乌拉尔甘草醇提物抑制树突状细胞成熟及治疗哮喘的作用

目的研究乌拉尔甘草醇提物(GUEE)对树突状细胞(DC)成熟的调节作用及在naïve BALB/c小鼠和卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠模型中对OVA的佐剂效应。方法制备GUEE,体外检测不同浓度GUEE对DC成熟及其分泌的细胞因子的影响,以及对细菌脂多糖(LPS)诱导的DC成熟的影响。采用显微镜观察GUEE对小鼠骨髓来源DC形态变化,流式细胞术检测DC表面分子表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测DC培养上清中白细胞介素IL-1β(IL-1β)、IL-6、IL-12和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。通过脚掌注射不同浓度GUEE,24 h后分离引流淋巴结,流式细胞术检测DC成熟状态。与OVA联合免疫naïve小鼠,流式细胞术检测调节性T细胞(Treg)的变化。建立OVA蛋白诱导的小鼠哮喘模型,研究GUEE作为耐受佐剂是否对哮喘小鼠有抗原特异性的治疗作用。采用苏木精-伊红染色法(HE)和过碘酸雪夫染色(PAS)检测肺组织病理学变化,ELISA检测血清中抗体水平,流式细胞术检测脾脏中Tregs及CD4^(+)T细胞表达干扰素-γ(IFN-γ)和IL-4的水平。结果GUEE在体内外均抑制了LPS诱导的DC成熟(均P<0.05),并在有或无LPS的情况下均降低了促炎细胞因子IL-1β、IL-6、IL-12和TNF-α的水平(均P<0.05)。此外,OVA和GUEE联合免疫小鼠,明显增加小鼠脾脏中Tregs的比例(P<0.05)。在哮喘小鼠中,OVA与GUEE联合免疫和GUEE单独治疗可改善肺组织炎症反应,同时降低血清中IgG1水平和脾脏中CD4^(+)IL-4^(+)T细胞的比例,并提高Tregs比例(均P<0.05)。结论GUEE单独或作为耐受佐剂可通过抑制DC成熟、辅助型T细胞2(Th2)免疫应答及诱导Treg来改善哮喘。

瑞香狼毒花化学成分及其抗氧化活性研究

目的研究瑞香狼毒Stellera chamaejasme花中黄酮和木脂素类化学成分及其抗氧化活性,分析构效关系。方法利用大孔吸附树脂、正反相硅胶、SephadexLH-20等色谱分离材料,通过柱色谱和高效液相色谱等分离方法进行分离纯化,运用核磁共振(NMR)、质谱(MS)等波谱技术鉴定化合物结构,并采用FRAP法、DPPH法和ABTS法对分离得到的化合物进行体外抗氧化活性测试。结果从瑞香狼毒花甲醇提取物中分离鉴定了12个化合物,分别鉴定为艾黄素(1)、槲皮素(2)、isoscutellarein-8-O-β-D-glucuronopyranoside(3)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(4)、紫云英苷(5)、hypolaetin-8-O-β-D-glucuronopyranoside(6)、kaempferol 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-O-α-L-xylopyranoside(7)、rel-(3R,3′S,4R,4′S)-3,3′,4,4′-tetrahydro-6,6′-dimethoxy[3,3′-bi-2H-benzopyran]-4,4′-diol(8)、马台树脂醇(9)、乌拉尔醇(10)、环黄芪醇(11)、松脂醇(12)。抗氧化活性实验表明,黄酮和木脂素类化合物均显示了较强的抗氧化活性。结论化合物1、3、5~7和10为首次从该植物中分离得到;化合物2、4、5和10表现出显著的抗氧化活性,其中黄酮类化合物C-3或C-8位连有糖链会降低其抗氧化活性。