多参数在实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA室内质控中的应用

目的:探讨多参数室内质控方法在实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)的意义。方法:以实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA,统计分析我院2012年10月至12月阳性质控品检测结果的对数值、标准曲线的斜率、截距、相关系数(r),以及系列标准品扩增Ct值的均值(X)、标准差(s)和变异系数(cv);并以各参数结果在±3s内作为室内质控在控判断。结果:当只用阳性质控品检测结果对数值超过±3s作为质控失控判断时,本文观察时间段有两次结果失控;如以斜率、截距、相关系数和标准品扩增Ct值超过±3s作为室内质控失控判断时,这两次结果都未失控。按阳性质控品失控规则对失控的两次标本进行重新检测后前后结果都一致,说明阳性质控品结果失控是偶然误差造成,当斜率、截距、相关系数和标准品扩增Ct值都未失控时,仅有某个水平阳性质控品失控可考虑是偶然原因。结论:实时荧光定量PCR检测HBV-DNA的室内质控中,用阳性质控品检测结果的对数值,结合标准曲线的斜率、截距和相关系数,以及标准品扩增的Ct值作为室内质控的监测手段,可为HBV-DNA检测提供更可靠的结果保证。

不同核酸提取方法对HBV-DNA检测性能验证情况分析

目的评估2种乙型肝炎病毒(HBV)-DNA提取方法及2家检测试剂的性能,有助于选择优化提取试剂和检测试剂。方法2023年4月采用达安全自动核酸提取仪提取法(磁珠法)和手工提取法(一步法),并用达安和圣湘2种HBV-DNA试剂检测,对其进行精密度、正确度、线性范围、检出限及抗干扰能力等性能进行验证和评价。结果达安全自动核酸提取仪提取达安试剂检测、手工提取达安试剂检测和手工提取圣湘试剂检测在精密度、正确度、线性范围、检出限方面验证结果均达标;达安全自动核酸提取仪提取圣湘试剂检测在低值检测中变异系数大于5%,最低检测限验证不合格;抗干扰能力方面,全自动核酸提取仪提取的2.0 g/dL血红蛋白浓度的样本用达安和圣湘试剂检测结果均不受影响。手工提取甘油三酯浓度达3000 mg/dL的样本用达安和圣湘试剂检测的结果均不受影响。结论不同厂家的提取和检测试剂避免混用,达安和圣湘试剂对HBV-DNA定量检测的结果均符合要求。

血清乙型肝炎病毒前S1抗原检测的临床意义

近年来血清乙型肝炎病毒前S1抗原（简称前S1抗原）作为HBV血清学新的标志物逐渐显现出较高的临床应用价值。通过前S1抗原和乙肝五项的联合检测更能够敏感的反映出乙型肝炎患者是否有病毒复制、肝细胞损伤、抗病毒治疗效果等信息，对病情的预后及治疗判断具有广泛的临床意义。

血清抗原检测不同乙型肝炎的抗原分析

目的探讨血清抗原检测对乙型肝炎患者的临床价值。方法本研究以2014年1月-2015年6月收入我院治疗的160例乙型肝炎患者为试验组,并以同期于我院进行健康体检的100位健康者为对照组,对两组人员进行PreS1抗原检测,观察两组血清抗原检测结果,并比较试验组患者不同HBV M模式的血清PreS1抗原检测结果。结果试验组血清检查结果显示PreS1抗原阳性率为48.75%;而对照组血清PreS1抗原、乙型肝炎病毒标志物检测结果显示均为阴性;HBsAg、HBeAg、BcAb(+)患者PreS1抗原阳性率为79.16%,高于HBsAg、HBcAb(+)、HBsAg、HBeAb、BcAb(+),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PreS1抗原检测对乙型肝炎病毒感染具有较好的判断作用,可作为检测乙型肝炎病毒存在、复制的有效血清学指标。

血液筛查中隐匿性乙型肝炎病毒的核酸检测初步研究

目的通过对无偿献血者血液标本进行核酸检测,再对核酸检测阳性标本进行HBV DNA定量和"两对半"检测,提高隐匿性乙型肝炎病毒的检出率,缩短窗口期,保障血液检测质量。方法采用ELISA检测无偿献血者血液标本,并使用核酸检测ROCHE COBAS S201血液核酸筛查系统,对核酸检测阳性标本进行HBV DNA定量检测,同时进行乙型肝炎"两对半"检测。结果无偿献血者血液标本22467份,经两遍ELISA检测HBsAg阳性标本94人份,再对于22 273份ELISA阴性标本再进行核酸检测,结果有39人份检出为HBV DNA。结论核酸检测阳性39人份中HBsAg阳性标本8人份,其中有两例拷贝数较高,并且为HbsAg、HBeAb、HBcAb阳性。核酸检测在采供血机构血液筛查中起到了重要作用。

