乙型肝炎病毒(HBV)的ELISA检测及化学发光法检测的诊断价值

目的 本研究探讨化学发光法与酶联免疫吸附法在(HBV)中的诊断价值。方法 收集本院2020年6月—2023年4月收治的300例乙型病毒性肝炎病例的血标本为观察组,另随机选择同期住院的300例非乙型病毒性肝炎病例的血标本为对照组。两组均采用HBV的ELISA检测及化学发光法检测,对比两组检测结果。结果化学发光法对HBV的标准曲线相关系数R2=0.998,平均批内变异系数2.98%,批间变异系数4.20%,优于ELISA检测的平均批内变异系数6.27%及平均批间变异系数7.74%;化学发光法的最低检出浓度为2.5ng/mL,ELISA检测乙型肝炎病毒最低检出浓度为25ng/mL,化学发光法灵敏度优于ELISA检测法。ELISA检测阳性率明显低于化学发光法检测结果,阴性率高于化学发光法。结论 化学发光法有利于早期诊断乙型病毒性肝炎,较ELISA检测具有很高的灵敏度与特异度。

血清及精浆中乙型肝炎病毒的存在情况对精子质量的影响

目的探讨血清及精浆中乙型肝炎病毒存在的情况与精子参数、形态学及精子DNA完整性等精子质量的相关性。方法收集2016年1月至2021年12月在温州医科大学附属第一医院生殖医学中心就诊男性的精液标本,采用微粒子酶免疫分析法检测血清乙肝标志物滴度、荧光定量PCR技术检测血清和精浆中HBV-DNA拷贝水平,同时所有精液标本进行精液参数、精子形态学及精子DNA碎片指数(DFI)分析。根据HBV病毒检测情况将患者分为4组:A组(HBsAg阴性,n=1122)、B组(血清HBsAg阳性,而HBeAg、HBV-DNA和精浆HBV-DNA拷贝数均阴性,n=460)、C组(血清HBsAg、HBeAg和HBV-DNA拷贝均阳性,而精浆HBV-DNA拷贝阴性,n=81)和D组(血清HBsAg、HBeAg和HBV-DNA拷贝均阳性,且精浆HBV-DNA拷贝阳性,n=112),比较各组之间的基本资料、肝功能及精子质量的差异。结果根据纳排标准纳入2063例患者,HBV感染者(HBsAg阳性检出者)占45.6%(941/2063),最终纳入分组分析的患者共1775例。与未感染者(A组)相比,HBV感染者(B、C、D组)的谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平均显著升高(P<0.05),而精子浓度、前向运动精子比例(PR)均显著下降(P<0.05),不活动精子比例(IM)显著增加(P<0.05)。进一步组间分析发现,D组的精子浓度[(55.5±41.4)×106/ml]、前向运动精子比例[(45.8±22.1)%]均显著低于B组[(66.9±46.3)×106/ml,(51.5±18.6)%]和C组[(80.9±65.1)×106/ml,(53.0±20.4)%](P<0.05),不活动精子比例则显著高于B组和C组(P<0.05);A组的精子浓度[(103.4±74.6)×106/ml]和前向运动精子比例[(58.4±17.8)%]为4组中最高(P<0.05)。精子形态学分析结果显示,B、C、D组的正常精子形态比例分别为(2.5±1.7)%、(2.1±1.4)%和(2.4±2.0)%]均显著低于A组[(3.1±1.9)%](P<0.05),但B、C、D三组间的正常精子形态率差异无统计学意义(P>0.05);与A组比较,B、C、D组的精子DNA碎片指数(DFI)均显著增加(P<0.05),尤其是D组的DFI最高(26.2±15.7)%,显著高于B组[(17.8±10.8)%]、C组[(16.2±7.6)%]和A组[(13.5±7.3)%](P<0.05)。结论无论是血清或精浆中,乙型肝炎病毒拷贝呈阳性时均会对男性精子质量造成一定的影响,尤其当HBV感染男性血清和精浆中HBV-DNA拷贝同时阳性状态时可能会对精子各参数指标造成进一步的负面影响。

