乌索酸对动物实验性肝损伤及胆汁的影响

目的 :研究乌索酸保肝利胆作用。方法 :分别以CCl4、APIT制作动物急性肝损伤模型 ,测定血清ALT、AST、SB含量 ,作肝组织病检 ,观察乌索酸对动物急性肝损伤的影响 ;采用麻醉大鼠行胆汁引流术 ,测定正常大鼠及APIT肝损伤大鼠的胆汁分泌量及胆汁成分。结果 :乌索酸能明显降低CCl4、APIT急性肝损伤动物血清ALT、AST水平及SB含量 ,减轻肝组织病理损伤 ;使正常大鼠、APIT肝损伤大鼠的胆汁流量明显增加 ,胆汁中胆红素浓度提高。结论 :乌索酸有明显保肝、利胆作用。

乌索酸与齐墩果酸对小鼠实验性肝损伤保护作用的比较

为了研究乌索酸的保肝作用及其特色 ,分别建立四氯化碳 (CCl4)、D -氨基半乳糖胺 (D -GalN)、卡介苗加脂多糖 (BCG -LPS)及异硫氰酸 - 1 -萘酯 (ANIT)诱导小鼠肝脏损伤模型 ,以测定血清谷丙氨酸转换酶 (ALT)、谷草氨基酸转换酶 (AST)、总胆红素 (TB)和肝组织丙二醛 (MDA)含量为指标 ,观察乌索酸对肝脏损伤的保护作用 ,并与抗肝炎药物齐墩果酸进行比较 .结果表明 :30mg/kg乌索酸均能显著降低CCl4、D -GalN、BCG -LPS、ANIT致肝损伤小鼠血清ALT和肝MDA值 ,而 30mg/kg齐墩果酸对CCl4、BCG -LPS肝损伤小鼠降ALT效果不及乌索酸 ;30mg/kg乌索酸能非常显著地降低ANIT致肝损伤小鼠血清TBLL含量 ,而 30mg/kg齐墩果酸与联苯双酯降血清TB作用不明显 .提示 :乌索酸具有明显的降酶。

陆英中乌索酸提取工艺的正交优选

目的 筛选乌索酸提取的最佳工艺条件。方法 根据乌索酸的理化特性 ,选取乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、除杂剂浓度 4个因素 ,每因素各取 3水平进行正交试验。结果 采用 7倍量 90 %乙醇加热回流 2次 ,每次 1h,3 %除杂剂除杂为最佳提取工艺条件。结论 本工艺先进合理、实用可行 ,有利于工业化生产。

乌索酸的一般药理学实验研究

对乌索酸进行一般药理学研究.按药理学研究方法观察乌索酸对动物精神活动、神经系统、心血管系统、呼吸系统的影响.结果表明igUA22,11,5.5mg/kg对猫的心率、血压、心电图及呼吸均无明显改变;igUA240,120,60mg/kg对小鼠的精神、神经系统亦无影响.提示:乌索酸对动物无明显毒、副作用.

30种省产天然植物中乌索酸含量的HPLC测定

采用HPLC法测定30种省产天然植物中乌索酸的含量,色谱柱为Symmetry Shield RP18,流动相甲醇-水-磷酸(88:12:0.1),流速1.0 mL/nin,检测波长210 nm,柱温25℃.30种省产天然植物中乌索酸的含量为0.106%～0.583%,HPLC法测定乌索酸含量灵敏、准确、重现性好.

以陆英为原料提取乌索酸的工艺研究

目的 :研究从陆英中提取乌索酸的工艺。方法 :采用“醇提凝析法”提取分离乌索酸。结果 :产品提取率达 90 % ,纯度达 98% ,经理化常数测定和光谱鉴定 ,确证产品为乌索酸。结论 :本工艺先进实用、合理可行、有利于工业化生产。

乌索酸对大鼠胆汁的影响

目的 :观察乌索酸对动物胆汁的影响。方法 :采用麻醉大鼠行胆汁引流术 ,测定正常大鼠及APIT肝损伤大鼠的胆汁分泌量及胆汁成分 ,测定血清SB含量。结果 :ig乌索酸正常大鼠及APIT模型大鼠的胆汁流量明显增加 ,胆汁中胆红素浓度提高 ,血清胆红素含量明显降低。结论 :乌索酸有明显的利胆、促进胆红素排泄的作用。

