乙型肝炎病毒e抗原阴性慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗

乙型肝炎病毒(HBV)e 抗原(HBeAg)阴性 HBV 感染是相当常见一个问题,是慢性乙型肝炎(CHB)的第二状态,是与HBeAg 阳性的 CHB 同等重要的一种 HBV 感染形式.前 C 区A83位点的替换突变和 CP 双替换突变是导致 HBeAg 阴性的两种形式,而准种漂变是形成 HBeAg 阴性 HBV 的主要原因。HBeAg 阴性 CHB 是一个推断性诊断,不具有特征性表现目前拉米夫定是较为理想的治疗 HBeAg 阴性 CHB 患者的抗病毒药物,IFNα治疗的远期疗效相对较差,但治疗是改变患者预后的一项重要手段.

乙型肝炎病毒e抗原阴性慢性乙型肝炎的诊断与治疗

HBeAg是HBV核心基因（前C区）编码的可溶性蛋白，尽管HBeAg在病毒复制和急性感染中并不是必需成分，但其是病毒复制、传染性、病情严重程度以及对治疗应答评价具有重要作用的指标。以往认为HBeAg阳性提示HBV复制活跃，传染性强，HBV-DNA水平高，当HBeAg转阴同时伴有抗-HBe阳转时，则HBV-DNA水平下降或消失，传染性小，同时伴肝脏炎症减轻和消失，表现为转氨酶正常，是病情趋于稳定的标志状态。

乙型肝炎病毒e抗原阴性的乙型肝炎患者乙型肝炎病毒大蛋白检测分析的意义

乙型肝炎病毒大蛋白（hepatifisBviruslargeenvelopeprotein，HBV．LP）存在于感染性颗粒（Dane颗粒）和亚病毒管状颗粒上，是病毒形成完整外膜的重要标志，与病毒复制、病毒颗粒组装和从细胞内释放调节密切相关。近年来，发现它对反映乙型肝炎病毒（HBV）在体内感染及复制状况具有越来越重要的临床意义[1-51。本文对乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阴性的乙型肝炎患者血清标本分别采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测HBV．DNA、酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测HBV．LP。对HBV．LP在反映HBV感染与复制等方面的作用进一步研究，现报告如下。

拉米夫定联合国产胸腺肽α1治疗乙型肝炎病毒e抗原阴性慢性乙型肝炎疗效观察

自1996年起在中国进行为期5年的临床试验，确定拉米夫定治疗慢性乙型肝炎（乙肝）的疗效和安全性。HBeAg阴性而HBV DNA阳性乙肝又称HBeAg阴性乙肝，虽其治疗较HBeAg阳性乙肝困难，但抗病毒仍是治疗的关键。为提高拉米夫定疗效，减少乙肝基因YMDD变异发生，我们于2003年3月至2005年4月对拉米夫定联合国产胸腺肽α1治疗HBeAg阴性慢性乙肝进行临床研究。

乙肝表面抗原和e抗原阴性父亲乙型肝炎病毒父-婴传播关系的研究

目的了解乙型肝炎表面抗原与e抗原阴性,探讨表面抗体、e抗体和核心抗体均为阳性的父亲能否引起乙肝病毒的父—婴垂直传播。方法采用ELISA法检测父亲及新生儿脐带血的乙肝病毒标志物(HBsAg,HBeAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb)。结果母亲乙肝标志物5项均阴性,父亲乙型肝炎血清标志物(HBVM)中表面抗原(HBsAg)与e抗原(HBeAg)阴性,而表面抗体(HBsAb)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)为阳性的新生儿与父母双方乙肝标志物5项均阴性的新生儿患乙肝的几率差异无统计学意义(P>0.05)。结论乙肝表面抗原和e抗原阴性而表面抗体、e抗体、核心抗体阳性父亲不会引起父—婴传播。

