血清乙型肝炎病毒表面抗原水平与血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸载量在不同阶段乙型肝炎病毒感染肝衰竭患者中的表达

目的分析血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)水平与血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)载量在不同阶段乙型肝炎病毒(HBV)感染肝衰竭患者中的表达意义。方法回顾性选取龙岩市第二医院于2020年9月至2021年9月收治的64例HBV感染肝衰竭患者作为研究对象,按照病情阶段分为慢性肝衰竭(CLF)组35例和慢加急性肝衰竭(ACLF)组29例,两组均通过电化学发光法和荧光定量法(Q-PCR)检测血清中HBsAg和HBV-DNA水平,并比较两组的因子表达情况。结果ACLF组中的HBsAg与HBV-DNA水平以及CD4+、CD8+均高于CLF组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论临床可通过分析患者血清中的HBsAg与HBV-DNA水平的表达情况,掌握不同病程阶段HBV感染患者的病情进展情况,为病症的预防和干预治疗提供参考依据。

核酸检测技术在无偿献血者乙型肝炎病毒筛查中的应用

研究核酸检测技术的实施价值,分析该措施在无偿献血者乙型肝炎病毒筛查中的效果,进而为后续筛查工作提供科学依据。方法 本次研究样本选取为梧州市中心血站检验科无偿献血者乙型肝炎病毒筛查者,样本数量为15300例,选取时间为2023年01月-2023年03月,分别进行核酸检测(NAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA),数据均纳入SPSS26.0系统,分析上述措施在疾病筛查中的价值。结果 15300例无偿献血者乙型肝炎病毒筛查者中,NAT阳性16例,ELISA阳性为2例;结果显示NAT阳性检出率高于ELISA(P<0.05)。结论 NAT的阳性检出率较高,可以实现疾病的早期诊断及治疗,对保障输血安全、预防控制输血传染病的传播起到非常重要的作用。

隐匿性乙型肝炎病毒感染的输血传播风险及防范

乙型肝炎病毒(HBV)感染是我国重大的公共卫生问题,也是输血安全领域的焦点之一。隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)是HBV感染的一种特殊的临床类型,其特征是在血清或肝脏中检测到HBV DNA,但乙型肝炎表面抗原(HBsAg)呈阴性。对献血者进行HBsAg检测尤其是核酸检测(NAT)能有效地控制大多数HBV传播,但是残余传染风险依然存在。OBI献血者是潜在的HBV传染源,含有极低病毒载量的HBV DNA,即使是高度敏感的单人份核酸检测(ID-NAT)也可能是间歇性检测到或无法检测到。目前对于OBI检测缺乏一种标准化的、经过验证的有效方法。为了提高OBI检测的准确度,需要开发更灵敏、标准化和有效的HBsAg、HBV DNA的检测方法;同时还要深入地了解OBI发展机制,准确诊断OBI以提高输血安全性。

慢性乙型肝炎患者接受核(苷)酸类似物抗病毒治疗后血清HBV-DNA的表达及临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者接受核(苷)酸类似物(NAs)抗病毒治疗后血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)的表达及临床意义。方法回顾性分析2021年1月至2022年10月河南省人民医院83例采用NAs抗病毒治疗的CHB患者临床资料,根据血清学应答标准将其分为应答组(46例)和未应答组(37例)。比较两组基线资料、治疗前及治疗3、6、12个月时血清HBV-DNA水平;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,以曲线下面积(AUC)检验血清HBV-DNA对CHB患者NAs抗病毒治疗未应答的预测价值。结果治疗前,应答组和未应答组HBV-DNA比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗前至治疗12个月的HBV-DNA呈下降趋势,组间、时点、交互效应有统计学意义(P<0.05)。绘制ROC曲线显示,治疗3个月时HBV-DNA对CHB患者NAs抗病毒治疗未应答的预测价值较低(AUC=0.694,P=0.002),治疗6个月时HBV-DNA对CHB患者NAs抗病毒治疗未应答具有一定预测价值(AUC=0.751,P<0.001)。结论血清HBV-DNA表达在CHB患者NAs抗病毒治疗前后变化明显,且治疗6个月时血清HBV-DNA可作为抗病毒治疗未应答的预测指标。

