抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体国产ELISA试剂评价

目的 评价 6种国产抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体 (抗 HBs)酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂盒。方法 将RocheElecsys 2 0 10电化学发光免疫分析系统上检测余留的抗 HBs标本 ,用 6种国产抗 HBsELISA试剂盒进行检测 ,评价 6种试剂盒的敏感度、检测范围、精密度和特异性。结果 6种国产试剂盒的敏感度相差较大 ,10～ 4 0IU/L不等。 5 0IU/L以下时 ,浓度与吸光度呈直线关系 ,但吸光度数值较低 ;未发现高浓度时的钩状效应。 5 0IU/L的标本 ,A、B 2种试剂的批内变异系数 (CV)分别为 10 .1%和 13.7% ;日间CV分别为 14 .1%和2 4 .8% ;阴性标本在 6种试剂盒中出现了不同程度的假阳性。结论 国产抗 HBsELISA试剂的部分性能应改进和提高。

慢性乙型肝炎病毒感染者HBsAg和抗-HBs共存的不同血清学模式及其意义分析

目的探讨慢性HBV感染者HBsAg和抗-HBs共存的不同血清学模式及其意义。方法在3042例慢性HBV感染者中筛选出HBsAg和抗-HBs共存患者93例,分析其临床特征、HBsAg和抗-HBs相对滴度模式、HBeAg状态和HBV DNA水平。结果根据HBsAg和抗-HBs水平的高(H)或低(L),将HBsAg+/抗-HBs+血清学模式分为H/L、H/H、L/L和L/H四型,分别占43.0%、14.0%、35.5%和7.5%;其HBeAg+比例依次为H/L(55.0%)>H/H(38.5%)>L/L(18.2%)>L/H(14.3%);H/L与L/L型患者HBV DNA水平之间差别显著(P=0.016),而在H/L与H/H(P=0.569)以及H/H与L/L之间(P=0.095)均无显著性差别。结论在HBsAg和抗-HBs共存患者,HBsAg水平越低和抗-HBs水平越高,则HBeAg阳性率和HBV DNA水平越低。

母源性抗-HBs对婴儿乙型肝炎疫苗接种效果的影响

目的了解母源性抗-HBs对婴儿乙型肝炎疫苗接种后抗体应答的影响。方法定量检测43例抗-HBs阳性和29例抗-HBs阴性孕妇分娩前及其足月新生儿脐动脉血、第2针乙型肝炎疫苗接种前和接种后2.5个月的抗-HBs水平。结果43例抗-HBs阳性母亲所生新生儿脐血抗-HBs均阳性,其抗体水平与母体高度正相关(r=0.98,P<0.01),1月龄时仍有42例股静脉血抗体阳性;29例抗-HBs阴性母亲的新生儿脐血和1月龄时抗-HBs均阴性。第2针乙型肝炎疫苗接种后2.5个月,两组儿童抗-HBs阳性率均为100%,但母源性抗体阴性组平均抗-HBs活性浓度为163mIU/ml,明显高于母源性抗体阳性组的94mIU/ml(P<0.01);母源性抗-HBs大于1000mIU/ml的5名婴儿中,3名在接种第2针疫苗后没有产生主动抗体应答。结论母源性抗-HBs可抑制乙型肝炎疫苗前两针接种后的抗体应答。

用反向被动血凝抑制试验进行乙型肝炎病毒表面抗原单克隆抗体的位阻分析

本文报告获得28株分泌抗HBsAg单克隆抗体的杂交瘤细胞系,均为抗HBsAg“a”决定簇抗体。产生鼠IgM抗体的有一个细胞系;IgG1 18个系;IgG 2a 1个系;IgG 2b 6个系;IgG 3两个系。采用反向被动血凝抑制法测定了其中24种McAb的交互抑制现象。24种McAb可分为10个不同的抑制群。并对这种简单易行的位阻分析方法在实用中的价值做了讨论。