枇杷叶中乌索酸的制备及HPLC分析

采用"醇提凝析法"制备枇杷叶中的乌索酸,并建立HPLC测定分析乌索酸含量的方法。色谱柱为Sym metryShieldRP18,流动相为甲醇-水(88∶12),流速1mL/min,检测波长210nm,柱温25℃。乌索酸在4.4～22.0μg范围内线性关系良好(r=0.9992),平均回收率为99.32%(RSD为0.70%)。结果表明,HPLC法测定乌索酸含量准确、可靠,可用于乌索酸含量测定分析。

乌索酸诱导Jurkat细胞凋亡及其机制的初步研究

本研究旨在探讨乌索酸(ursolic acid,UA)对Jurkat细胞的诱导凋亡作用及其分子机制,为UA应用于血液系统恶性肿瘤治疗提供理论依据。培养Jurkat细胞,用Water Solubility Tetrazolium-8(WST-8)法检测不同浓度UA对Jurkat细胞的细胞毒作用,观察caspase-9抑制剂对UA细胞毒作用的抑制情况;分别收集20、40μmol/L UA处理2小时和4小时的Jurkat细胞,用Annexin/PI双染色、流式细胞仪检测细胞凋亡率;收集不同浓度UA作用不同时间的Jurkat对数生长期细胞,提取蛋白,用Western blot分析caspase-9和-3及细胞色素C活化、Akt磷酸化情况。结果表明:UA能明显降低Jurkat细胞的生存率,能够诱导Jurkat细胞凋亡,caspase-9抑制剂能够抑制UA的细胞毒作用。在UA诱导Jurkat细胞凋亡过程中,caspase-9、caspase-3和细胞色素C被活化,Akt磷酸化受到抑制。结论:UA对Jurkat细胞具有明显的细胞毒作用,并能诱导其凋亡;UA诱导Jurkat细胞凋亡是通过线粒体途径实现的,其机制可能与抑制细胞生存因子Akt磷酸化过程相关。

黄毛耳草中乌索酸的分离提纯及RP-HPLC分析

采用'醇提凝析法'从黄毛耳草中分离提纯乌索酸,用IR、MS、NMR等技术对乌索酸结构进行了表征.建立了反相高效液相色谱法测定乌索酸含量的方法,色谱柱为SymmetryShield Rp18柱(3.9 mm×150mm,5 μm);流动相为甲醇:水(88:12,V/V);流速为1.0 mL/min;二极管阵列检测器检测,检测波长为210nm;柱温为25℃;线性范围:4.5～22.5 μg;线性回归系数大于0.999 8.HPLC测定乌索酸纯度为99.82%,得率为3.65‰.该方法具有快速简便、精密度高、重现性好、线性范围宽的特点,可作为控制乌索酸质量的方法.

乌索酸对小鼠急性免疫性肝损伤的影响

目的:观察乌索酸(UA)对小鼠急性免疫性肝损伤的影响。方法:建立卡介苗与脂多糖(BCG-LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤模型,测定血清ALT,AST活性,计算肝脏、脾脏、胸腺重量指数,并进行肝脏病理组织检查。结果:小鼠poUA l5、30、60 mg.kg-1,连用7 d,可显著抑制免疫性肝损伤小鼠血清ALT,AST活性,减轻肝组织病理损伤程度。结论:UA对小鼠急性免疫性肝损伤有明显的保护作用。

乌索酸诱导人单核细胞白血病细胞株THP-1分化的研究

乌索酸是一种常见的五环三萜类化合物,本文考察了其对原单核白血病细胞株THP-1的分化诱导作用。乌索酸作用72h后,通过显微镜形态观察,部分THP-1细胞贴壁生长,形态具有向巨噬细胞分化的特征。结晶紫染色结果显示细胞贴壁程度呈剂量依赖型增长。利用流式细胞分析技术分化标志物,发现CD11b和CD14阳性细胞百分比均有显著上调。Western blotting结果表明乌索酸能上调分化相关蛋白C/EBPα的p42亚基并且下调分化负调控因子c-myc的蛋白水平,且对二者的表达调控作用具有浓度和时间相关性。因此,乌索酸能够诱导THP-1细胞向单核/巨噬细胞方向分化。其作用机制可能是上调C/EBPα的p42亚基,进而下调c-myc,从而达到分化诱导作用。

