SA_(14)-14-2株乙型脑炎活疫苗流行病学效果观察

本文报道了1～10岁儿童普种乙脑活苗后,乙脑发病率下降情况。结果表明,乙脑活苗接种能使乙脑发病率下降70％左右(P<0.01)。在普种乙脑活苗后的3年中。发生的1～10岁乙脑病例有95％以上未接种乙脑活苗,并出现了乙脑发病年龄上移的趋势(P<0.05),表明乙脑活苗具有较好的保护效果。

流行性乙型脑炎活疫苗细胞免疫检测方法的探索

本文建立了流行性乙型脑炎活疫苗细胞免疫检测方法。采用纯系Ｂａｌｂ／ｃ（Ｈ－２ｄ）小鼠制备效应细胞，以同一品系Ｂａｌｂ／ｃ（Ｈ－２ｄ）小鼠原代肾细胞为靶细胞。当效靶细胞比例为２０∶１，杀伤时间为４小时，ＭＴＴ反应时间为４小时，细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤作用最强。利用该法对乙脑活苗和死苗免疫小鼠进行了ＣＴＬ活性测定，结果表明该法重复性好。

不同厂家乙型脑炎减毒活疫苗上市后安全性监测分析

目的:对两家疫苗生产企业生产的乙型脑炎(以下简称乙脑)减毒活疫苗接种后报告的疑似预防接种异常反应(AEFI)监测数据进行分析,以评价和比较不同生产企业乙脑减毒活疫苗上市后的安全性。方法:通过中国免疫规划信息管理系统中的AEFI监测系统,导出2015—2021年兰州市七里河区乙脑减毒活疫苗的AEFI个案数据;通过甘肃省免疫规划信息管理系统收集乙脑减毒活疫苗的接种数据,比较武汉生物制品研究所有限责任公司(以下简称武汉生物)和中国科学院成都生物研究所(以下简称成都生物)乙脑减毒活疫苗AEFI的发生情况。结果:2015—2021年兰州市七里河区共报告乙脑减毒活疫苗相关AEFI个案235例,其中一般反应234例,报告发生率为212.23/10万剂,异常反应0例,偶合症1例(上呼吸道感染)。武汉生物、成都生物乙脑减毒活疫苗AEFI一般反应报告发生率分别为183.25/10万剂和234.79/10万剂,两者比较,差异无统计学意义(RR=1.28,95%CI:0.98~1.68,P>0.05)。234例乙脑减毒活疫苗相关AEFI一般反应个案的临床表现以发热(201例)、局部硬结(175例)、哭闹(56例)、局部红肿(28例)和乏力(22例)为主,76.07%的一般反应发生在疫苗接种后的1 d内,两家企业生产的乙脑减毒活疫苗相关AEFI一般反应个案不同临床表现的报告发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:2015—2021年兰州市七里河区不同厂家乙脑减毒活疫苗相关AEFI报告发生率在预期范围,无严重的AEFI报告,安全性良好。

流行性乙型脑炎减毒活疫苗对国内外不同野毒株的免疫性

目的 研究乙型脑炎减毒活疫苗对国内外不同野毒株的免疫原性。方法 用小鼠保护力试验和空斑减少中和试验检测该疫苗对国内外不同野毒株攻击的保护作用及其免疫血清的中和能力。结果 小鼠免疫 1针后均能抵抗国内 11株和国外 11株乙脑病毒的攻击 ,保护率均可达 90 %以上 ;人体免疫血清对台湾 1株和国外 9株病毒均有明显的中和作用。结论 SA14 142株乙脑活疫苗具有广谱的免疫原性。

应用区带离心法纯化地鼠肾细胞乙型脑炎灭活疫苗

目的应用区带离心法纯化原代地鼠肾细胞乙型脑炎灭活疫苗。方法浓缩的原代地鼠肾细胞乙脑灭活疫苗,经36％和60％不连续蔗糖密度、23 000r/min离心4h后,收取纯化的乙脑抗原组分,制成纯化乙脑疫苗。结果浓缩疫苗经一步区带离心纯化后,抗原效价提高3倍以上,蛋白去除99.5%以上。经稀释制成的半成品疫苗与未经浓缩的原疫苗相比,抗原效价提高4倍以上,蛋白去除99％以上。结论区带离心法可用于纯化地鼠肾细胞乙脑疫苗。

