不同浓度乙醇制作大鼠角膜上皮瓣的安全性及其组织病理学研究

目的探讨不同浓度乙醇浸润制作角膜上皮瓣的安全性及组织病理学基础。方法以30只近交系Wistar大鼠为研究对象,予15%、20%、30%、40%四种不同浓度的乙醇分别在大鼠角膜中央浸润1 min,予20%乙醇在大鼠角膜中央分别浸润30 s1、min、2 min,观察角膜各层的组织病理学改变情况。并以20%乙醇浸润1 min,制作角膜上皮瓣,对上皮瓣和去上皮角膜进行HE和PAS染色,用光镜和透射电镜观察。结果①不同浓度乙醇处理角膜1 min:15%乙醇对角膜各层细胞形态未产生明显的影响;随浓度的增加,20%乙醇引起表层角膜上皮细胞核浓缩及细胞间连接疏松,此变化3 d后即恢复;30%乙醇产生翼状细胞层核固缩,角膜上皮细胞间和上皮下有大泡,局限性上皮基底膜被破坏;40%乙醇引起角膜上皮细胞核固缩,累及基底细胞,并可见上皮细胞膜被破坏,上皮广泛与基质分离,但基质和内皮未见明显改变。②20%乙醇浸润角膜30 s对各层细胞形态无明显影响,2 min则可见上皮细胞间积水,翼状细胞层细胞核固缩,上皮基底膜被局限性破坏,基质和内皮无明显改变。③20%乙醇处理1 min制作的上皮瓣,见到完整的上皮细胞层以及和上皮相连的前部基底膜,剩余角膜基质和内皮无形态改变,电镜观察可见后部基底膜完整地保留在角膜基质前表面。结论①乙醇对角膜的损伤作用呈浓度时间依赖性,低浓度短时间浸润仅对表层即将脱落的上皮造成轻度损伤,并易于愈合,可用于上皮瓣的制作。②上皮瓣与角膜分离的部位可能位于上皮下基底膜。

延胡索乙素对映体对小鼠CYP450酶诱导和抑制作用研究

目的:考察延胡索乙素(tetrahydropalmatine,THP)对映体对小鼠肝脏主要CYP450酶的体外抑制及体内诱导作用,从而预测其在临床上可能发生的代谢性药物相互作用,为临床合理用药提供科学依据。方法:以探针底物法,考察左旋延胡索乙素[(-)-tetrahydropalmatine,(-)-THP]和右旋延胡索乙素[(+)-tetrahydropalmatine,(+)-THP]体外对小鼠肝微粒体主要Ⅰ相代谢酶CYP1A2、CYP2C、CYP2D22、CYP2E1、CYP3A11活性的影响;采用微粒体体外孵育"鸡尾酒"法(cocktail法),考察小鼠经高、低剂量(-)-THP和(+)-THP(240 mg/kg和60 mg/kg)连续灌胃7 d后,其肝微粒体中主要I相代谢酶活性的变化,以评价(-)-THP和(+)-THP对小鼠肝微粒体主要CYP450酶是否具诱导作用。结果:(-)-THP和(+)-THP体外对小鼠肝微粒体主要的CYP 450 I相代谢酶的抑制作用均不强,(+)-THP对CYP2C抑制的IC50为43.89μmol/L,两者对本研究考察的其它CYP亚型的IC50均大于100μmol/L;与溶剂处理组比较,小鼠经60 mg/kg和240 mg/kg的(-)-THP处理后,CYP1A2活性分别增加了68.7%和73.0%(P<0.05、P<0.01),经240 mg/kg的(-)-THP处理后,小鼠CYP2C37活性增加了80.4%(P<0.05),(-)-THP对其余CYP亚型活性未显示明显影响;(+)-THP对本研究考察的所有CYP亚型均未显示明显影响。结论:(-)-THP和(+)-THP体外对小鼠肝微粒体CYP主要亚型的抑制作用较弱;(-)-THP对小鼠肝微粒体CYP1A2、CYP2C37仅显示微弱的诱导作用,(+)-THP对小鼠肝微粒体主要CYP450酶亚型无明显诱导作用。