重组人抗乙型肝炎病毒表面抗体的筛选及序列分析

目的克隆、筛选人抗乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs),并对其基因序列进行分析。方法从抗-HBs抗体阳性血液中分离淋巴细胞,提取总RNA,合成cDNA,以此为模板,PCR扩增轻链和重链抗体可变区基因;应用已构建的抗体支架载体,构建重组表达载体,转化毕赤酵母X33,建立相应的酵母表达文库;甲醇诱导表达,Westernblot及ELISA筛选抗-HBs抗体阳性菌株;PCR扩增DNA片段,进行测序及Blastn比对,并与已发表的抗-HBs抗体序列进行同源性分析。结果重链及轻链抗体重组表达载体经双酶切鉴定,证明构建正确;经Westernblot及ELISA筛选,获得了具有HBsAg结合活性的完整轻重链抗体;轻链可变区与已发表序列核苷酸同源性为93%,而氨基酸同源性仅为88%,尤其CDR3变异较大;重链可变区与已发表序列同源性较低,CDR3区基因长度及序列均有较大差别。结论应用毕赤酵母表达体系筛选,获得了新的抗-HBs抗体。

噬菌体展示抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子的筛选和序列分析

目的 从自建的免疫噬菌体展示Fab抗体库中获得抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子 ,并进行基因序列分析。方法 采用纯化的乙型肝炎病毒表面抗原作为包被抗原 ,对自建的 4× 10 5Fab噬菌体抗体库进行富集筛选 ,从阳性强的次级库中挑选单个克隆菌 ,分别进行噬菌体ELISA、PCR和限制性内切酶鉴定后 ,再选取三者均为阳性的克隆菌进行基因序列分析。结果 共挑选了 6 0个单克隆菌株 ,其中噬菌体ELISA阳性有 2 7个 ,阳性率为 4 5 % ;PCR鉴定均为相应大小片段 ;限制性内切酶鉴定表明 2 7个阳性克隆菌中有 13个具有约 15 0 0bp的片段 ,其余均为约 75 0bp大小 ;BstOI酶切鉴定表明各克隆菌的酶切方式不同 ;选取 5个含约 15 0 0bp片段和 2个含约75 0bp片段的克隆菌株 ,经测序均为人免疫球蛋白基因 ,且重链分别属于VH3、VH4、VH5家族 ,轻链分别属于L5、L6、L8和 0 12 /0 2家族。结论 从自建的免疫噬菌体展示Fab抗体库中成功地获得了抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子。表明所构建的抗乙型肝炎病毒表面抗原的Fab抗体库的抗体基因具有多样性。

208例乙型肝炎表面抗体与其他乙型肝炎病毒血清标志物同时阳性结果分析

目的:对比ELISA检测结果与HBV- DNA定量结果,分析乙型肝炎表面抗体(抗HBs)与其他乙型肝炎病毒血清标志物(HBV M)同时阳性的几种模式。方法:采用ELISA方法检测HBV M,荧光定量PCR(FQ PCR)检测HBV DNA含量。结果:HBsAg、HBeAg、抗HBc、抗HBs(+)模式30例,HBV- DNA阳性28例(93.33%)。HB -sAg、抗HBe、抗HBc、抗HBs(+)模式28例,HBV -DNA阳性3例(10.71%)。HBsAg、抗HBc、抗HBs(+)模式22例,HBV- DNA阳性11例(50.0%)。结论:同时检测HBV- M和HBV- DNA对乙型肝炎的诊断,治疗有重要意义。

稀土铕离子标记抗乙型肝炎表面抗体

结合生命科学中生物活性物质的高灵敏度分析检测方法研究 ,组装了时间分辨激光荧光免疫分析装置 ;合成了稀土离子与蛋白质联接的双向螯合剂 二乙三胺五乙环酐(DTPAA) ;纯化了抗 乙型肝炎表面抗体 ;研究了Eu3+ DTPAA 抗 乙型肝炎表面抗体制备过程 ;确定了标记物制备的最佳条件 ;依据解离增强原理 ,采用时间分辨激光荧光光谱技术 ,对Eu( β NTA) 3(TOPO) 2 螯合物的有关参数进行了测定。