长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因18在乙型肝炎病毒相关性肝癌病人血清中的表达及其预后意义

目的探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因18(lncRNA SNHG18)在乙型肝炎病毒相关性肝癌(HBV相关HCC)病人血清中表达变化及与预后的相关性。方法选取2015年1月至2016年10月西安市第九医院乙型肝炎病人192例,分为乙型肝炎肝硬化106例(肝硬化组),乙型肝炎肝癌86例(肝癌组),同时选取正常对照组110例。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测血清中lncRNA SNHG18相对表达水平;采用Pearson相关性分析法分析HBV相关肝癌病人血清lncRNA SNHG18与甲胎蛋白(AFP)、谷丙转氨酶(ALT)的相关性;采用Kaplan-Meier法分析HBV相关肝癌血清lncRNA SN⁃HG18表达与病人预后的关系;多因素Cox回归分析法分析HBV相关肝癌病人预后的影响因素。结果对照组、肝硬化组、肝癌组血清lncRNA SNHG18水平(1.00±0.21、0.75±0.18、0.46±0.09)依次显著降低(P<0.05);TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、发生淋巴结转移、浸润深层的HBV相关肝癌病人lncRNA SNHG18低表达的比例高于TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、浸润浅层者(P<0.05)。Pearson相关分析显示,HBV相关肝癌病人血清lncRNA SNHG18水平与AFP、ALT均呈负相关(r=−0.41、−0.54,P<0.001);lncRNA SNHG18高表达HBV相关肝癌病人5年生存率高于lncRNA SNHG18低表达病人(P<0.001);lncRNA SNHG18[HR=0.86,95%CI:(0.78,0.96)]、TNM分期[HR=2.76,95%CI:(1.13,6.74)]是HBV相关肝癌病人预后不良的独立影响因素(P<0.05)。结论HBV相关肝癌病人血清lncRNA SNHG18低表达,且lncRNA SNHG18低表达是预后不良的危险因素。

乙型肝炎病毒相关性肝细胞肝癌患者血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达及临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝细胞肝癌(HCC)患者血清微小核糖核酸(miR)-125a-5p、miR-127-3p表达及临床意义。方法选取2018年1月至2020年10月该院收治的90例HBV相关性HCC患者作为HBV相关性HCC组。另选取同期该院的90例体检健康者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达。分析miR-125a-5p、miR-127-3p表达与HBV相关性HCC患者病理特征的关系。根据HBV相关性HCC患者血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达的平均值分为高、低表达组,通过Kaplan-Meier法绘制各组不同的生存曲线。通过Cox回归分析影响HBV相关性HCC患者预后的因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达对HBV相关性HCC患者死亡的预测价值。结果HBV相关性HCC组血清miR-125a-5p、miR-127-3p相对表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤最大径、分化程度、脉管侵犯、TNM分期、淋巴结转移的HBV相关性HCC患者血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,miR-125a-5p高表达组3年总生存率(64.58%)高于miR-125a-5p低表达组(38.10%),miR-127-3p高表达组3年总生存率(66.00%)高于miR-127-3p低表达组(35.00%),差异有统计学意义(χ^(2)=7.770、9.507,P=0.005、0.002)。HBV相关性HCC患者死亡的独立危险因素为肿瘤最大径≥5 cm、低分化、有脉管侵犯、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移,其独立保护因素为miR-125a-5p、miR-127-3p升高。ROC曲线分析结果显示,血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达联合预测的曲线下面积(AUC)为0.907,高于血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达单独预测的AUC(0.790、0.787),差异有统计学意义(Z=2.691、3.152,P=0.007、0.002)。结论HBV相关性HCC患者血清miR-125a-5p、miR-127-3p低表达,与肿瘤最大径、分化程度、脉管侵犯、TNM分期和预后有关,血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达联合对HBV相关性HCC患者预后有较高的预测价值。