胶体金免疫层析法在乙型肝炎病毒表面抗原检测中的应用评价

胶体金免疫技术是20世纪80年代继三大标记技术（荧光素、放射性同位素和酶标记）发展起来的固相标记免疫测定技术，该法优点是可单份测定，简单快速。2005年卫生部门要求所有做胃镜与肠镜的患者检测前必须进行乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）检测，因时间关系，这部分患者均采用GICA进行。GICA能否取代酶联免疫吸附试验（ELISA），成为至关重要的一个问题，现将两种方法检测HBsAg进行比较，报告如下。

乙型肝炎表面抗原全血金标检测试剂的评价

目的 :探讨乙型肝炎表面抗原 (HBs Ag)全血金标检测试剂在临床快速诊断中的价值 ,观察方法的特异性、敏感性、检测时间。方法 :用 HBs Ag全血金标试剂测定 40 0例临床标本 ,对实验结果进行分析。结果 :全血金标法与 EL ISA法同时检测 40 0例样本 ,两者阳性符合率、阴性符合率、总符合率分别为 97.4%,10 0 %,99.7%。结论 :全血金标法检测 HBs Ag可以满足临床快速诊断的需要。

10 173例检测乙型肝炎标本的血清学与核酸结果分析

目的探讨临床乙型肝炎表面抗原HBsAg无反应性标本中开展乙型肝炎病毒(HBV)核酸检测的意义。方法收集2019年10月~2020年6月期间,全国23家医院10 173例标本HBV血清学和核酸检测结果,首次纳入HBsAg无反应性标本,分析血清HBV DNA定性检测结果。从中再次纳入HBV DNA阳性,且进行了乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)和乙型肝炎核心抗体(HBcAb)血清学标志物检测标本,进行Ct值区间总体分布和HBV血清学标志物模式分析。结果纳入的9186例HBsAg无反应性标本中,血清HBV DNA阳性例数为254例(2.77%)。再次纳入的HBV DNA阳性且进行HBV血清学标志物检测的168例标本中有8种HBV血清学标志物模式。其中,166例(98.81%)可能是隐匿型乙型肝炎感染(Occult hepatitis B infection,OBI)患者。结论HBV核酸检测能从HBsAg无反应性标本检出一定比率的乙型肝炎患者,特别对OBI患者具有较好的检出效果。HBV核酸筛查对OBI检出以及防止HBsAg漏检具有重要的意义。

300例反向间接血凝法与放射免疫法检测乙型肝炎表面抗原的比较

本文是采用反向血凝法、放射免疫法,对门诊和住院别人血样300例做了乙肝表面抗原检测并进行了比较。用放免法检测乙型肝炎表面抗原灵敏度高,标准化程度也很高,非特异性结合反应低,可测出反向血凝法1:16以下被判断为阴性而被遗漏的6.67%阳性乙肝患者,对乙肝早期潜伏患者为临床及早诊断治疗及预防提供参考依据。另外放免法对医院手术器械受到乙肝HBs Ag感染有很高的检出率,放免法可作为医院预防感染与消毒前后判断乙肝HBs Ag的首选方法。

对2016年至2018年四川省某高校大学生进行乙型肝炎病毒检测的情况分析

目的:分析对2016年至2018年四川省某高校的大学生进行乙型肝炎病毒检测的情况。方法:将2016年至2018年四川省某高校的14 381名新生作为研究对象。在这些新生入校时,使用ELISA(酶联免疫法)对其进行乙肝五项检测。然后,分析这14 381名新生乙肝表面抗原(HBsAg)的检出率、其中大三阳(HBsAg、乙肝e抗原、乙肝核心抗体三项指标均呈阳性)和小三阳(HBsAg、乙肝e抗体、乙肝核心抗体三项指标均呈阳性)人数的占比及其乙肝表面抗体(HBsAb)的检出率。结果:2016年4182名新生HBsAg的检出率为2.82%,其中大三阳和小三阳人数的占比分别为38.13%、45.76%,其HBsAb的检出率为52.61%。2017年4692名新生HBsAg的检出率为2.22%,其中大三阳和小三阳人数的占比分别为55.7%、37.5%,其HBsAb的检出率为50.31%。2018年5507名新生HBsAg的检出率为2.07%,其中大三阳和小三阳人数的占比分别为39.4%、43.8%,其HBsAb的检出率为34.94%。结论:2016年至2018年四川省某高校大学生乙型肝炎病毒的感染率逐步降低,其乙肝表面抗体的检出率呈下降趋势,应加强对其进行乙型肝炎疫苗的查漏补种工作。