环介导等温扩增(LAMP)试剂盒检测石蜡包埋肝组织中乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)

目的建立一种检测石蜡包埋的肝组织中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)的新方法,并探讨其应用价值和临床意义。方法提取30例慢性HBV感染患者的石蜡包埋肝组织中的DNA,采用质粒安全ATP依赖性DNA酶(plasmid-safe ATP-dependent DNase,PSAD)消化,去除非cccDNA后,加入引物及Bst DNA酶进行环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),将检测结果与临床实验室资料结合并进行分析,以判断其临床应用价值。结果 30例HBV感染患者中,有17例HBV cccDNA阳性,阳性检测率56.67%。其中肝癌5例、肝硬化4例、重型乙型肝炎5例、慢性乙型肝炎(轻-中度)3例。提示肝组织HBV cccDNA阳性可能与疾病进展密切相关,与血清HBV cccDNA阳性有一定的相关性,与乙型肝炎病毒血清免疫标志物以及肝功能状况无明显相关。结论 LAMP法能检测到石蜡包埋肝组织中的HBV cccDNA,结合临床实验室资料,对判断抗病毒药物疗效及研究乙型肝炎致病机制具有一定的意义。

乙型肝炎病毒x抗原在HBV宫内感染中的作用机制

目的研究高复制水平HBV血清感染人绒毛膜滋养细胞株JEG-3后细胞内乙型肝炎病毒x抗原(HBxAg)及其下游蛋白在细胞内的表达情况,探讨HBxAg在HBV宫内感染中的作用。方法对人早孕绒毛膜滋养细胞株JEG-3进行传代培养,将高复制水平乙型肝炎病毒血清(HBV-DNA定量为107～108拷贝/mL)与传代培养的JEG-3细胞共同孵育48～72h;逆转录-聚合酶链式反应检测细胞内HBx-mRNA水平;Western blot检测细胞内HBxAg的表达;免疫组化检测细胞内HBxAg表达以及细胞内磷脂酰肌醇激酶3(PI3K)的表达;流式细胞仪检测细胞内pAKT的表达。结果 HBV感染JEG-3细胞后,在细胞中检测到HBx-mRNA,并检测到HBxAg的表达,同时发现细胞内PI3K及pAKT的表达水平明显增加,经统计学分析,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBxAg/PI3K/pAKT抗细胞凋亡途径是高复制水平HBV宫内感染的可能机制。

乙型肝炎病毒(HBV)基因分型新近认识

乙型肝炎病毒属嗜肝DNA病毒科,是目前发现最小的DNA病毒,其基因组为双链不完全环行DNA,约3200个碱基对组成,有4个开放读框(ORF)即S,C,P,X,分别编码4个主要的病毒蛋白-多聚酶(P)、X蛋白、包膜(S)和核心蛋白(C).HBV基因分型的依据是以HBV全基因序列核苷酸差异≥8%作为标准,至今将乙型肝炎病毒株分为A至H 8种基因型.随着近年来HBV新基因型的发现,国内外学者从病毒学,流行病学和临床医学等方面进行了大量研究,对HBV基因型的地理性分布已基本明确,而HBV基因型与HBV引起的临床疾病的相关性研究有待进一步深入.

妊娠合并隐匿性或显性乙型肝炎病毒(HBV)感染对早产发生率的影响

目的探讨妊娠合并隐匿性或显性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染对早产发生率的影响。方法采用前瞻性队列研究设计,以2012年6月1日至2013年3月15日间安庆市立医院所有住院分娩的孕妇为研究对象,纳入妊娠结局为单胎活产的孕妇,收集其血清并进行HBV表面抗原和HBV S基因片段的检测,并通过医院电子病历系统收集孕妇人口学信息等资料,采用单因素和多因素统计方法分析妊娠合并隐匿性和显性HBV感染对早产发生率的影响。结果孕妇早产发生率为21.00%(189/900);其中隐匿性HBV感染组、显性HBV感染组和非HBV感染组孕妇在人口学特征方面相似可比,其早产发生率分别为20.51%(16/78)、20.00%(14/70)、21.14%(159/752)。单因素与多因素分析未发现早产发生率与HBV感染相关,以非HBV感染组为参照,多因素COX回归分析发现显性HBV感染、隐匿性HBV感染与早产间调整后相对危险度(adjusted risk ratio,RRa)分别为1.03(0.81,1.32)和0.99(0.78,1.25);以同样参照,多因素线性回归分析发现孕周与HBV感染状况的回归系数β为0.09(-0.14,0.31)。结论妊娠合并隐匿性或显性HBV感染与早产的发生率无明显相关。