商丘地区151429例无偿献血人群乙型肝炎表面抗原及核酸检测阳性率结果分析

目的:分析商丘地区151 429例无偿献血人群乙型肝炎表面抗原(HBsAg)及核酸检测(NAT)阳性率结果。方法:收集2021年6月至2023年5月商丘地区151 429例(151429份)无偿献血人群的资料,统计其HBsAg及核酸检测阳性率,比较不同特征无偿献血人群HBsAg与NAT阳性率,分析乙型肝炎病毒(HBV)-DNA反应性标本乙肝五项检查情况。结果:151 429份标本中HBsAg阳性566份,占37.38/万,HBsAg阴性150 863份,HBV-DNA反应性标本检出74份,检出率为4.91/万。男性、外地、初次无偿献血者的HBsAg和NAT阳性率均高于女性、本地、多次无偿献血者,46~60岁无偿献血者HBsAg和NAT阳性率均高于26~45岁、18~25岁者,且26~45岁者高于18~25岁者,差异有统计学意义(P<0.05)。74例HBV-DNA反应性标本中,单抗HBs阳性28例(37.84%),全阴性8例(10.81%),HBsAg阳性10例(13.51%),抗HBe抗HBc阳性与抗HBs抗HBe抗HBc阳性13例(17.57%)。结论:商丘地区无偿献血人群HBsAg阳性率为37.38/万,HBsAg阴性者仍有4.91/万被检出为NAT阳性,主要人群为男性、26~60岁、外地、初次无偿献血者。

乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸载量前S2蛋白阳性率与慢性乙型肝炎患者肝纤四项指标的相关性分析

目的分析慢性乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)载量、前S2蛋白(Pre S2)阳性率与乙型肝炎患者肝纤4项指标的相关性。方法选取上饶市第二人民医院2019年1月—2021年12月收治的68例乙肝患者为研究对象,测定其血清HBV-DNA载量、Pre S2阳性率及血清肝纤指标[层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(ⅣC)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢ)]水平,按照HBV-DNA载量与Pre S2检测结果,将患者分为低载量组、中载量组、高载量组及Pre S2阳性组与Pre S2阴性组,比较各组肝纤指标水平,并进行相关性分析。结果高载量组血清LN、HA、PⅢ水平明显低于中载量组与低载量组,且中载量组明显低于低载量组(P<0.05),3组ⅣC水平比较差异无统计学意义(P>0.05);高载量组Pre S2阳性率明显高于其余2组(P<0.05),中载量组明显高于低载量组(P<0.05)。Pre S2阳性组患者血清LN、HA及PⅢ水平明显低于Pre S2阴性组(P<0.05),2组ⅣC水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示,HBV-DNA载量、Pre S2阳性率与LN、HA、PⅢ水平呈负相关(P<0.05)。结论慢性乙型肝炎患者HBV-DNA载量、Pre S2阳性率与LN、HA、PⅢ密切相关。

慢性乙型肝炎者外周血SAA/CRP、NLR水平与HBV-DNA载量、病情程度的相关性分析

目的探究慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者外周血淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)与C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)比值(SAA/CRP)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophils lymphocytes ratio,NLR)水平与乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸(HBV-DNA)载量及病情程度的相关性。方法选取2020年6月至2022年6月达州市中西医结合医院100例CHB患者作为研究组,根据病情程度分为轻度(单纯CHB,n=36)、中度(乙肝代偿期肝硬化,n=33)和重度(乙肝失代偿期肝硬化,n=31)。另选同期、同年龄段50例健康志愿者作为对照组,比较研究组不同病情程度、对照组一般资料、血清SAA/CRP、NLR水平,并比较研究组不同HBV-DNA载量患者血清SAA/CRP、NLR水平,分析CHB患者血清SAA/CRP、NLR水平与HBV-DNA载量、病情程度的相关性;所有患者均行抗病毒治疗,治疗24周,比较不同抗病毒疗效患者治疗前、治疗后12周、24周血清SAA/CRP、NLR水平及变化值,分析治疗前后血清SAA/CRP、NLR水平变化值预测疗效的价值。结果重度CHB患者血清SAA/CRP、NLR水平>中度CHB患者>轻度CHB患者>健康人群(P<0.05);高载量患者血清SAA/CRP、NLR水平>中载量患者>轻载量患者(P<0.05);CHB患者血清SAA/CRP、NLR水平与HBV-DNA载量(r=0.756、0.709)、病情程度(r=0.776、0.745)呈正相关(P<0.05);无应答患者治疗后12周、24周外周血SAA/CRP、NLR水平均高于应答患者,变化值均低于应答患者(P<0.05);SAA/CRP△1、NLR△1单独预测的AUC分别为0.752、0.773,联合预测△1的AUC为0.861;SAA/CRP△2、NLR△2单独预测的AUC分别为0.796、0.819,联合预测△2的AUC为0.967,大于联合预测△1的AUC(P<0.05)。结论CHB患者的SAA/CRP、NLR与CHB HBV-DNA载量及病情程度具有相关性,临床可通过其水平变化评估病情及预测预后。