乙型肝炎病毒基因变异与血清e抗原阴性的关系

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)e抗原(HBeAg)曾经是临床判定HBV复制程度慢性乙型肝炎患者预后的重要指标之一,后来发现HBeAg阴转体内HBV仍会有高水平复制,近年来研究表明HBV基因变异特别是C区及X区基因变异与HBeAg表达及在血清中的分泌关系密切。

e抗原阴性慢性乙型肝炎患者体内病毒复制与病情的临床关系

目的了解e抗原阴性慢性HBV感染者体内病毒载量、以及e抗原阴性慢性乙型肝炎(CHB)患者体内病毒复制与病情的临床关系。方法对566例e抗原阴性慢性HBV感染者进行血清HBV DNA定量检测,并对125例e抗原阴性CHB患者血清HBV DNA含量、ALT水平进行分析。结果e抗原阴性慢性HBV感染者36.0%为血清HBV DNA阳性,其中76.1%的患者HBV DNA定量值小于107拷贝/mL;血清HBV DNA定量值大于107拷贝/mL的e抗原阴性CHB患者,84.4%的病例ALT>200 u/L,且临床症状明显、病情严重。结论e抗原阴性慢性HBV感染者体内病毒复制水平一般较低;e抗原阴性CHB患者体内病毒复制与肝内炎症活动相关,血清病毒载量与ALT水平成正相关。

血清前S1抗原对e抗原阴性乙型肝炎与乙型肝炎病毒携带者的诊断价值

临床上区分乙型肝炎病毒（HBV）携带者与e抗原阴性慢性乙型肝炎往往依靠转氨酶水平和血清HBVDNA定量，然而大多数基层医院目前还没有条件开展HBVDNA定量。前s1抗原是HBV复制的重要指标之一，其表达不受e抗原状态的影响。2007年3月～2008年3月，我们对前s1抗原区分e抗原阴性乙型肝炎与HBV携带者的价值进行了探讨。

ALT正常的HBeAg阳性或阴性慢性乙型肝炎病毒感染者的抗病毒治疗

乙型肝炎病毒(HBV)感染是肝硬化、原发性肝细胞癌(HCC)最主要的危险因素,我国HBV人群感染率高,诊断率和治疗率低。积极的抗病毒治疗通过抑制病毒复制可显著减缓HBV感染者的疾病进展,多部指南建议降低ALT治疗阈值,以扩大治疗范围、提高治疗覆盖率。因此,在ALT正常的情况下,无论乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性或阴性,及早开启抗病毒治疗能有效抑制HBV复制,显著改善肝纤维化,进一步降低相关肝脏炎症、纤维化、肝硬化、HCC的发生风险,使患者受益。

e抗原阴性慢性乙型肝炎患者核苷类停药后的临床和病毒学复发评估

目的：探讨 e 抗原阴性慢性乙型肝炎患者核苷类停药后复发的临床特点和复发情况。方法对我院自2010年5月至2013年11月治疗的80例 e 抗原阴性慢性乙型肝炎患者入院资料进行分析，医护人员分析患者临床症状、使用的药物类型、疗程、患者的停药原因、停药复发后生化及病毒、血清学等指标变化。结果49例患者服用拉米夫定（LMV），患者用药时间为3个月～3年；14例患者服用阿德福韦酯（ADV）患者用药时间为3个月～2年；11例患者短期服用拉米夫定后再用 ADV，患者用药时间为6个月～2年；6例患者服用恩替卡韦（ETV），患者用药时间为6个月～1年；患者复发后，有35例患者慢性中度肝炎，23例患者慢性重度肝炎，12例患者慢性重型肝炎，6例患者代偿性肝硬化，4例患者失代偿性肝硬化。结论e 抗原阴性慢性乙型肝炎患者核苷类停药后多在2年以内复发，且停药复发后肝损害更加严重。

乙型肝炎e抗原阴性表面抗原阳性携带者手术期的感染及预防

目的 探讨乙型肝炎 e抗原 (HBe Ag)阴性表面抗原 (HBs Ag)携带者 ,经手术传播的危险性及预防方法。 方法 根据套式 PCR定量检测 HBV DNA确定的 HBV传染性和传播阈值 ,参考疫苗接种对 HBV易感性的影响 ,将 HBV携带者分为低度、高度和极高传染性 3个等级 ,评价 HBe Ag与 HBV经手术传播的关系。结果 监控组、非监控组和肝炎组高度传染性 HBV携带者例数与各自总例数之比分别为 1/1.19、1/2 5 0和 1/4.4 4 ;极高传染性者分别为 1/5 .16、0和 0 ;HBe Ag阴性肝炎患者的 HBV感染模式与 HBe Ag阴性外科患者相同 ,但 HBV携带率和传染性都显著大于后者 ;HBs Ag和抗 HCV阳性无关。结论 手术中对 HBe Ag阳性患者必须采取加强预防措施 ;对 HBe Ag阴性外科患者则无此必要 ;对 HBe Ag阴性肝炎患者采取的预防措施应该与 HBe Ag阳性患者相同。

