乙型肝炎病毒核心抗体水平与慢性乙型肝炎患者肝脏炎症、纤维化程度及抗病毒疗效关系的Meta分析

目的系统评估乙型肝炎病毒核心抗体(hepatitis B virus core antibody,HBcAb)水平与慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者肝脏炎症及纤维化程度的相关性,以及HBcAb能否作为CHB患者抗病毒疗效的预测指标。方法检索PubMed、Embase、Web of Science、The Cochrane Library、中国知网、万方、维普数据库建库至2022年10月发表的有关HBcAb的文献。使用R4.2.1软件进行Meta分析,横断面研究文献质量评价参照美国卫生保健质量和研究机构(the Agency for Healthcare Research and Quality,AHRQ)提出的文献质量评价标准,队列研究质量评价参照纽卡斯尔-渥太华量表(Newcastle-Ottawa Scale,NOS)。采用剔除异质性最大或权重最大的文献进行敏感性分析。采用漏斗图和Egger检验进行发表偏倚评估。结果纳入30篇文献进行系统评价,其中21篇文献纳入Meta分析。结果表明HBcAb水平越高,CHB患者肝脏炎症程度(Summary r=0.39,95%CI:0.30~0.48,P<0.05)和肝脏纤维化程度(Summary r=0.33,95%CI:0.22~0.43,P<0.05)均越高。ALT基本正常的CHB患者中HBcAb较低的患者发生肝脏炎症(G2~G4)的风险较高(OR=2.02,95%CI:0.64~6.38,P<0.05)。干扰素(interferon,IFN)治疗的CHB患者基线HBcAb水平越高,HBsAg阴转率越高(MD=0.34,95%CI:-0.12~0.80,P<0.05)。核苷(酸)类似物[nucleos(t)ide analogues,NAs]和IFN治疗的CHB患者基线HBcAb水平越高,HBeAg血清学转换率(MD=0.37,95%CI:0.26~0.49,P<0.05)和HBV DNA病毒学应答率(MD=0.30,95%CI:0.16~0.44,P<0.05)均越高。IFN治疗的CHB患者停药时HBcAb水平越高,临床治愈后复发率越低(MD=-0.74,95%CI:-1.00~-0.48,P<0.05)。结论HBcAb水平越高,CHB患者肝脏炎症程度及纤维化程度越高。较高的HBcAb水平可作为预测NAs或IFN抗病毒疗效的指标之一。

乙型肝炎病毒核心抗体检测及其临床意义的研究进展

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是全球范围内的公共卫生问题,也是引起我国慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)的主要原因之一。根据世界卫生组织(WHO)的估算,2022年全球新增220万人感染HBV,共计2.54亿人患有CHB,其中我国HBV感染总数约占三分之一[1]。

单项乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性意义的研究

对１５名单项抗－ＨＢｃ阳性者按０、１、６方案接种３针１０μｇ血源性乙肝疫苗，１５．４％出现回忆反应，提示这部分人为过去感染已获得免疫；２６．７％产生原发性反应，这部分人可能是血清学假阳性结果；６０．０％对疫苗无、弱应答，可能代表“低水平”ＨＢｓＡｇ携带者。对经ＥＬＩＳＡ和ＲＩＡ两种方法确定的７０例单项抗－ＨＢｃ阳性者用ＰＣＲ方法检测ＨＢＶＤＮＡ，阳性率为１２．９％，说明单项抗－ＨＢｃ阳性是与ＨＢＶ携带有关的指标。

偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎核心抗体的研究

本文提出了一种竞争法偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎核心抗体（ＨＢｃＡｂ）的新方法。该法将辣根过氧化物酶标记的乙型肝炎核心抗体（ＨＢｃＡｂ－ＨＲＰ）催化Ｈ＿２Ｏ＿２氧化部甲联苯胺（ＯＴ）的反应与邻甲联苯胺的氧化产物在电极上的还原反应相偶合，根据测定标记在ＨＢｃＡｂ上的ＨＲＰ的量，求得发生液相竞争免疫反应的ＨＢｃＡｂ的含量。测定ＨＢｃＡｂ－ＨＲＰ及ＨＢｃＡｂ的灵敏度均高于经典的酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）。用所建立的方法对病人血清样品进行了测定，并与现行的ＥＬＩＳＡ法进行对照，两种方法相关性很好。

乙型肝炎病毒核心抗体临床意义再研究

目的分析化学发光微粒子免疫分析法检测乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）在临床上的应用。方法收集2012年1月至2014年11月乙型肝炎两对半检测HBcAb阳性标本16 830份,根据HBcAb的cut off指数（COI值）将其分为3组：1.0~〈9.0组、9.0~〈11.0组、≥11.0组进行统计分析。对乙型肝炎表面抗原（HBsAg）与乙型肝炎表面抗体（HBsAb）均阴性且HBcAb的COI值大于或等于11.0的标本进行乙型肝炎病毒（HBV）DNA检测。结果 COI≥11.0组标本HBsAg（＋）HBsAb（-）检出率（13.84%）明显高于其他表现形式（P〈0.05）;COI值为9.0~〈11.0组各HBsAg、HBsAb表现形式检出率比较差异无统计学意义（P〉0.05）;COI值为1.0~〈9.0组标本HBsAg（＋）HBsAb（-）检出率（0.5%）明显低于其他2组（P〈0.05）。HBsAg（-）HBsAb（-）且COI≥11.0的标本304份,其中HBV DNA阳性64份,阳性率为21.0%。结论 HBcAb检测中,COI≥11和1.0~〈9.0可分别作为判断HBV现症感染和既往感染的参考指标,临床应用时应联合HBV的其他实验室标志物并结合临床综合分析。

截短型鸭乙型肝炎病毒核心蛋白原核表达、多克隆抗体的制备和鉴定

目的：构建截短型鸭乙型肝炎病毒（DHBV）核心蛋白的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达，制备多克隆抗体。方法：应用基因工程技术将编码截短型DHBV核心蛋白（DH-BcAg 1～214aa）的基因片段装入原核表达载体pRSET-B内，在宿主菌Rosetta（DE3）pLacI内进行诱导表达，运用Ni-NTA方法纯化目的蛋白。用纯化的重组蛋白免疫BALB／c小鼠制备多克隆抗体，并采用酶联免疫吸附实验（ELISA），Western blot及免疫组化检测抗体的灵敏度和特异性。结果：成功地构建了含截短型DHBV核心区基因的质粒，并纯化得到了相对分子质量（Mr）约为28000的目的蛋白，用之免疫BALB／c小鼠获得了高效价的特异性多克隆抗体。结论：获得的重组截短型DHBV核心抗原纯度高，免疫反应性强；获得的多克隆抗体有较高的效价和较好的特异性，为DHBV的检测和研究奠定了实验基础。

乙型肝炎病毒核心IgM抗体检测在乙型肝炎患者中的意义

目的探讨乙型肝炎病毒核心IgM抗体(抗-HBc-IgM)检测在乙型肝炎(乙肝)患者中的意义。方法采用酶联免疫吸附试验,检测234例乙肝患者血清中的抗-HBc-IgM。结果乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)和乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)阳性患者组抗-HBc-IgM阳性率为31.0%(31/100),HBsAg、乙肝病毒e抗体(抗-HBe)和抗-HBc阳性患者组抗-HBc-IgM阳性率为17.0%(17/100),其他乙肝病毒标志物阳性患者组抗-HBc-IgM阳性率为5.9%(2/34)。结论抗-HBc-IgM检测对于明确乙肝患者的感染病程以及患者的病情、预后评估具有重要的意义。

