乙型肝炎病毒受体的研究进展

由HBV感染引起的CHB及其相关疾病，如肝硬化、肝细胞癌、肝功能衰竭等，已成为严重危害人民健康的疾病。对于现已感染HBV的患者，目前临床上证实有确切疗效的药物仅为核苷（酸）类似物（NA）和干扰素，但疗效均不满意，存在疗程长、不良反应大、治愈率低且治疗费用高等问题。

发现乙型肝炎病毒受体——肝细胞的钠离子一牛磺胆酸共转运蛋白

乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）属于嗜肝DNA病毒科正肝病毒属。HBV基因组为不完整的双链DNA，约3．2kb；其包膜蛋白包括S、M及L蛋白，均为多次跨膜蛋白。S、M、L蛋白具有相同的C端，即为相同氨基酸序列的S区，但N端不同[1]。丁型肝炎病毒（HDV）是HBV的卫星RNA病毒，具有HBV的3种包膜蛋白，只有在与HBV共存时才能够包装为感染性颗粒及增殖。在研究HBV侵人细胞机制研究方面，HDV可以作为HBV的替代[2]。全球目前有近3亿人感染HBV，并有约1500万人同时感染了HDV。

乙型肝炎病毒基因组结构与功能复杂性的研究进展

关于乙型肝炎病毒(HBV)病毒的受体,HBV DNA与肝细胞基因组DNA之间的整合及其后果,HBV蛋白在肝细胞中与肝细胞蛋白之间的相互结合和相互作用,HBV DNA RNA与肝细胞中蛋白的结合及其调节作用,HBV蛋白对于肝细胞基因表达谱的影响等,目前尚不十分清楚。在HBV DNV克隆化完成之后,立即确定了4个公认的开放读码框架(ORF),但是HBVDNA中是否还会存在其他的ORF,这此,ORF编码的蛋白究竟起什么样的作用,一直是人们怀疑和探索的焦点。中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心对于HBV DNV基因组结构进行了系统研究,发现了新的,ORF。同时利用现代分子生物学技术,发现并确立了羧肽酶N(CPN)可以结合,HBV DNV的核心启支子(CP)序列,并证实这种结合可以显著提高,HBV CP的转录活性。利用酵母双杂交技术,筛选获得了HBV不同蛋白结合蛋白的新基因,为探索HBV在肝细胞中的生物学效应,开辟了新的方向。利用抑制性消减杂交(SSH)、基因芯片技术,对于HBV基因编码的反式激活蛋白所作用的靶基因进行了筛选,从面为HBV感染引起肝细胞癌(HCC)的分子生物学机制的研究提供了坚实的证据。本专题研究对于进一步深入探索和研究HBV结构与功能、表达与调控,以及HBV感染的发病的分子生物学机制的研究,将产生重要的推动作用。

与HBV preS1黏附相关的细胞受体的研究

目的通过对人肝癌细胞(HepG2)细胞膜上乙型肝炎病毒(HBV)前S1区(preS1)的结合蛋白进行分离和质谱分析,寻找与HBV黏附相关的特异受体。方法以免疫磁珠法分离与preS1肽段结合的HepG2膜蛋白,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离结合蛋白,选取目的条带进行LC-MS/MS质谱分析及数据库检索。结果 HepG2细胞与preS1结合的蛋白,通过SDS-PAGE电泳分离出了16条带,选取HepG2与preS1结合蛋白分离出重复性较好的6条带,质谱分析出14种蛋白。结论质谱分析的蛋白主要是与物质运输、细胞信号转导、抗原提呈、免疫调节以及能量代谢相关的蛋白。