安庆市农村≤3岁儿童乙型肝炎疫苗接种率及乙型肝炎病毒表面抗原携带率调查

目的 :为了解农村儿童乙型肝炎 (乙肝 )疫苗接种率、首针及时接种率、全程及时接种率及乙肝病毒表面抗原(Hbs Ag)携带率和抗 - HBs阳转率 ,以便为乙肝疫苗纳入儿童计划免疫提供本底资料。方法 :2 0 0 2年 12月对安庆市农村≤ 3岁儿童进行了调查。结果 :调查的 930人中 ,乙肝疫苗全程接种率为 74 .30 % ,首针及时接种率为 36 .4 5 % ,全程及时接种率为 2 9.4 6 % ,首针及时接种率以 0岁组最高 (χ2 =2 3.2 3,P<0 .0 1) ;检出阳性者 15人 ,携带率为 1.6 1% ;调查合格接种乙肝疫苗儿童 6 31人 ,抗 - HBs阳性 4 93人 ,抗 - HBs阳转率为 78.13%。平原地区的首针及时率为 38.4 0 % ,高于山区 (χ2 =4 .5 6 ,P<0 .0 5 )。住院和在家分娩儿童的首针及时接种率分别为 4 8.74 %、14 .6 3% ,差异有非常显著的统计学意义 (χ2 =10 7.6 7,P<0 .0 1)。结论乙肝疫苗纳入计划免疫后 。

家蚕蛹表达的乙型肝炎表面抗原中蛋白口服免疫原性的研究

目的 探讨家蚕蛹表达的重组乙型肝炎表面抗原中蛋白 [rHBsAg(PreS2 +S) ]口服免疫原性。方法 选择 4周龄的SD大鼠 ,将重组病毒感染后的家蚕蛹 ,制成口服剂型灌胃大鼠 ,ELISA方法检测抗 HBs抗体及抗 PreS2抗体。结果 在灌胃重组蛋白组中有 4 0 %鼠体血清内检测到了特异性抗 HBs抗体及抗 PreS2抗体 ,抗体应答反应持续 2～ 3周 ;口服免疫后抗体转阳的SD鼠加强免疫后能产生较强的二次免疫应答。进一步研究表明 ,口服家蚕蛹表达的rHBsAg(PreS2 +S)具有加强免疫的效果。对酵母重组疫苗单剂腹腔注射过的SD鼠 ,用家蚕蛹表达的rHBsAg(PreS2 +S)灌胃加强免疫后 ,能诱导鼠体迅速产生较强的抗 HBs抗体。结论 家蚕

IGF-Ⅰ、Anti-HBs及IL-4对乙型肝炎的诊断价值

目的探讨胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、乙型肝炎病毒表面抗原抗体(Anti-HBs)以及微环境因子白细胞介素-4(IL-4)对乙型肝炎的诊断价值,以期为临床治疗提供参考。方法本研究选择大连市第五人民医院2019年2月—2022年2月收治的71例乙型肝炎患者作为研究组研究对象,另选同期于该院进行体检的50例健康个体为对照组研究对象。比较2组研究对象IGF-Ⅰ、Anti-HBs及IL-4水平;采用绘制ROC曲线的方式分别计算IGF-Ⅰ、Anti-HBs及IL-4水平对乙型肝炎的诊断效能;通过Pearson相关分析探究乙型肝炎患者IGF-Ⅰ、Anti-HBs及IL-4水平的相关性。结果研究组患者IGF-Ⅰ及IL-4水平均高于对照组,而Anti-HBs水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。分别绘制IGF-Ⅰ、AntiHBs及IL-4水平诊断乙型肝炎的ROC曲线,结果显示IGF-Ⅰ、Anti-HBs及IL-4水平诊断乙型肝炎的AUC分别为0.9133(P<0.001)、0.9500(P<0.001)、0.7067(P=0.006)。Pearson相关分析结果显示,乙型肝炎患者IGF-Ⅰ、AntiHBs及IL-4呈明显相关性,其中IGF-Ⅰ与Anti-HBs呈负相关关系(r=-0.5363,P<0.001),与IL-4呈正相关关系(r=0.2826,P<0.001),Anti-HBs与IL-4呈负相关关系(r=-0.2408,P<0.001)。结论IGF-Ⅰ、Anti-HBs以及IL-4水平在乙型肝炎患者中呈现异常表达状态,且相互之间存在明显的相关性,可以考虑将它们应用于乙型肝炎的鉴别诊断中。

唾液内乙型肝炎病毒抗原抗体状态的研究

为了解唾液内乙型肝炎病毒抗原抗体状况,本人用ELISA法检测了98例乙型肝炎病人和80例正常人的唾液和血清中乙肝病毒抗原抗体的5项指标:HBsAg,抗-HBs,抗-HBc,抗-HBe,HBeAg.现将结果报告如下.