乙型肝炎患者HBeAg、前-S1抗原、核心抗体-IgM与ALT升高的比较

目的研究乙型肝炎患者在表面抗原(HBsAg)阳性情况下,检测乙肝e抗原(HBeAg)、前S1抗原(PreS1Ag)、核心抗体IgM(抗HBcIgM)与谷丙转氨酶(ALT)升高的关系及对肝功能的影响。方法对185例乙肝HBsAg阳性患者的HBeAg、PreS1Ag、抗HBcIgM及ALT进行检测,并对其阳性率及相互关系进行分析比较。结果HBeAg阳性时,ALT升高占45%;PreS1Ag阳性时,ALT升高占29%;抗HBcIgM阳性时,ALT升高占96%。结论对于乙肝感染者,只检测“两对半”是不够的,补充PreS1Ag、抗HBcIgM检测十分必要,它们对乙肝病毒感染者的早期诊断、病毒分别、疗效观察、预后估计以及对肝功能的损伤程度等可起到重要的提示作用。

酶免疫竞争一步法检测乙型肝炎病毒核心抗体的影响因素探讨

探讨乙型肝炎病毒核心抗体检测的影响因素,排除假阳性结果。实验表明:1.改进二步法可以作为一种消除一步法中假阳性结果的有效办法。2.时差操作是假阳性增高的重要原因。

乙型肝炎病毒核心抗体变色稀释液的配制及应用

目的探讨一种适合临床应用的乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc)变色稀释液的配制。方法从近中性的指示剂中选择一种酸碱指示剂配成应用浓度的变色稀释液,用无色和变色稀释液同时检测抗-HBc。结果无色和变色稀释液检测抗-HBc时阴性和阳性结果完全一致,两者的直线相关性好(r=0.995,P>0.05)。结论变色稀释液应用于临床,增加了实验的可靠性,提高了实验效率,避免误诊和漏诊。

单项乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性的意义

单项抗-HBc的意义还不太清楚。本文从单项抗-HBc阳性的传染性和单项抗-HBc阳性者对乙型肝炎疫苗接种的反应两方面综述了近几年有关单项抗-HBc的研究简况。

乙型肝炎核心抗体定量检测的研究进展

据WHO统计,世界上有超过20亿HBV感染者和大约3.78亿慢性HBV患者,每年大约450万HBV新发感染.我国是HBV感染的中高流行区,2006年全国乙肝血清流行病学调查结果显示,我国的慢性HBV携带率为7.18%,而乙型肝炎一旦慢性化后,10%-20%可发展为肝硬化,部分转变为重型肝炎、肝衰竭,1%-5%可演变为肝癌而危及生命.由此看来,优化乙型病毒性肝炎HBV的诊治是一项非常重要和艰巨的任务.

单项乙型肝炎病毒核心抗体阳性的原因及其临床意义

目的分析血清单项乙型肝炎病毒核心抗体阳性的可能原因并探讨其临床意义。方法收集酶联免疫吸附竞争一步法检测的500例单项乙型肝炎病毒核心抗体阳性血清,用微粒子酶免疫法进行验证。分析单项乙型肝炎病毒核心抗体阳性血清的丙型肝炎病毒抗体、人类免疫缺陷病毒抗体及乙型肝炎病毒DNA。结果在酶联免疫吸附竞争一步法检测的单项乙型肝炎病毒核心抗体阳性血清中,用微粒子酶免疫法进行检测显示乙型肝炎病毒核心抗体阳性率仅为67.2%。单项乙型肝炎病毒核心抗体阳性标本中丙型肝炎病毒抗体阳性率为5.36%;可检测到乙型肝炎病毒DNA为3.87%,DNA拷贝数为(159±64)copies/ml;未发现人类免疫缺陷病毒抗体阳性。结论酶联免疫吸附竞争一步法检测乙型肝炎病毒核心抗体存在一些假阳性结果。隐性乙型肝炎病毒感染、丙型肝炎病毒感染是血清单项乙型肝炎病毒核心抗体阳性的原因。