苓花降毒汤治疗低病毒血症慢性乙型肝炎疗效观察

目的:探讨苓花降毒汤治疗热毒蕴结型低病毒血症慢性乙型肝炎的临床疗效。方法:选取热毒蕴结型低病毒血症慢性乙型肝炎患者62例,将其随机分为试验组和对照组各31例。对照组患者给予多烯磷脂酰胆碱胶囊治疗,试验组患者给予苓花降毒汤联合多烯磷脂酰胆碱胶囊治疗。治疗2个疗程后,对两组患者治疗前后相关中医证候积分、乙肝病毒脱氧核糖核酸载量和转阴率及肝功能指标的变化进行统计学分析。结果:经过2个疗程治疗后,试验组患者中医证候积分低于对照组(P<0.05),试验组患者相关症状改善情况及肝功能、HBV-DNA载量下降及转阴率均明显优于对照组(P<0.05),试验组临床治疗总有效率为93.5%,高于对照组(48.3%)。结论:苓花降毒汤治疗热毒蕴结型低病毒血症慢性乙型肝炎,可明显提高HBV-DNA的转阴率、降低HBV-DNA载量、改善肝功能指标、缓解相关症状,值得临床推广应用。

一种联合检测乙型肝炎病毒前S1抗原与核心抗原方法的建立及其与病毒核酸检测结果的一致性

本研究以与血清中HBV DNA含量高度相关的两种HBV抗原（前S1抗原与核心抗原）为靶标,建立了联合检测这两种HBV核酸相关抗原（NRAg）的双抗体夹心法ELISA试剂。对系列稀释血清的检测表明,该试剂的平均分析灵敏度为103.2基因组拷贝/mL（95%可信限102.2-4.2基因组拷贝/mL）,显著高于前S1抗原或核心抗原的单独检测。对994份HBsAg阴性血清的检测结果表明NRAg ELISA的特异性为99.7%（95%可信限：99.1%-99.9%）。对271份临床慢性肝炎血清进行检测,结果NRAg ELISA与HBV DNA结果的总符合率达96.3%（95%可信限：93.3%-98.2%）,NRAg ELISA的读值/临界值比（S/CO）与HBV基因组拷贝数呈正相关。利用NRAg试剂,发现了1例HBsAg“a”抗原表位突变的变异株。这些结果显示HBV NRAg ELISA与HBV DNA具有高度相关性,并能够检测出HBsAg抗原变异株,有望成为HBsAg变异株筛选的有力工具,并为广大基层医疗单位提供一种便捷的替代HBV DNA定性检测的手段。