全血凝集法快速检测乙型肝炎表面抗原的应用

我院1996年4月以来,采用武汉生物研究所生产的被列入卫生部“十年百项”重点推广项目的全血凝集诊断试剂,检测乙型肝炎表面抗原,迄今已查118人份阳性血样,总结如下.

免疫荧光双标记技术检测胎盘HBsAg-抗-HBs复合物

目的 探讨乙肝病毒 (HBV)以何种形式感染胎盘滋养层细胞 .方法 通过免疫荧光双标记技术检测 12例血清HBs Ag阳性母亲的胎盘滋养层细胞 HBs Ag-抗 - HBs复合物 .结果 血清学 HBs Ag阳性母亲胎盘滋养层细胞中存在 HB-s Ag-抗 - HBs复合物 .结论 提示 HBV可能通过 HBs Ag与抗 - HBs结合成复合物的方式进入胞内 ,导致胎盘屏障的第一层细胞受到

红谷滩新区入托儿童HBsAg、抗-HBs检测结果分析

我省是乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）的高流行区，随着我国计划免疫工作的发展．乙肝已经列为计划免疫重点控制的疾病之一．乙肝控制已经取得显著成效．主要表现为乙肝表面抗原（HBsAg）携带率．HBV感染均有不同程度的下降。为了解红谷滩新区入托儿童HBsAg感染现状和乙肝免疫水平．为今后开展乙型肝炎防治工作提供科学依据．于2007年度对该区16所幼儿园入托儿童．3042人进行HBsAg和抗-HBs检测．现将结果报告如下。

抗体分子在噬菌体表面蛋白Ⅷ上的展示

目的 观察抗体分子通过丝状噬菌体主要外壳蛋白Ⅷ和次要外壳蛋白Ⅲ在噬菌体表面呈现效果的差异。方法 分别构建通过次要外壳蛋白Ⅲ或主要外壳蛋白Ⅷ展示抗乙肝表面抗原Fab、ScFv和角蛋白Fab的表达载体 ,制备噬菌体抗体 ,比较其抗原结合活性和Fab呈现水平 ,用多种方法尝试提高主要外壳蛋白Ⅷ介导的噬菌体展示效果。结果 主要外壳蛋白Ⅷ对不同特异性抗体Fab段和不同形式的小分子抗体 (Fab和ScFv)的展示效果均低于次要外壳蛋白Ⅲ的展示 ,增加主要外壳蛋白Ⅷ Fab对野生型和主要外壳蛋白Ⅷ的表达比例、试用不同菌株、在Fab和主要外壳蛋白Ⅷ之间插入间隔序列、换用控制更为严密的启动子等措施 ,均未能改善主要外壳蛋白Ⅷ介导的噬菌体展示。结论 以前所报道的通过主要外壳蛋白Ⅷ多价展示Fab段不是普遍存在的现象 ,对有些抗体基因不能达到多价展示。

1～5岁儿童HBsAg和抗-HBs调查

目的 了解咸宁市1～5岁儿童乙肝表面抗原和乙肝表面抗体情况。方法 用酶联免疫(ELISA)进行检测。结果1～5岁儿童HBsAg阳性率为0.49%,接种疫苗1年的幼儿抗-HBs阳性率为对71.74％,以后随接种年数的增长抗-HBs阳性率下降趋势明显。在抗-HBs阳性的儿童中有31.58％的儿童阳转率处于弱阳性状况。结论 应根据抗-HBs检测结果,及时给予乙肝疫苗补种和加强。

抗-HBs国际单位RIA一点法定量测定与计算方法的探讨

在Radio immunoAssay(RIA)试验测定抗 HBs国际单位的简易定量与计算中 ,采用RIA一点法测定 ,以分析表达式mIU/ml=SC(mIU/ml) [exp(0 .6 9315 S NCSC NC) - 1]进行结果计算。此式可以常用对数式表示为mIU/ml=SC(mIU/ml) [lg 1(0 .30 10 3S -NCSC -NC) - 1],当 (S -NC) / (SC -NC)在 0 3～ 1 1界线内时 ,其计算结果的相对误差小于 6 % ,是目前误差最小的简易计算方法。同时还推算求出Holliger公式的阳性对照的最适含量为 12 4 2 6mIU/ml,Richardson公式的阳性对照为 12 5mIU/ml,中国药品生物制品检定所公式的阳性对照为 92