e抗原阳性慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗中HBsAg、HBeAg、HBVDNA联合监测的研究进展

慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染呈全球性，每年死于与之相关的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌者在100万例以上。多年来经过各国学者的不懈努力，在HBV感染预防和治疗方面取得了瞩目的成就，但仍有需进一步研究的问题，本文针对e抗原阳性慢性乙型肝炎（chronic hepatitisB，CHB）患者抗病毒治疗中联合监测HBsAg、HBeAg、HBVDNA的研究进展做一综述。

乙型肝炎病毒(HBV)的ELISA检测及化学发光法检测的诊断价值

目的 本研究探讨化学发光法与酶联免疫吸附法在(HBV)中的诊断价值。方法 收集本院2020年6月—2023年4月收治的300例乙型病毒性肝炎病例的血标本为观察组,另随机选择同期住院的300例非乙型病毒性肝炎病例的血标本为对照组。两组均采用HBV的ELISA检测及化学发光法检测,对比两组检测结果。结果化学发光法对HBV的标准曲线相关系数R2=0.998,平均批内变异系数2.98%,批间变异系数4.20%,优于ELISA检测的平均批内变异系数6.27%及平均批间变异系数7.74%;化学发光法的最低检出浓度为2.5ng/mL,ELISA检测乙型肝炎病毒最低检出浓度为25ng/mL,化学发光法灵敏度优于ELISA检测法。ELISA检测阳性率明显低于化学发光法检测结果,阴性率高于化学发光法。结论 化学发光法有利于早期诊断乙型病毒性肝炎,较ELISA检测具有很高的灵敏度与特异度。

HBsAg阴性伴HBcAb阳性患者血清HBV-DNA含量检测对隐匿性乙型肝炎病毒感染的检出价值

目的:探讨乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性伴乙型肝炎核心抗体(HBcAb)阳性患者血清的HBV-DNA含量检测对隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的检出价值。方法:收集1138例经化学发光免疫分析法(CLIA)检测乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)且筛查结果提示HBsAg阴性伴HBcAb阳性的患者,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)对血清样本进行HBV-DNA含量复筛,对OBI检出情况进行分析。结果:PCR共检出35份HBV-DNA阳性,OBI检出率3.08%,其中HBcAb、HBsAb阳性和HBcAb阳性HBV-M模式的检出率较高,分别为4.11%、4.04%,HBV-DNA载量均<200 IU/ml,其中25份OBI样本HBV-DNA载量<20 IU/ml,占71.43%。随着血清HBcAb样本吸光度/临界值(S/Co值)升高,反应性A组、B组、C组HBV-DNA阳性检出率依次升高,且组间两两比较均存在统计学差异(均P<0.05),但不同HBcAb反应性组间HBV-DNA分布比较均无统计学差异(均P>0.05)。596例患者接受肝功能检查,肝损伤占22.99%,且肝损伤组HBV-DNA阳性率、HBcAb高反应性(S/Co值≥10.0)均高于正常组(均P<0.05)。结论:常规检测HBsAg阴性伴HBcAb阳性提示存在OBI可能,且OBI发生风险随HBcAb反应性S/Co值升高而升高,应进一步行HBV-DNA含量检测判断OBI,降低OBI漏诊和临床HBV传播风险。

International Journal of Infectious Diseases|丁型肝炎病毒在中国有无HIV-1感染的HBsAg阳性人群中的流行特点

丁型肝炎病毒(HDV)可加剧HBV感染进展,现有研究为全球范围内HDV患病率的变化提供了证据,但我国内地的相关数据很少。虽然HBV的流行率为7.18%,但HBsAg阳性个体的数量约为7 400万,阐明HDV在我国的流行病学十分重要。2023年12月,首都医科大学附属北京地坛医院张福杰教授团队的研究,阐明了HDV在我国有无HIV-1感染的HBsAg阳性人群中的传播特点,调查了HDV血清学和病毒学流行率、分子流行病学和高危因素,为临床策略和有效的HDV疫情防控提供关键数据。