献血者血液乙型肝炎病毒核酸及血清学筛查策略的探讨

目的探讨1种ELISA试剂检测HBsAg 1种试剂检测HBV核酸策略的可行性。方法留取新创和BI-OMERIEUX ELISA双试剂检测判为不合格的血液标本418份,应用诺华或罗氏核酸检测试剂进行核酸检测,AB-BOTT化学发光试剂进行补充血清学乙肝两对半检测,对ELISA单试剂阳性NAT阴性的标本用ABBOTT HBsAg中和试剂进行HBsAg确证试验,并对HBsAg确证阳性标本进行追踪并进行相关检测进一步加以确证。结果 616份标本中ELISA双试剂阳性为49.0%(302/616),BIOMERIEUX单试剂阳性为5.7%(220/616),新创单试剂阳性为15.3%(94/616);BIOMERIEUX单试剂阳性标本中,31份标本核酸检测为阴性、ABBOTT HBsAg确证为阳性,也即在616份不合格血液中,有5.0%(31/616)的HBsAg确证阳性的标本被新创HBV ELISA试剂漏检且不能被NAT检出;新创单试剂阳性标本中,2份标本核酸检测为阴性、ABBOTT HBsAg确证为阳性,也即在616份不合格血液中,有0.5%(3/616)的HBsAg确证阳性的标本被BIOMERIEUX HBV ELISA试剂漏检也不能被NAT检出;对34份HBsAg确证试验阳性的血液进行乙肝两对半分析,其中除4份标本未做检测外,其余21份为抗-HBc和抗-HBe阳性,3份为抗-HBc和抗-HBe阳性,1份为抗-HBc阳性,1份为抗-HBs阳性,1份为抗-HBe和HBeAg阳性,1份为抗-HBs和抗-HBc阳性,2份为抗-HBs、抗-HBc、抗-HBe、及HBeAg均阴性,即共有26份抗-HBc为阳性。34份HBsAg确证试验阳性的血液中共追踪成功12名,其乙肝两对半检测结果与原始标本的乙肝两对半检测结果不矛盾。结论实施核酸检测后,去掉2种ELISA试剂中的任何一种均存在一定的漏检。是否去掉一种ELISA试剂以及去掉哪种ELISA试剂,需要各血站进行适当的风险效益分析评估。

鸭乙型肝炎病毒核酸荧光定量PCR方法的建立及应用

目的:建立鸭乙型肝炎病毒核酸(DHBV DNA)荧光定量的方法。方法:根据DHBV DNA S基因区的序列设计扩增所需3条引物,通过偶联反应用AmpliSensor荧光信号标记半巢式引物,经过前期不对称扩增、半巢式扩增及在线检测建立DHBV DNA阳性标准品QPCR的标准曲线,并将70份鸭血清分别用荧光定量PCR方法和地高辛标记的DHBV DNA探针斑点杂交的方法检测,比较结果的相关性。结果:DHBV DNA阳性标准品经过30次循环后,扩增产物经2％琼脂糖凝胶电泳检测,可以看出有180bp、70bp两个片段,与设计的片段大小相符,扩增产物的浓度与标准品的起始浓度成正比,扩增指数的数值大小与该循环时已合成的扩增产物的量成正比,起始浓度的大小与要合成的一定扩增产物的量所需的循环次数成反比。用荧定量PCR方法和斑点杂交的方法检测血清中DHBV DNA的结果有良好的相关性(r=0.97,P<0.01,v=58)。结论:荧光定量PCR方法可作为检测DHBV DNA含量的一个重要手段。

不同剂量白细胞介素2作为乙型肝炎病毒核酸疫苗佐剂的效应

目的构建表达乙型肝炎病毒 (HBV) S蛋白的重组质粒 p CR3.1- S作为核酸疫苗 ,观察重组人白细胞介素 2(rh IL - 2 )作为佐剂对其诱导 BAL B/ c小鼠产生免疫应答的影响。方法分别以 EL ISA法、3H- Td R掺入法、Cr5 1 4h释放法等测定免疫小鼠的血清抗 HBs、淋巴细胞增殖活性、淋巴细胞杀伤效应 ,初步研究不同免疫组体液和细胞免疫应答的差异。结果血清抗 HBs EL ISA效价 ,rh IL - 2组与对照组相比较差异不显著 (P>0 .0 5 ) ;淋巴细胞增殖指数、淋巴细胞杀伤率 ,10 0 0 U (只·次 ) rh IL - 2 /组和 2 0 0 0 U (只·次 ) rh IL - 2 /组与对照组相比较差异显著 (P<0 .0 5 ) ,而 5 0 0 U (只·次 ) rh IL - 2 /组与对照组相比较无显著差异 (P>0 .0 5 )。结论一定剂量的 rh IL - 2作为佐剂可增强