一种国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂不同检测平台上的验证情况分析

目的将圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)在不同荧光定量PCR系统进行性能验证,以给出该试剂盒在不同检测平台上的性能评价。方法依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)颁布的EP系列文件和《医学实验室质量和能力认可准则》相关文件,应用Roche LightCycler~480 II实时荧光定量PCR系统及美国ABI 7500型实时荧光定量PCR系统对圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行临床样本精密度、正确度、可报告范围和检测下限的性能验证实验。结果 LightCycler~480 II实时荧光定量PCR系统:2×10~6IU/mL浓度水平批内精密度为1.38%,批间精密度为0.25%;2×10~4IU/mL浓度水平批内精密度为0.35%,批间精密度为0.79%。正确度验证可溯源标准品,偏倚均小于7.5%,符合厂家说明及文件要求。HBV DNA定量结果在2.1×10~2IU/mL至2.1×10~7IU/mL浓度水平范围内线性关系良好(R^2=0.9994),临床可报告范围为2.1×10~2IU/mL^2.1×10~8IU/mL。该系统检测下限为148 IU/mL。ABI 7500型实时荧光定量PCR系统:2×10~6IU/mL浓度水平批内精密度为0.70%,批间精密度为1.34%。2.5×10~4IU/mL浓度水平批内精密度为1.18%,批间精密度为3.01%。正确度验证可溯源标准品,偏倚均小于7.5%,符合厂家说明及文件要求。HBV DNA定量结果在2×10~2IU/mL至2×10~8IU/mL浓度水平范围内线性关系良好(R^2=0.9991),临床可报告范围为2×10~2IU/mL^2×10~9IU/mL。该系统检测下限为203 IU/mL。结论圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)在Roche LightCycler~480 II实时荧光定量PCR系统及美国ABI 7500型实时荧光定量PCR系统上的性能验证结果均符合试剂说明书性能范围,检测结果无明显差异,均可准确快捷的对HBV DNA定量检测,为后续超敏定量工作奠定基础。

荧光定量PCR检测HBV-DNA与化学发光酶免疫法检测乙型肝炎五项的相关性研究

目的研究荧光定量PCR检测HBV-DNA和化学发光酶免疫法在乙型肝炎五项检测的临床相关性。方法将通过FQ-PCR方法筛选出的显示HBV-DNA阳性的血清利用化学发光酶免疫法对其进行乙型肝炎五项的检测,观察对比结果。结果全部样本中大三阳和小三阳所占比例最高,其中高HBV-DNA占64.7%、2.9%,低HBV-DNA占17.9%、81.3%,中HBV-DNA占17.4%、15.8%,其差异P<0.05,具有统计学意义;HBeAb和HBeAg阳性标本在HBV-DNA水平存在差异,P<0.05,具有统计学意义。结论荧光定量PCR检测HBVDNA和化学发光酶免疫法对乙型肝炎患者具有重要意义具有直接相关性,但是HBV-DNA载量数值对于乙型肝炎五项定量结果数值不存在直接关联。

ELISA法和胶体法检测乙型肝炎两对半的假阴性和假阳性率对比研究及原因分析

目的探讨ELISA法和GICA法检测乙型肝炎两对半出现假阴性和假阳性的原因及预防措施。方法分别用ELISA法和GICA法对315例门诊和住院患者血清标本进行检测,并与MEIA法进行比较,观察两组检测方法的检测结果。结果以MEIA为参照,ELISA有38例未检出,假阳性率为5.36%(3/56);GICA有165例未检出,出现的假阴性率为70.21%(165/235)。结论 ELISA法和GICA法都有各自的优缺点,ELISA法适用于常规检测,GICA法适用健康人群的筛查。

乙型肝炎/梅毒联合检测试纸条在献血前初筛中的应用

目的在献血前采用乙型肝炎/梅毒联合检测试纸条对献血者进行初筛,查看其对降低不合格血液采集的影响。方法于2015年1月至2015年12月期间对于献血者在献血前采用HBsAg胶体金试纸条进行检测筛查,于2016年1月至2016年12月期间对于献血者在献血前采用乙型肝炎/梅毒联合检测试纸条经检测筛查,对比两年间抗-TP、HBsAg不合格的情况。结果经过对比研究发现,使用HBsAg胶体金试纸条检测的无偿献血者抗-TP的不合格率为0.38%(390/101807),HBsAg不合格率为0.28%(291/101807);采用乙型肝炎/梅毒联合检测试纸条检测的无偿献血者抗-TP的不合格率为0.21%(236/109961),HBsAg不合格率为0.18%(201/109961)。两组的抗-TP不合格率存在显著差异(P <0.05),HBsAg不合格率存在显著差异(P <0.05)。结论在献血前采用乙型肝炎/梅毒联合检测试纸条对献血者进行初筛,可以减少不合格血液的采集情况,降低抗-TP、HBsAg造成的血液反应概率,因此值得推广使用。

学龄前儿童接种乙型肝炎疫苗后乙型肝炎表面抗体检测分析

目的:了解乙型肝炎表面抗体(抗HBs)产生情况及其持续保持时间,探讨乙型肝炎疫苗接种效果,提出相应的干预措施。方法:回顾分析2009年对城区12所幼儿园的学龄前儿童进行抗HBs检测。采静脉血,使用酶联免疫法。结果:检查出抗HBs阳性2179例,阳性率为49.65%,年龄越小免疫效果越好;随着年龄增长抗HBs阳性检出率逐渐降低。结论:应当适时接种乙型肝炎疫苗,最大限度地阻断乙型肝炎病毒传播,保证儿童健康成长。