慢性乙型肝炎患者血清HBsAg水平与HBeAg、HBV-DNA载量的关系

目的研究慢性乙型肝炎患者血清HBsAg水平与HBeAg、HBV-DNA载量的关系。方法收集155例慢性乙肝患者的血清标本,采用免疫化学发光法检测血清HBsAg与HBeAg水平;采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量,并分析相互之间的关系。结果 HBV-DNA阳性组患者血清HBsAg水平高于HBV-DNA阴性组,差异有显著性;在HBV-DNA阳性组中,患者血清HBsAg水平随着HBV-DNA载量的增加而增加,低病毒载量组患者血清HBsAg水平最低,高病毒载量组时患者血清HBsAg水平明显最高,且高病毒载量组与其他各组差异有显著性;血清HBsAg水平在HBeAg阳性及HBeAg阴性组之间相比,差异有显著性;血清HBsAg水平与HBeAg定量有相关关系。结论血清HBsAg水平定量检测可反映宿主体内乙肝病毒复制的水平。

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与HBsAg和HBeAg水平的相关性分析

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与HBsAg和HBeAg滴度的关系。方法在951例慢性乙型肝炎患者,采用FQ-PCR法和Abbott化学发光微粒子免疫分析技术分别测定血清HBV DNA水平及HBsAg和HBeAg滴度,分析HBV DNA水平与HBsAg和HBeAg滴度的相关性。结果在951例患者中,HBVDNA阳性率为53.83%(512/951);患者血清HBV DNA水平与HBsAg和HBeAg滴度呈正相关(rs=0.45和re=0.49,P<0.05);在HBV DNA水平≥7lg拷贝/毫升患者,血清HBsAg和HBeAg滴度高于HBV DNA为3～7lg拷贝/毫升患者,HBV DNA为3～7lg拷贝/毫升患者血清HBsAg和HBeAg滴度大于HBV DNA<3lg拷贝/毫升患者,差异均有统计学意义(P<0.05);将HBsAg分为<1000 IU/ml、1000～10000 IU/ml和≥10000 IU/ml3组,结果不同HBsAg滴度患者血清HBV DNA水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论在血清HBV DNA≥7lg拷贝/毫升和HBsAg滴度≥10000 IU/mL患者,HBV DNA水平与HBsAg滴度呈正相关,在HBV DNA>3 lg拷贝/毫升患者,血清HBV DNA水平与HBeAg滴度呈正相关。

尿HBV DNA在乙型肝炎病毒相关性肾炎诊断中的价值

目的探讨尿HBVDNA在乙型肝炎病毒相关性肾炎的诊断价值。方法本研究共入组152例患者,分为3组:乙型肝炎病毒相关性肾炎组66例,非乙型肝炎病毒相关性肾炎组66例,慢性乙型肝炎无肾损害患者20例。应用PCR方法检测血尿HBV DNA;乙肝五项定量采用酶联免疫法检测。结果乙型肝炎病毒相关性肾炎患者中尿HBV DNA阳性率33%(22/66),两对照组中无1例阳性。尿HBVDNA在乙型肝炎病毒相关性肾炎的诊断特异性高达98%,具有良好的阳性预测值(0.96)和阴性预测值(0.60)。尿HBV DNA或尿HBV DNA与血清HBeAg联合诊断价值优于尿HBV DNA与血清HBV DNA、血清HBsAg、血清HBeAg联合对乙型肝炎病毒相关性肾炎的诊断价值。结论尿HBV DNA可能作为乙型肝炎病毒相关性肾炎的一种新无创辅助诊断指标。

乙型肝炎患者抗病毒治疗过程中肝组织HBV cccDNA与血清学标志物变化的动态变化研究

目的探讨慢性乙型病毒性肝炎患者抗病毒治疗过程中肝组织乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)与相关血清学标志物变化。方法 88例乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性的慢性乙型病毒性肝炎患者给予恩替卡韦抗病毒治疗96周。分别于0、24周、48周、96周检测肝组织中和血清HBV cccDNA、血清HBV DNA、乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)、HBeAg定量,并分析肝组织HBV cccDNA与血清学标志物变化的关系。结果与基线比较,治疗后24周时患者肝组织HBV cccDNA,血清HBV cccDNA,血清HBV DNA和HBs Ag均显著降低(P<0.05或P<0.01);治疗后24周和48周比较:肝组织HBV cccDNA,血清HBV cccDNA,血清HBV DNA差异有统计学意义(P<0.01);48周与96周检测指标相比:肝组织HBV cccDNA定量差异无统计学意义(P>0.05);血清HBV DNA定量和血清HBV cccDNA定量差异有统计学意义(P<0.01)。血清HBs Ag和HBeAg差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清HBV DNA定量和血清HBV cccDNA定量同步下降幅度大于肝组织cccDNA定量和HBs Ag、HBeAg定量,肝组织HBV cccDNA定量、HBs Ag、HBeAg定量在48周后逐步趋于稳定。血清HBs Ag、HBeAg定量与肝组织HBV cccDNA具有较高的一致性,血清HBs Ag、HBeAg定量检测能更准确、方便、快捷指导临床诊断。