452例乙肝血清学标志物阳性孕妇母乳乙型肝炎病毒(HBV)DNA分析

目的采用敏感、特异的实时荧光多聚酶链反应(PCR)检测母乳乙型肝炎病毒(HBV)DNA,以探讨PCR在指导母乳喂养中的价值。方法应用PCR荧光定量检测方法检测母乳中乙型肝炎病毒(HBV)DNA复制情况。结果母血HBsAg,HBeAg及HBcAb阳性者其初乳排毒率为88.1%,HBsAg,HBeAb及HBcAb阳性者其初乳排毒率为41.1%,仅HBeAb与HBcAb阳性者其初乳排毒率为14.3%。结论产妇体内HBV复制活跃、乳汁排毒率高,母婴垂直传播的危险性大。母乳乙型肝炎病毒(HBV)DNA阳性率:大三阳(88.1%)>小三阳(41.1%)>双抗阳性(14.3%)。

什么是乙型肝炎病毒(HBV)大三阳和小三阳?

乙型肝炎病毒（HBV）的大三阳HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性和小三阳HBsAg、HBeAg（--）：或抗-HBe（＋）、抗-HBc（＋）在临床工作中，经常会遇到一些健康体检人群或急慢性乙型肝炎患者，询问自己是乙肝大三阳和小三阳该如何评价。

乙型肝炎病毒大蛋白含量与病毒复制的关系

目的通过定量测定乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清中HBV大蛋白(HBV-LHBs)的含量,探讨其与HBV病毒复制的关系。方法以荧光定量PCR检测175份HBV病毒感染者血清HBV-DNA,将这些标本按DNA拷贝数分为3组,以酶联免疫吸附分析(ELISA)检测HBV-LHBS和PreS1抗原。结果≥106copies/mL组,LHBS阳性率和定量检测结果分别为98.4%和(94.74±31.50)ng/mL,103～105copies/mL组,LHBS阳性率和定量检测结果为75.8%和(30.47±21.33)ng/mL,≤103copies/mL组,LHBS阳性率和定量检测结果为33.3%和(14.84±10.36)ng/mL,3组标本PreS1抗原阳性率依次为87.1%、43.5%、17.6%;HBeAg阳性组血清中LHBS阳性率为83.7%,PreS1抗原阳性率为68.2%;HBeAg阴性血清中LHBS阳性率为53.5%,PreS1抗原阳性率为36.6%。结论LHBS能较好地反映HBV感染者体内病毒的复制程度,而且其定量结果与HBV DNA呈现良好的相关性,因此LHBS定量检测可能成为较好判断HBV活动的新的血清学指标。

慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗过程中肝组织HBVcccDNA变化及与血清学指标的相关性

目的观察慢性乙型肝炎(乙肝)患者在阿德福韦酯(ADV)抗病毒治疗过程中肝组织总的乙肝病毒核酸(HBV tDNA)、cccDNA含量变化及与血清HBV DNA、HBsAg的相关性,探讨肝组织HBV tDNA和cccDNA含量改变在抗病毒治疗中的意义。方法 47例慢性乙肝患者口服ADV10 mg/d,每隔12周检测病毒学、血清学和生化学等指标。47例基线患者和24例治疗48周患者行肝组织活检及肝组织HBV tDNA和cccDNA检测。结果 47例慢性乙肝患者ADV治疗48周后,HBV DNA低于检查下限占36.2%(17/47);ALT和AST复常率分别为76.6%(36/47)和85.1%(40/47)。比较基线和48周均取肝活检的24例患者,48周时血清和肝组织中HBV DNA载量均较基线显著下降(P<0.01),血清HBV DNA下降值大于肝组织HBV tDNA和肝组织HBV cccDNA(分别为3.21 lg拷贝/ml、1.02 lg拷贝/细胞和0.76 lg拷贝/细胞)。基线时,24例患者肝组织HBV tDNA、cccDNA与血清HBV DNA和HBsAg呈正相关(P<0.01);但治疗48周时,各指标间无相关性。结论 ADV治疗慢性乙肝患者可使其肝组织HBV tDNA、cccDNA和血清HBV DNA水平显著下降,但血清HBV DNA下降较肝组织HBV tDNA、cccDNA更为显著。