慢性乙型肝炎e抗原阴性患者病毒DNA与外膜大蛋白的相关性分析及临床意义

目的探讨血清乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)检测对判定慢性乙型肝炎e抗原(HBeAg)阴性患者病毒复制的相关性及其临床意义。方法分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、时间分辨免疫荧光分析和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测421例慢性HBeAg阴性患者血清中HBV-LP、HBV-M和HBV DNA,并进行相关性分析。结果421例慢性HBeAg阴性患者血清HBV DNA与HBV-LP 2种方法阳性和阴性的符合率为75.7%,其HBV DNA阳性检出率为53.6%,HBV-LP阳性检出率为56.5%,两者差异无统计学意义(P>0.05);在181例HBV DNA和HBV-LP共同阳性标本中,血清HBV-LP水平与HBV DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关(r=0.938,P<0.01);HBV DNA阳性血清中HBV-LP阳性率为80.1%。结论血清HBV-LP水平能反映慢性HBeAg阴性病毒感染者体内HBV的复制程度,适合替代HBV DNA检测的方法,是对HBV-M检测的补充,可作为判断HBV复制新的血清学指标,在基层医院对慢性HBeAg阴性患者的诊治具有非常实用的临床价值。

低水平血清乙型肝炎病毒表面抗原、e抗原测定及其临床意义

目的 :了解低水平乙型肝炎 (乙肝 )病毒表面抗原 (HBsAg)、e抗原 (HBeAg)在乙肝患者中的分布和相关乙肝病毒血清标志物的模式特征。方法 :应用微粒子酶免疫技术 (MEIA)对 790 0例门诊和住院病人血清标本进行乙肝病毒 5项标志物的检测 ,根据临界值质控血清的值来确定质量浓度在 5 μg·L-1或 1μg·L-1以下HBsAg阳性数 ,以及浓度在 2nCu·ml-1以下HBeAg阳性数 ,并分析相关乙肝病毒标志物 (HBV M )的模式。结果 :共检出HBsAg阳性 6162例 ,其中质量浓度在 5 μg·L-1以下者占13 .5 3 % ,1μg·L-1以下者 8.4% ;HBeAg阳性者 44 0 1例 ,其中浓度在 2nCu·ml-1以下者为 2 1.9%。 5项血清标志物检测发现不少特殊模式 ,HBsAg与抗 HBs同时阳性者主要出现在HBsAg质量浓度低于 1μg·L-1的标本中 ;血清HBeAg浓度在 2nCu·ml-1以下者 ,HBeAg和抗 HBe同时阳性的占 5 2 .4%。结论 :提高HBsAg、HBeAg检测的灵敏度有助于乙肝的诊断、治疗以及流行病学调查 。

乙型肝炎病毒E抗原、大蛋白与乙肝病毒DNA的关系

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)表面E抗原(HBe Ag)、大蛋白(LHBs)与乙肝病毒DNA(HBV DNA)的关系。方法分别检测109例HBe Ag阳性和116例HBe Ag阴性的乙型肝炎患者的LHBs、HBV DNA表达情况,并进行对比分析。结果 HBe Ag阳性组中,LHBs、HBV DNA的检测率分别为89.9%和84.4%,二者比较无统计学差异(P>0.05);HBV DNA定量与HBe Ag定量和LHBs均呈正相关(r分别为0.81、0.94,P均<0.05),不同HBV DNA载量组间HBe Ag定量和LHBs含量均有统计学差异(P均<0.01)。结论对HBe Ag阴性患者而言,LHBs能在一定程度上反映体内HBV的复制情况,可作为HBV DNA的补充,指导临床诊治和用药。

乙型肝炎病毒e抗原与金属硫蛋白相互作用的研究

乙型肝炎病毒e抗原 (HBeAg)被认为与乙型肝炎病毒 (HBV)引起免疫耐受 ,免疫系统功能障碍有关。为探讨HBeAg在乙型肝炎发病机制中的作用 ,寻找防治HBV感染的有效方法 ,应用酵母双杂交系统 3构建HBeAg诱饵质粒 ,转化酵母细胞AH10 9后 ,与含肝cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合、双杂交 ,在营养缺陷培养基 (SD/ Trp Leu His Ade)上及X α 半乳糖苷酶 (X α gal)蓝白斑双重筛选与肝细胞蛋白结合的蛋白 ,结果获得真阳性菌落 39个 ,提取酵母质粒转化大肠杆菌 ,测序后进行生物信息学分析 ,发现其中含金属硫蛋白(MT)基因的菌落有 3个。进一步用网织红细胞裂解物体外翻译、蛋白间免疫共沉淀实验证实 ,金属硫蛋白与HBeAg间有确切的结合作用。