乙型肝炎病毒感染相关性肝癌中HBV cccDNA水平与突变关系的研究

目的:研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染相关性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,ccc DNA)水平与突变关系。方法:运用特异性荧光定量PCR定量分析了12例肝癌组织和癌旁组织中乙肝病毒复制水平的表征因子HBV ccc DNA,HBV total DNA及前基因组RNA(pregenome RNA,pg RNA)的表达水平,再用滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)特异性扩增癌组织中HBV ccc DNA,测序分析了病毒基因组4个编码调控区域pre C/C、RT、X、pre S中ccc DNA序列的突变。最后检测了肿瘤组织ccc DNA的AP位点。结果:HBV ccc DNA在癌组织的表达水平明显低于癌旁组织(3.32 copies/cell vs.9.64 copies/cell,P=0.029),但是HBV总DNA和pg RNA的表达没有明显差异(16.94 copies/cell vs.12.18 copies/cell,P=0.325,75.54 copies/cell vs.22.46 copies/cell,P=0.128);在肝癌组织中,HBV ccc DNA pre C/C和X区间,G-A突变是主要的突变类型;其次,pre C/C和X区域发生G-A突变的位置上,均更倾向于GA二联核苷酸组合方式,在肝癌中所占比例为37.1%和40%。最后,肿瘤组织中APE1酶处理后,HBV ccc DNA水平明显下降(1 011 copies/μl vs.501.8 copies/μl,P=0.058)。结论:HBV ccc DNA水平在癌组织中明显低于癌旁组织,可能与癌组织中HBV ccc DNA发生大量GA突变及形成的AP位点有关。

乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV DNA和HBV-M及肝功能的相关性探讨

目的探讨兰州地区乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清中前S1抗原(Pre-S1Ag)与HBV DNA、HBV-M及肝功能之间的相关性。方法对905例HBV感染者(HBV感染组)及100例健康体检者(健康对照组)进行Pre-S1Ag、HBV-M、HBV DNA和肝功能检测。结果 905例标本中,Pre-S1Ag和HBV DNA阳性率分别为68.51%(620/905)和67.96%(615/905),差异均无统计学意义(χ2=30.064,P>0.05);570例HBeAg阳性组中,HBV Pre-S1阳性率为85.08%(485/570),显著高于HBeAg阴性组的Pre-SAg1阳性率40.30%(135/335),差异有统计学意义(χ2=108.881,P<0.01)。Pre-S1Ag阳性组与阴性组ALT、AST异常率分别为53.22%、25.96%和51.29%、32.98%,差异有统计学意义(χ2ALT=53.148,P<0.001,χ2AST=66.635,P<0.001)。结论 Pre-S1Ag是乙肝病毒感染与复制的可靠指标,与HBV-DNA阳性相关度高,是对HBeAg的重要补充和加强,可为指导临床治疗提供更及时可靠的实验依据。

乙型肝炎病毒c基因启动子变异与血清HBeAg及HBV DNA的关系

目的 :研究乙型肝炎病毒 (HBV ) c基因启动子 (BCP)变异与 e抗原及 HBV DNA含量的关系。方法 :采用错配引物聚合酶链反应 (PCR) -限制性片段长度多态性 (RFL P)分析及荧光定量 PCR(FQ- PCR)对 10 5例血清 HBV DNA阳性 HBV感染者进行 HBV BCP基因变异及 HBV DNA定量测定。结果 :BCP变异组 HBe Ag阴性率为 84 .4 % (5 4 / 6 4 ) ,非 BCP变异组为2 6 .8% (11/ 4 1)。 BCP变异组 HBV DNA含量在 HBe Ag+ 病例 (10 8.79± 0 .85vs 10 7.4 8± 0 .39copy/ ml,P <0 .0 1)及 HBe Ag- 病例(10 8.0 5± 1 .1 6 vs10 6 .55± 0 .91 copy/ ml,P<0 .0 1)中均较非 BCP变异组高。结论 :HBV BCP变异在下调前 c/ c基因表达的同时可能促进 HBV复制 ,对 HBs Ag+ / HBe Ag- 患者需要进一步检测 HBV DNA,以免由于基因变异导致将 HBe