乙型肝炎核心抗体放射免疫定量试剂盒的研制

以聚苯乙烯小球为固相载体,在小球表面包被一层基因工程制备的乙型肝炎核心抗原(HBcAg),以125I标记的乙型肝炎核心抗体(125I-Anti-HBc)作为标记物,采用固相放射免疫竞争法研制成乙型肝炎核心抗体放射免疫定量试剂盒(Anti-HBc-RIA)。本试剂盒的灵敏度为0.8NCU/mL,批内变异系数<9.9%,批间变异系数<13.8%,回收率为92.6%～109.2%。正常参考值为0～2.0NCU/mL。

三种方法检测乙型肝炎病毒核心抗体结果的比较

目的比较酶联免疫吸附试验(ELISA)、微粒子酶免分析(MEIA)、电化学发光免疫分析(ECLIA)三种方法检测乙型肝炎病毒核心抗体(抗HBc)的结果,探讨ELISA检测抗HBc结果的正确性。方法用ELISA筛选出100例抗HBc阳性标本和60例抗HBc阴性标本,分别用MEIA和ECLIA检测。将ELISA筛选出的100例抗HBc阳性标本1∶30稀释,再分别用ELISA、MEIA和ECLIA检测。结果(1)100例ELISA检测抗HBc阳性标本,MEIA、ECLIA检测阳性率100%;60例ELISA检测抗HBc阴性的标本,MEIA、ECLIA检测阳性率分别为60%、(36/60)、53%(32/60);MEIA和ECLIA检测抗HBc的结果与ELISA有显著性差异,P值均<0.05。(2)100例ELISA检测抗HBc阳性标本1∶30稀释后,ELISA、MEIA和ECLIA检测阳性率分别为38%、74%和68%。结论MEIA、ECLIA检测抗HBc的阳性率明显高于ELISA。100例ELISA检测抗HBc阳性标本1∶30稀释后用ELISA、MEIA和ECLIA检测,三者阳性率均下降。

探讨ELISA法检测乙型肝炎病毒核心抗体灰区的设置

目的:探讨如何设置ELISA法检测乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)的灰区。方法:选取40例新疆医科大学附属中医医院患者血清标本经酶联免疫吸附法(ELISA)法检测乙型肝炎病毒核心抗体OD值为0-0.1阳性的乙型肝炎患者血清,将该40例标本进行混合,用小牛血清按一系列比例稀释,使用上海科华有限公司生产的HBcAb试剂盒进行检测,得出各比例的S/CO值和变异系数(CV)值;以S/CO值为自变量、CV为因变量,拟合方程,得到S/CO值与CV值对应关系的方程式;根据方程计算S/CO值为1时(临界值血清)的CV;按照灰区计算公式1±2×CV计算灰区上下限,即为灰区的范围。结果:采用ELISA试验检测HBcAb的灰区范围(S/CO值)为:0.406～1.59。结论:本实验室使用上海科华有限公司生产的HBcAb试剂盒进行试验,灰区结果S/CO值处在0.406～1.59的患者标本应用其它不同厂家的试剂盒进行复检,以减少假阳性、假阴性的发生几率。

截短型鸭乙型肝炎病毒核心蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

目的:制备能与鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHB-cAg)特异性结合的单克隆抗体(mAb),使之能特异性地对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)进行检测。方法:以原核表达的截短型鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg1-214)免疫BALB/c小鼠后常规杂交瘤技术进行细胞融合,有限稀释法克隆化,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组织化学(IHC)筛选、鉴定。结果:筛选出3株(3H4、4A11、5A12)能有效分泌抗鸭乙肝病毒核心抗原的杂交瘤细胞株。该mAb可用于ELISA、IHC和Westernblot研究。结论:获得了3株有效分泌抗核心抗原的mAb,可用于鸭乙肝病毒相关肝病组织与血清的检测。