太原市食品及公共场所从业人员乙型肝炎病毒(HBV)血清学检测分析

目的:为了掌握我市食品及公共场所从业人员HBV的感染状况。方法:用ELISA法检测HBsAg及乙肝五项。结果:2006年检测35179名我市食品及公共场所从业人员,查出HBsAg阳性者305人,HBsAg阳性率为0.87%,对其中285例HBsAg阳性者定期复检并进一步检测HBV的其他血清标志物,结果有32例HBsAg转阴,其中22例仍检出抗-HBc、HBeAg、抗-HBe等HBV血清标志物,10例产生保护性中和抗体抗-HBs,检出14种感染摸式。结论:对HBsAg及HBeAg阳性者及时调岗,防止乙型肝炎进一步传播。

阻断方式对乙型肝炎病毒(HBV)感染孕妇母婴传播的影响分析

目的探讨给予乙型肝炎病毒(HBV)感染的孕妇阻断方式治疗对母婴传播的影响分析。方法随机抽取2016年2月至2018年8月在秦皇岛市妇幼保健院生产的70例孕妇作为研究对象。采用随机数字表法分成观察组(在孕妇妊娠期为28周后给予替比夫定抗病毒阻断方式治疗,n=35)和对照组(在孕妇妊娠期间不予以抗病毒阻断方式治疗,n=35)。对比分析两组孕妇妊娠28周、分娩时和分娩后血清中HBV DNA含量以及婴儿出生时及出生6个月后HBsAg阳性及HBV DNA阳性的概率情况以及婴儿身高、体重、肌酸升高率和Apgar评分的结果分析,并且对治疗后孕妇出现的不良反应进行分析。结果观察组孕妇分娩时血清中HBV DNA含量(3.77±0.43)lg copies/ml,分娩后血清中HBV DNA含量(3.16±0.38)lg copies/ml,婴儿出生时HBsAg阳性率(5.71%),HBV DNA阳性(2.86%),出生后6个月HBsAg阳性率(0.00%),HBV DNA阳性(0.00%);对照组孕妇分娩时血清中HBV DNA含量(7.42±0.65)lg copies/ml,分娩后血清中HBV DNA含量(7.41±0.46)lg copies/ml,婴儿出生时HBsAg阳性率(20.00%),HBV DNA阳性(17.14%),出生后6个月HBsAg阳性率(14.29%),HBV DNA阳性(11.43%),比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论给予乙型肝炎病毒(HBV)感染的孕妇阻断方式治疗,能使乙型肝炎病毒(HBV)母婴传播被有效阻断,婴儿可正常发育,无不良反应发生,具有较高的临床价值。

乙肝病毒标记物阳性表型血清标本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA临床检验分析的应用效果评价

目的研究乙肝病毒标记物阳性表型血清标本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA临床检验分析的应用效果。方法选取2016年1月至2016年12月本院收治的2型病毒性肝炎患者25例,为观察组,并选取同期接受体检的健康人25例,为对照组,均实施PCR荧光定量检测,对比两组乙型肝炎病毒(HBV)-DNA水平。结果观察组受检人员HBV-DNA水平(4 799.32±12.55)×10^3 copy/ml,相比对照组HBV-DNA水平(0.61±0.02)×10^3 copy/ml较高(P<0.05)。结论实施PCR荧光定量检测能够对HBV-DNA水平进行分析,进而有效检出乙型病毒肝炎,为后期治疗提供有利依据,值得研究。