慢性乙型肝炎血清HBsAg定量及HBsAg/HBV DNA比值与肝组织病理炎症活动度的相关性分析

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清HBsAg定量水平及HBsAg/HBV DNA比值与肝组织病理炎症活动度的相关性。方法选取137例慢性乙型肝炎患者为研究对象,荧光定量PCR检测血清HBV DNA载量,化学发光微粒子免疫检测法定量检测血清HBsAg定量。患者均进行肝组织穿刺病理学检查,分析HBsAg、HBsAg/HBV DNA比值与肝组织病理炎症活动度的相关性。结果本研究137例患者中HBeAg抗原阳性102例,阴性35例。HBeAg抗原阳性组患者平均年龄低于HBeAg抗原阴性组,HBsAg定量、HBV DNA载量高于HBeAg抗原阴性组,HBsAg/HBV DNA低于HBeAg抗原阴性组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。HBeAg抗原阳性患者血清HBsAg定量与HBV DNA载量、HBsAg/HBV DNA比值成正相关,与ALT呈负相关,HBV DNA载量、HBsAg/HBV比值与ALT呈负相关,差异均有统计学意义(P均<0.05)。HBeAg抗原阳性患者中,HBsAg定量与病理炎症分级呈负相关(r=-0.412,P<0.05),与病理纤维化分级呈负相关(r=-0.315,P<0.05);HBV DNA与病理炎症分级呈负相关(r=-0.415,P<0.05),与病理纤维化分级呈负相关(r=-0.285,P<0.05)。结论 HBeAg抗原阳性慢性乙肝患者HBsAg与HBV DNA呈正相关,HBsAg与病理炎症分级及病理纤维化分级呈负相关,HBsAg、HBsAg/HBV DNA比值及ALT均可作为肝脏炎症程度的判断指标。

乙型肝炎病毒HBcAg免疫优势CTL表位多肽在HBV转基因小鼠体内的免疫学功能研究

目的 探讨基于乙型肝炎 (Hepatitisbvirus,HBV)核心抗原免疫优势细胞毒性T淋巴细胞 (CytotoxicTlympho cyte,CTL)表位的治疗性多肽抗原组分、结构以及在HBV转基因小鼠体内的免疫学功能。方法 用分子设计的理论和方法 ,设计基于HBV核心抗原免疫优势性CTL表位、Pre S2B细胞表位及破伤风类毒素通用TH 表位的治疗性多肽疫苗候选分子 ,经Merrifield固相多肽合成技术合成 ,经高效液相色谱 (HPLC)纯化、鉴定。以HBV转基因小鼠为试验对象 ,进行体内免疫学功能研究。结果 所设计治疗性多肽分子可在体诱导较强的抗原特异性CD8+ T细胞应答和适度的抗体反应 ,并抑制HBV特异性抗原的分泌和乙型肝炎病毒复制。结论 提示所设计基于HBV核心抗原免疫优势性CTL表位、Pre S2B细胞表位及破伤风类毒素通用TH 表位的多肽分子可作为乙型肝炎治疗性多肽疫苗候选分子。

肝功能正常的慢性乙型肝炎病毒感染者血清HBeAg及HBV DNA与肝组织病理改变的关系

目的了解肝功能正常的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者肝组织病理改变特征,并分析血清HBeAg及HBV DNA定量与肝组织病理改变的关系。方法选取肝功能正常的慢性HBV感染者90例,行肝穿刺病理检查,依据血清HBeAg及HBV DNA将患者分组,分别比较HBeAg阳性和阴性组及HBV DNA阳性和阴性组患者肝组织炎症分级和纤维化分期结果。结果90例患者100%存在肝组织损伤,其中肝硬化8例(8.9%);慢性乙型肝炎轻度62例(68.9%),中度8例(8.9%),重度12例(13.3%)。82例病理诊断慢性乙型肝炎的患者中,炎症分级G≥2者30例(36.6%);纤维化分期S≥2者28例(34.15%)。HBeAg阴性组病理炎症分级及纤维化分期均明显重于阳性组(P值均<0.05)。HBV DNA阴性和阳性组肝组织炎症分级和纤维化分期差异均无统计学意义。结论肝功能正常的慢性HBV感染者,肝组织病理皆非"正常";血清HBeAg、HBV DNA均不能反映肝脏损伤情况;对此类患者制定治疗方案时应考虑肝组织病理检查结果。

乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因重组杆状病毒的构建及鉴定

目的 利用Bac -to-Bac杆状病毒表达系统 ,构建乙型肝炎病毒 (HBV)表面抗原基因的重组杆状病毒。方法 构建含有HBVS基因的表达截体pFBDHTa -S ,转化DH10Bac感受态菌。利用其含有的细菌Tn7转座系统 ,将该基因重组至杆状病毒穿梭质粒bacmid中 ,转染昆虫细胞Sf9,获得含有HBVS基因的重组杆状病毒。结果 构建了的含HBVS基因的重组杆状病毒 ,感染昆虫细胞后 ,PCR检测可以扩增出相应大小的片段。结论 利用杆状病毒表达系统 ,成功地构建了含HBVS基因的重组杆状病毒 。

宫内感染乙型肝炎病毒的新生儿及其母亲HBV基因结构分析

目的 :探讨HBV基因变异与宫内感染的关系 .方法 :扩增 2对发生宫内感染的新生儿及母亲血清中 2 5kbHBVDNA ,克隆、测序并分析其基因结构 .同时用免疫染色法检测孕妇胎盘组织HBsAg .结果 :母婴HBVDNA序列中 ,前S1、前S2和S区都发生突变并且导致相应编码蛋白的氨基酸组成发生改变 ,其中以前S2区突变率为最高 (P <0 0 1) ;而前C、C区基因只有少数核苷酸发生沉默突变 .孕妇胎盘组织各层细胞中均有HBsAg阳性信号 .结论 :新生儿HBV的细胞源性宫内感染可能主要与HBV突变株的前S/S区的基因变异有关 ,而前C/C区相对比较保守 。

乙型肝炎肝硬化患者HBV血清学模式与病毒载量关系的研究

目的通过分析乙型肝炎肝硬化患者HBV血清学模式、HBV DNA、肝功能,探讨乙型肝炎肝硬化患者抗病毒治疗的临床意义。方法回顾性分析168例乙型肝炎肝硬化患者的病史、血清病毒学指标、肝功能,按不同的指标进行分组、比较。结果168例乙型肝炎肝硬化患者中以HBV DNA阳性者占绝大多数(91.0%),其中HBeAg阴性者占81.0%;分组比较提示HBV DNA阳性组ALT、AST显著高于阴性组,ALT异常组HBV DNA载量明显高于ALT正常组(P<0.01);不同Child-Pugh分级之间HBV DNA载量无显著性差异。结论乙型肝炎肝硬化住院患者以HBV DNA阳性及HBeAg阴性者居多,HBV DNA呈较高水平复制者,肝脏炎症损害亦较重,故应及早予以抗病毒治疗。

乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV DNA及HBeAg关系

目的 探讨乙型肝炎病毒 (HBV)前S1抗原 (PreS1Ag)与HBVDNA和HBeAg之间的关系 ,以评价其在乙肝诊疗中的作用。方法 用ELISA法对 2 2 5例HBeAg阳性标本进行PreS1Ag和HBV血清标志物的检测 ,用PCR-ELISA法测定HBVDNA。结果 PreS1Ag在HBVDNA和HBsAg阳性组织中的检出率均明显高于相应的阴性组(均为P <0 0 1)。HBeAg阴性组中PreS1Ag的检出率为 4 3 0 % ,PreS1Ag与HBVDNA的符合率为 70 6 % ,与HBeAg的符合率为 6 8 4 %。结论 PreS1Ag与HBVDNA、HBeAg呈良好的相关性。作为反映HBV感染和复制的指标 ,PreS1Ag较HBeAg更敏感。

乙型肝炎病毒基因型与血清HBV DNA水平的关系

目的 探讨乙型肝炎病毒 (HBV)基因型与血清HBVDNA水平的关系。方法 采用PCR、核酸杂交和酶联显色技术以及荧光定量PCR技术 ,分别对 12 3例慢性乙型肝炎 (CHB)患者进行HBVDNA基因分型和血清HBVDNA水平的测定。结果 泉州地区CHB患者的HBV基因型以B型为主 ,其次为C型 ,部分以D型和混合型存在 ,分别占 74 80 %、17 0 7%、3 2 5 %和 5 69% ,无A、E、F型。C基因型的HBVDNA水平 (log值 )为 7 0 5± 1 3 5 ,显著高于B基因型的 6 3 2± 1 0 6,P <0 0 1;而C基因型的HBeAg含量为5 3 62± 2 5 3 2 ,亦显著高于B基因型的 40 1l± 15 17,P <0 0 1。C基因型患者的TBIL、ALT、AST均显著高于B基因型 ,而白蛋白水平则显著低于B基因型 ,P <0 0 1。结论 泉州地区CHB患者以B基因型为主 ,部分以C型、D型和混合型存在。C基因型的血清HBVDNA水平显著高于B型 。