超声波与回流技术对枇杷叶中乌索酸的提取效果

以枇杷Eriobotrya japonica叶为原料,乙醇为介质,研究超声波和回流2种提取方法对乌索酸的提取效果。用相同原料和相同介质,采用超声波和回流2种方式进行提取,再经滤过、定容、离心和微孔滤膜过滤后测定,用外标法计算质量分数。建立了枇杷叶中乌索酸质量分数的高效液相色谱定量方法;超声波提取的效率为热回流法的2.63倍。枇杷叶用超声波提取时,对乌索酸的提取效率远优于热回流法。超声波具有独特的机械、空化和热效应,能使介质分子的运动速度加大,穿透力增强,从而使有效成分充分溶出。

乌索酸通过抑制miR-21表达诱导肝癌HepG2细胞凋亡的机制

探讨乌索酸通过调控miR-21表达从而诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用机制。采用MTT方法检测乌索酸对肝癌细胞增殖的抑制作用;qPCR检测肝癌细胞中miR-21的表达水平及乌索酸对HepG2细胞中miR-21表达的调控作用;转染miR-21 mimics进HepG2细胞中上调miR-21的表达后,MTT、流式细胞检测法、RT-PCR方法分别分析miR-21在乌索酸对细胞的增殖、凋亡以及对凋亡相关基因的调控过程中的作用。结果显示,与肝正常细胞L-02以及肝癌SMCC-7721、Bel-7402细胞相比较,乌索酸对肝癌HepG2细胞的增殖抑制效果最强,且HepG2细胞中miR-21的表达水平最高。乌索酸可下调HepG2细胞中miR-21的表达,且在24 h的下调作用最强。miR-21的表达上调可以部分抵消乌索酸对HepG2细胞的抑制增殖及促进凋亡,部分抵消下调凋亡抑制基因Bcl-2、survivin表达和上调促凋亡基因Bax表达的作用。结果提示,乌索酸通过抑制miR-21的表达诱导肝癌HepG2细胞凋亡。

陆英提取物乌索酸的热分析研究

用差示扫描量热法（DSC）和热重-微分热重法（TG-DTG）对静态空气气氛的乌索酸进行了热分析研究,为热分析鉴别乌索酸提供了实验依据。结果表明,加热到251℃时质量损失约3.31%,251～341℃时质量损失约68.09%,341～464℃时质量损失约27.70%,到464℃时质量仅余约0.90%。在158、311、415℃分别有3个放热峰。

紫苏不同部位中乌索酸和齐墩果酸的含量比较

采用超声技术提取紫苏不同部位中乌索酸和齐墩果酸,建立RP-HPLC法测定其含量。色谱柱为Kromasil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(87:13),光电二极管阵列检测器,检测波长210nm,流速0.8mL/min,柱温28℃。乌索酸进样量在0.359～5.744μg,齐墩果酸进样量在0.174～2.784μg时呈现良好的线形关系,平均加样回收率分别为98.53%和98.36%,RSD分别为1.3%和1.5%。方法灵敏、准确,重现性好,可用于紫苏中乌索酸与齐墩果酸含量的测定。

毛泡桐叶中乌索酸的提取分离及反相高效液相色谱分析

目的提取鉴定毛泡桐叶中的乌索酸,并建立其含量测定方法。方法采用“醇提凝析法”新工艺分离制备乌索酸,IR,MS,NMR鉴定其结构。建立反相高效液相色谱测定其含量的方法,色谱柱为Krom asilC18柱,流动相为乙腈-甲醇-水-磷酸（体积比168∶682∶150∶1.68）,流速0.8 m l/m in,检测波长210 nm,柱温25℃。结果乌索酸在0.92-16.56μg范围内线性关系良好（r=0.999 6）。样品乌索酸含量为99.61%,得率为30.5%。结论“醇提凝析法”分离制备乌索酸工艺先进,实用可行,为工业试验生产乌索酸提供了技术条件;RP-HPLC法测定乌索酸含量准确、精密度高、重复性好、线性范围宽,可作为控制乌索酸质量的方法。