核酸检测在筛查献血者乙型肝炎病毒中的应用

目的探讨核酸检测在献血筛查乙型肝炎病毒中的意义。方法采用2种酶联免疫吸附(ELISA)试剂对2011年1～12月在常州地区采集的无偿献血标本进行HBsAg检测,对酶免阴性、单试剂阳性标本做核酸检测。在核酸筛查阳性标本中,对核酸确认阳性但乙肝"二对半"检测均为阴性及核酸确认阴性的献血者进行追踪随访。结果 2011年共收集血液标本46 216份。核酸检测标本共17 220份,其中HBsAg酶免检测阴性标本17 215份,单试剂阳性标本5份;经核酸筛查HBV阳性26份,确认阳性20份,阳性检出率和确认阳性率分别为15.1/万和11.6/万,HBV ELISA漏检率为8.7/万。对符合条件的13份标本进行追踪检测,4例标本HBsAg阴性转阳性,2例标本HBV DNA追踪检测转阳性而HBsAg始终为阴性。结论血液筛查HBV,应用核酸检测可以提高检出灵敏度、缩短"窗口期",进一步提高血液安全。

两种国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的检测效能评价

目的比较两种国产不同核酸提取方法定量检测乙型肝炎病毒(HBV)核酸试剂的检测效能。方法选择经抗病毒治疗且HBV DNA载量在<1x104IU/ml的乙型肝炎患者血清标本36份,采用两种国产HBV核酸定量检测试剂盒平行检测HBV DNA,对阳性血清进行梯度稀释后再检测,从定量线性范围、准确性、灵敏度、特异性等方面比较两种试剂的差异。结果在36例临床血清中,14份经科华试剂检测的结果为<500 IU/ml,而圣湘试剂检测的结果仍>1.00×103IU/ml;对其中获得检测数据的31份标本进行两种试剂检测结果的相关性分析,发现一致性较好(r=0.817,P<0.05);两种方法检测乙型肝炎患者血清HBV DNA的阳性率分别为55.6%和94.4%,差异具有统计学意义(x2=12.07,P=0.000);对强阳性血清进行梯度稀释后定量检测显示,两种试剂检测水平的平均值与理论水平的线性相关性较好(湖南圣湘r=0.999,上海科华r=0.992),但圣湘所有检测的相对偏差均在±0.3logIU/ml之内,而科华有两次检测的相对偏差超出了±0.3logIU/ml范围,提示圣湘试剂检测结果更稳定,使用纳米磁珠核酸提取法的检测结果较煮沸法更加准确。结论以纳米磁珠为提取核酸方法不仅具有更广的线性范围,同时可显著提高国产HBV DNA检测试剂的灵敏度和准确性。

碱性磷酸酶直接标记核酸探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒DNA方法的建立及应用

目的 :建立碱性磷酸酶直接 (AlkPhosDirec)标记核酸探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸 (DHBVDNA)方法。方法 :应用AlkPhosDirec[TM] 将碱性磷酸酶直接标记纯化的DHBVDNA全基因制备探针 ,与目标核酸杂交后加入CDP -Star化学发光试剂 ,用胶片放射自显影检测DHBVDNA。同时检测了探针的灵敏度和特异性。比较了AlkPhosDirec标记DHBVDNA探针与地高辛标记的DHBVDNA探针检测鸭血清标本 10 0份结果。并用AlkPhosDirec标记探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸的方法考核了活性肽类物质保尔佳 (Polyerga)及其 8种单体体内抗鸭乙型肝炎病毒作用。 结果 :探针灵敏度为10 pg ,无非特异性的结果出现 ,与地高辛探针比较 ,用AlkPhosDirect标记探针检测方法的敏感性为 10 0 % ,特异性为 10 0 % ,符合率为 10 0 % ;抗鸭乙型肝炎病毒作用动物实验表明 ,保尔佳 0 0 1号单体 (CMS0 0 1)能使血清中DHBVDNA明显降低 (P<0 .0 5 )。结论 :AlkPhosDirec标记DHBVDNA探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸方法灵敏、特异 ,与地高辛标记的DHBVDNA探针检测结果完全相符合 ,可作为药物抗鸭乙型肝炎病毒作用动物实验疗效评价的手段。

乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者血清miR-328-3p表达水平及其与疾病严重程度及预后的相关性研究

目的探究微小核糖核酸(microRNA,miR)-328-3p表达水平与乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭(hepatitis B virus-related acute-on-chronic liver failure,HBV-ACLF)严重程度及预后的关系。方法选取2018年12月~2021年12月陕西省人民医院收治的HBV-ACLF患者120例(HBV-ACLF组)、慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者120例(CHB组),另选取同期健康体检者120例为健康组。比较三组一般资料及血清miR-328-3p表达水平,比较不同分期HBV-ACLF患者血清miR-328-3p表达水平;分析HBV-ACLF患者血清miR-328-3p表达水平与终末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分的相关性;比较不同预后HBV-ACLF患者基线资料及血清miR-328-3p表达水平;评估血清miR-328-3p和MELD评分对HBV-ACLF患者预后的预测价值;COX回归分析HBV-ACLF患者预后的影响因素。结果健康组、CHB组和HBV-ACLF组血清miR-328-3p(1.03±0.34,1.85±0.62和2.76±0.92)表达水平比较,差异有统计学意义(F=200.241,P<0.05);早期、中期、晚期组HBV-ACLF患者血清miR-328-3p(2.30±0.58,2.88±0.72和3.63±0.91)表达水平逐渐升高,差异有统计学意义(F=28.023,P<0.05);HBV-ACLF患者血清miR-328-3p表达水平与MELD评分、血清天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotranferase,AST)、总胆红素(total serum bilirubin,TBIL)和丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)呈正相关(r=0.598,0.418,0.375,0.339,均P<0.05);死亡组HBV-ACLF患者MELD评分(28.62±5.72)和血清miR-328-3p(3.34±0.67)表达水平均高于生存组(21.14±4.23,2.32±0.46),差异有统计学意义(t=8.237,9.878,均P<0.05);血清miR-328-3p和MELD评分预测HBV-ACLF患者预后的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.861(95%CI:0.791~0.932),0.853(95%CI:0.781~0.925),且二者联合预测HBV-ACLF患者预后的AUC为0.945(95%CI:0.902~0.989),高于miR-328-3p和MELD评分单独预测(Z=1.991,2.137,均P<0.05),且其敏感度和特异度分别为96.2%,86.8%;回归分析显示,MELD评分[OR(95%CI)=2.532(1.635~3.920)]和miR-328-3p[OR(95%CI)=2.928(1.836~4.668)]均是HBV-ACLF患者死亡的危险因素(均P<0.05)。结论HBV-ACLF患者血清miR-328-3p表达水平较高,与HBV-ACLF疾病严重程度和预后显著相关,且血清miR-328-3p与MELD评分联合能较为有效地预测HBV-ACLF患者预后,有一定临床参考价值。

乙型肝炎病毒核酸抗原相关的检测及临床意义

目的评价乙型肝炎病毒核酸相关抗原(HBV NRAg)在乙肝诊疗中的价值。方法 FQ-PCR、ELISA测定378例乙肝患者HBV含量、五项血清标志物、HBV NRAg,采用巢式PCR对乙肝患者进行确认,并检测300例健康人群HBV NRAg作为对照。结果 HBV NRAg灵敏度、特异性分别为91.3%、99.7%;与巢式PCR比较,HBV NRAg阳性和总符合率均显著高于FQ-PCR、HBeAg(P=0.00)。HBsAg-隐匿性乙肝组,HBV NRAg阳性检出率为60%。乙肝患者抗病毒治疗的监测表明,HBV NRAgS/CO值与HBV含量动态变化趋势基本一致。结论 HBV NRAg作为HBV感染血清标志物的一个新的补充,在乙肝临床诊断、献血员筛选、病情判断及治疗监测均有很高的临床价值。