猪乙型脑炎减毒活疫苗毒株的选育研究

以乙脑弱毒 SA14 -1 4 -2作为母种 ,采用原代地鼠肾细胞和乳鼠皮下传代方法并结合蚀斑纯化技术 ,选育获得乙脑减毒活疫苗猪用毒株 SA14 -1 4 -2 VS株。该毒株经细胞传到 1 5～ 1 8代 ,脑内接种 1 2～ 1 4 g小鼠不引起发病和死亡 ;皮下接种 1 0～ 1 2 g小鼠 ,从脑组织中不能分离出病毒 ;经 3～ 5日龄乳鼠回传一代后 ,脑内毒力 L og L D50 仅为 1 .3 2～ 2 .1 0 ,皮下接种小鼠无致病力。该毒株细胞 1 8代毒 ,用乳猪传至第五代 ,从乳猪血液、脑、肝组织中分离的病毒再经细胞传二代 ,其滴度与原毒液相近 ,并仍对小鼠脑内感染不致死 ;8头小公猪经该毒接种后 ,未发生睾丸炎 ,睾丸组织中未回收到病毒 ;经静脉接种的 2头怀孕 3 0 d的初产母猪 ,虽接种后 2 d和 4d血样中检出病毒 ,但接种 2 1 d剖杀时 ,胎儿均健活 ,胎盘、羊水及胎儿脑组织中均未回收到病毒 ,该毒株能使豚鼠和猪产生较强的免疫应答 ,对小白鼠攻击的保护力比灭活疫苗高 ;纯毒检定及外源因子污染检定结果表明 ,该毒株是纯净的乙脑病毒 。

乙型脑炎减毒活疫苗批签发管理与质量评价

目的比较乙型脑炎减毒活疫苗实施批签发前后的质量变化,评价疫苗的质量控制。方法通过对市场抽检疫苗样品和批签发送检的疫苗样品质控关键项目测定结果及制造和检定记录摘要审核,对疫苗的质量和改进趋势进行分析、归纳和总结。结果3个企业生产的乙脑活疫苗在1990～2004年期间,尤其是生产初期,疫苗病毒滴度≥5.7lgpfu.mL-1的批次合格率为58.6%～100%;疫苗热稳定性试验合格批次占15%～100%;其中A企业2001～2004年,疫苗热稳试验100%合格。从2005年实施批签发后,3个企业生产的乙脑活疫苗病毒滴度均为100%合格。2006和2008年国家市场监督抽验的疫苗病毒滴度结果合格率达97.4%。结论乙脑活疫苗实施批签发后的病毒滴度合格率达100%,较实施前有明显提高。国家市场监督抽验的疫苗测定结果显示,乙脑活疫苗的质量稳定,病毒滴度合格率为97.4%。通过疫苗批签发可以准确、具体的了解企业生产和质量管理情况,督促企业规范生产、完善工艺、加强质量管理。

1例接种乙型脑炎减毒活疫苗后发生急性小脑共济失调报告

目的分析1例接种乙型脑炎减毒活疫苗与急性小脑共济失调发病的相关性。方法对病例及监护人进行面对面家访,调查接种单位和疫苗公司,同时前往病人诊疗医院询问主治医生,收集病人基本信息、临床资料、预防接种资料等相关信息,并组织相关专家进行讨论。结果该病例小脑共济失调诊断明确,疫苗来源、流通、储存、运输及接种等环节均符合相关规定,疾病发病与疫苗接种可能存在时间关联性。结论经专家组调查诊断,该病例所患疾病不能排除预防接种的因素,不排除疑似预防接种异常反应。建议短期禁止该儿童进行疫苗接种。

乙型脑炎减毒活疫苗乳鼠传代返祖试验中稀释液的筛选

目的探讨安全试验之乳鼠传代返祖试验中稀释液对乙型脑炎减毒活疫苗的影响。方法随机选取14批乙型脑炎减毒活疫苗,分别用磷酸盐缓冲液(PBS)、最少细胞培养物质培养液(MEM)、0.5%水解乳蛋白液、199培养液4种稀释液进行乳鼠传代返祖试验。结果使用PBS组LD_(50)<1.0 Log LD_(50)/0.03 mL,小鼠没有死亡梯度;0.5%水解乳蛋白液组和MEM组出现LD_(50)>3.0 Log LD_(50)/0.03 mL,病毒毒力增强;使用199培养液组乙型脑炎病毒活疫苗毒力稳定,重复性好,无返祖现象。结论199培养液适宜作为乙型脑炎减毒活疫苗乳鼠传代返祖试验中所用的稀释液。

乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上传代后的基因序列研究

目的:研究乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上传代后的病毒基因序列,以深入控制乙型脑炎减毒活疫苗的安全性。方法:将乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上连续传代,选取第二代病毒(P2)、第五代病毒(P5)、第十五代病毒(P15)提取RNA,反转录为c DNA后,进行各代病毒全基因序列分析,分析与乙型脑炎病毒毒力密切相关的关键位点基因是否发生改变。结论:乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上传5代后,病毒E蛋白上关键基因第279位(E279)氨基酸由甲硫氨酸(M)突变为赖氨酸(K)。

首次接种乙型脑炎减毒活疫苗引起小儿高热1例

本文对1例首次接种乙型脑炎减毒活疫苗后引起小儿高热的不良反应进行了报道。患儿体温达到39.3℃,口服给予泰诺林及进行物理降温治疗后,患儿体温恢复正常,情况好转。

非动物源性保护剂的冻干乙型脑炎减毒活疫苗动物体内安全性、保护力及稳定性评价

目的评价非动物源性保护剂的冻干乙型脑炎减毒活疫苗在动物体内的安全性和保护效力,以及在不同温度存放时间疫苗滴度变化。方法皮下或腹腔途径免疫小鼠后,检测体内中和抗体效价,P3株脑内或腹腔内攻击评价疫苗保护效力。于4℃和37℃在不同存放时间,观察疫苗稳定性。结果皮下或腹腔途径免疫后,小鼠体内中和抗体效价不高于1:10;P3株脑内攻击14 d后,小鼠存活率为80%以上;P3株腹腔内攻击14 d后,小鼠存活率为100%;脑内致病力,乳鼠传代返祖及异常毒性试验等疫苗安全性各项指标合格;疫苗4℃存放半年后滴度下降0.19 Log10PFU/mL;37℃下存放7 d,滴度下降0.71 Log10PFU/mL。结论非动物源性保护剂的冻干乙型脑炎减毒活疫苗在小鼠体内具有良好的安全性及免疫保护力,于4℃长期保存,疫苗滴度稳定。

乙型脑炎减毒活疫苗疑似AEFI发生特征

目的:探讨2014年至2018年陕西省乙型脑炎减毒活疫苗(JEV-1)接种后疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征,对JEV-1疫苗安全性进行评估。方法:对安徽省2014年至2018年AEFI信息管理系统中JEV-1接种后AEFI个案数据采用描述流行病学方法进行分析。结果:陕西省西安市新城区2014年至2018年累计接种JEV-11725剂次,累计报告JEV-1接种后AEFI个案23例,报告发生率133.33/10万剂。23例个案中22例(95.7%)一般反应,1例(4.3%)异常反应。23例个案中男女比例1.3:1。13例(56.5%)AEFI主要为1岁以下儿童,6例(26.1%)为2岁儿童。夏、秋两季AEFI最多,夏季8例(34.8%),秋季7例(30.4%)。22例一般反应17例(77.3%)在接种后1天内出现AEFI,1例(100.0%)在接种后1天内出现AEFI。23例AEFI病例中,19例(82.6%)在首剂次接种后发生,报告发生率110.14/10万剂;3例(17.4%)在接种加强剂次后发生,报告发生率17.39/10万剂。18例(81.8%)一般反应在首剂次接种后发生,报告发生率104.35/10万剂。1例异常反应在首剂次接种后发生,比例100.0%,报告发生率5.80/10万剂。22例一般反应病例中,21例(95.5%)发热,报告发生率121.74/10万剂;1例(4.5%)红肿,报告发生率5.80/10万剂。1例异常反应病例为过敏性皮疹,比例100.0%,报告发生率5.80/10万剂。23例AEFI病例中未出现后遗症,均好转或痊愈。结论:AEFI异常反应比例较低,以一般反应为主,未出现严重异常反应,陕西省JEV-1疫苗具有良好安全性,但接种中仍需充分关注神经系统脑病、热性惊厥等严重异常反应情况。

乙型脑炎减毒活疫苗致喉头水肿1例

1病例介绍 患儿,男,9个月,于2015年10月30日来我院预防保健科进行预防接种乙型脑炎减毒活疫苗（武汉生物制品研究所有限责任公司生产,批号：201411055-1,规格：复溶后每瓶0.5mL）。注射前对疫苗进行检查,瓶内无异物,瓶盖无松动,无破损,复溶后无混浊,疫苗生产厂家、批号、有效期均无异常,患儿平时健康.

