞2(Th2)免疫应答及诱导Treg来改善哮喘。