慢性重型乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒C基因启动子和前C基因变异及与e抗原系统的关系

目的 研究慢性重型乙型肝炎患者血清的HBVC基因启动子 (CP)和前C基因变异情况。方法 通过DNA扩增、基因序列分析检测 75例慢性乙型肝炎 (CHB)和 14例慢性重型乙肝 (CSH)患者血清的HBVCP和前C基因序列 ,通过微粒子发光法定量检测血清中HBeAg的含量及通过荧光定量PCR技术定量检测血清中的HBVDNA。结果 (1)前C终止变异 (nt1896G→A)在CSH组中的发生率显著高于CHB组 (71 4 %和 2 6 7% ) ;CP双变异 (nt 176 2A→T和 176 4G→A)则在CSH组和CHB组的发生率无显著差异 (4 2 9%和 4 8 0 % )。 (2 )CSH组的HBeAg含量显著低于CHB组 ;CSH组的HBeAb阳性率则显著高于CHB组 (71 4 %和 32 0 % )。 (3)CSH组和CHB组的HBVDNA定量则无明显差异。结论 前C终止变异 ,对e系统有明显影响 ,与CSH的发病有关。

e抗原阴性重症乙型肝炎患者HBV前C区热点变异研究

目的 研究ＨＢＶ信号肽区热点变异与重症乙型肝炎发生及转归的关系。方法 采用错配聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限 制性片段长度多态（ＲＦＬＰ）分析方法检测６８例ＨＢｅＡｇ阴性的重症乙型肝炎病人（其中急性重肝６例、亚急性重肝３８ 例、慢性重肝２４例）及４４例慢性乙型肝炎患者的Ｔ１８６２、Ａ１８９６变异情况。结果 急性重肝的Ａ１８９６、Ｔ１８６２变异分别 为６６．７％（４／６）、０（０／６）；亚急性重肝４２．１％（１６／３８）、１５．８％（６／３８）；慢性重肝 ２５．０％（６／２４）、１６．７％（４／２４）；慢性肝炎 ４５．５％（２０／４４）、２．３％（１／４４）。重症乙型肝炎组与慢性肝炎组比较Ｔ１８６２变异率有显著差异（Ｐ＜０．０１），Ａ１８９６变异率无显 著差异（Ｐ>０．０５）。结论 提示Ｔ１８６２变异与乙型肝炎的重症化密切相关。而Ａ１８９６变异与乙型肝炎重症化进程是否有 关还不能确定。

酵母双杂交技术筛选鉴定乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白E-19的研究

目的:乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)对HBV的感染和复制都不是必须的,普遍认为其与HBV引起免疫耐受、免疫系统功能障碍有关。筛选并克隆人肝细胞cDNA文库中与HBeAg相互作用蛋白的基因,明确其具体作用机制。方法:应用酵母双杂交系统3,将多聚酶链反应(PCR)法扩增的HBeAg基因连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-α-半乳糖(X-α-gal)上进行双重筛选阳性菌落,提取阳性酵母菌落的质粒转化大肠杆菌氨苄青霉素-LB平板上选择并测序,结果在GenBank中进行生物信息学分析,并根据GenBank中的序列信息设计引物从并克隆到另一酵母表达载体pGADT7中,体外免疫共沉淀方法再次验证二者之间的结合作用。结果:成功克隆出HBeAg基因并在酵母细胞中表达,与肝文库配合后选出既能在四缺(SD/-Trp-Leu-His-Ade)培养基又能使X-α-gal变成蓝色的真阳性菌落39个,其中有5个未知基因,在genbank中未找到同源序列,在HepG2细胞的mRNA中成功扩增出该基因的全序, 体外免疫共沉淀方法证明HBeAg与新基因E-19表达的蛋白质在体外也有结合作用。结论:成功克隆出HBeAg的肝细胞结合蛋白,发现与HBeAg有相互作用的未知蛋白新基因,为HBeAg的功能研究提出新线索。