2011年至2016年河南省乙型脑炎减毒活疫苗预防接种不良反应监测

目的:分析2011年至2016年河南省乙型脑炎减毒活疫苗(JEV-L)预防接种不良反应的流行病学特征,评价JEV-L预防接种的安全性。方法:通过中国免疫规划信息管理系统,收集2011年至2016年河南省报告的JEV-L预防接种不良反应个案数据和JEV-L预防接种数据,采用描述流行病学方法进行分析。结果:2011年至2016年河南省共报告JEV-L预防接种不良反应5 236例,年平均报告发病率为25.74/10万剂。5 236例不良反应中,一般反应5 126例,占97.90%,报告发生率为25.20/10万剂;异常反应110例,占2.10%,报告发生率为0.54/10万剂。不良反应男女性别比为1.22∶1;<1岁者占60.06%;7~9月份不良反应报告最多,占32.75%;报告病例主要集中在洛阳市、郑州市和周口市等地。不良反应主要发生在第1剂次接种后和接种后<1 d。一般反应临床诊断均为发热、红肿、硬结,异常反应以过敏反应性疾病为主,有过敏性休克和脑炎病例报告。所有不良反应中,治愈或好转占99.73%。结论:河南省JEV-L预防接种安全性良好,需关注过敏性休克、脑炎等严重异常反应的发生。

乙型脑炎减毒活疫苗走向世界——WHO版本的乙型脑炎减毒活疫苗制检规程正式发表

流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus，JEV)的感染主要引起中枢神经系统损害，是病毒性脑炎最严重的一种。目前仍然是许多亚洲国家的一种严重传染病，年发病率高达10／10万，病死率为25％，发病最高的为儿童和老人，并常伴有严重的神经系统后遗症。

乙型脑炎减毒活疫苗工艺中金黄地鼠肾细胞培养液里谷氨酰胺添加的研究

目的比较谷氨酰胺在不同浓度和不同添加阶段的条件下,作为细胞生长液的成分,对乙型脑炎减毒活疫苗生产中金黄地鼠肾细胞的培养效果以及后续生产工艺的影响。方法 (1)以两种添加阶段:将谷氨酰胺作为细胞生长液体培养基的成分加入细胞培养和培养细胞时临时配制后加入细胞培养;(2)以不同的浓度:按0.05、0.1、0.2 g/L的浓度加入细胞培养。结合两种条件后,每种组合条件生产3批地鼠肾细胞,对所有批次细胞的生长情况及后续接种病毒后,对应的病毒生长情况进行比较研究。结果谷氨酰胺在培养细胞时临时配制后加入细胞培养所生产的地鼠肾细胞质量优于其作为细胞生长液体培养基的成分加入细胞培养,采用秩和检验,差异有统计学意义(P=0.002<0.05);谷氨酰胺按0.1 g/L和0.2 g/L的浓度加入细胞培养所生产的地鼠肾细胞质量优于按0.05g/L浓度,在2种添加阶段其,差异有统计学意义(P=0.02<0.05),但0.1g/L和0.2 g/L的浓度之间,无论谷氨酰胺的添加阶段在培养基中添加P=0.513,在培养时临时添加P=0.827),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论在乙型脑炎减毒活疫苗生产所需的地鼠肾细胞培养中,谷氨酰胺适合在培养细胞时临时配制后加入细胞培养容器,浓度不宜低于0.1g/L。

乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2全基因组序列测定及基因遗传稳定性

目的对乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2株进行全基因组序列测定和分析,并观察该生产株在疫苗制备过程中的基因遗传稳定性。方法根据DNA序列数据库(Gen Bank)公布的SA14-14-2株的序列,设计合成7对引物,提取疫苗生产株SA14-14-2及其工作种子批生产的3批原液、3批成品疫苗的病毒RNA,通过RT-PCR方法扩增SA14-14-2株的cDNA片段,分别克隆到pGEM-T载体,转化至大肠埃希菌DH5α中,挑取阳性菌落克隆、鉴定后测定全序列并对序列进行比较分析,观察毒株在传代的过程中病毒滴度的稳定性。结果乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2株基因组全长10 976 bp,编码3 433个氨基酸。3批原液和3批成品疫苗的基因组全长为10 977 bp,比较分析发现,在3'端非编码区10 701处多一个G核苷酸的插入。与DNA序列数据库(Genbank)登录号为D90195的全长序列同源性分别是99.9%、99.9%、99.9%、99.9%、99.8%、99.9%、99.8%,其中E蛋白的同源性均为100%。SA14-14-2生产株的病毒滴度为7.22 lg PFU/mL,原液和成品疫苗的滴度分别为7.32、7.23、7.32、6.86、6.92、6.70 lg PFU/mL。结论乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2基因稳定,具有良好的一致性,为乙型脑炎减毒活疫苗的质量的稳定性提供了可靠依据。