乙基化衍生-顶空固相微萃取-气相色谱串联质谱法测定海水中的有机锡化合物

建立了四乙基硼化钠衍生,采用75μm聚二甲基硅氧烷/碳分子筛（PDMS/CAR）纤维进行顶空固相微萃取,结合气相色谱-三重四级串联质谱（GC-MS/MS）的检测方法,用于海水中5种机锡化合物的检测。实验流程操作简单,海水样品中加入内标三丙基锡后,使用醋酸-醋酸钠缓冲溶液调节至pH5.0,然后加入衍生试剂四乙基硼化钠,在磁力搅拌条件下进行顶空固相微萃取,萃取完成后将萃取纤维直接插入气相色谱进样口进行解析、分离和检测。日常检测单个样品的平均分析时间少于25min,而且无需有毒的有机溶剂。方法灵敏度高,对于5种有机锡化合物的检出限范围为0.10～0.20ng/L（Sn）。本方法具有良好的准确度和精密度,在20ng/L（Sn）的添加浓度下,5种有机锡化合物回收率范围为80.2%～93.6%,相对标准偏差均小于13%。所建立的方法用于渤海湾养殖区96个海水样品中有机锡化合物的检测,检出率为42.7%。

乙基化衍生-顶空固相微萃取-气相色谱质谱法测定水中的三甲基铅和三乙基铅

建立了四乙基硼化钠衍生、50μm/30μm DVB/CAR/PDMS纤维头顶空固相微萃取、气相色谱质谱仪检测水中三甲基铅和三乙基铅的方法,用于地表水、生活污水和工业废水中三甲基铅和三乙基铅的检测分析.实验优化了顶空固相微萃取条件,研究了萃取纤维、衍生试剂的用量、萃取时间、萃取温度和解析时间对萃取效果的影响.优化条件下,三甲基铅和三乙基铅的检出限分别为0.3μg·L^(-1)和0.2μg·L^(-1),在3个加标水平(5、100、180μg·L^(-1))下,地表水、生活污水和工业废水中目标物的加标回收率分别为81.0%—115%、74.1%—116%和88.4%—111%,相对标准偏差均小于10%.实验操作简单,无需有毒的有机溶剂,且方法灵敏度高,精密度和准确度好,适用于水中三甲基铅和三乙基铅的快速痕量分析.

乙基化衍生/顶空气相色谱法快速测定葡萄酒中3种甲基锡

建立了葡萄酒中三甲基锡、二甲基锡和一甲基锡同时检测的四乙基硼化钠衍生/顶空气相色谱-火焰光度检测法。对顶空条件(温度、时间、振荡方式)、衍生化条件(试剂用量、p H值、盐度)以及气相色谱条件进行了优化。在最佳实验条件下,葡萄酒中3种甲基锡化合物的检出限(LOD)分别为1.2,1.0,1.2μg/kg;干白、干红和桃红3种代表性葡萄酒样品在5.0,10.0,100.0μg/kg加标水平下的平均回收率为80.5%~101.4%,相对标准偏差(RSD,n=6)为3.2%~8.5%。该方法具有良好的灵敏度和准确度,操作简单、快速,单个样品的平均分析时间不超过25 min,适用于葡萄酒中甲基锡化合物的快速筛查检测。

表没食子儿茶素没食子酸酯乙基化衍生物Y_(6)对耐阿霉素人肝癌细胞丝裂原活化蛋白激酶通路的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)乙基化衍生物Y_(6)在逆转耐阿霉素(DOX)人肝癌细胞耐药过程中对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)途径的影响。方法将对数生长期的耐DOX人肝癌细胞BEL-7404/DOX随机分为空白对照组、DOX组、DOX+维拉帕米(VER)组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y_(6)组和DOX+高剂量Y_(6)组,空白对照组不加任何药物,DOX组加入终浓度为10μmol·L^(-1)的DOX,DOX+VER组加入终浓度为10μmol·L^(-1)的DOX和10μmol·L^(-1)的VER,DOX+EGCG组加入终浓度为10μmol·L^(-1)的DOX和10μmol·L^(-1)的EGCG,DOX+低剂量Y_(6)组加入终浓度为10μmol·L^(-1)的DOX和10μmol·L^(-1)的Y_(6),DOX+高剂量Y_(6)组加入终浓度为10μmol·L^(-1)的DOX和15μmol·L^(-1)的Y_(6),各组细胞加药完毕后,置于37℃、含体积分数5%CO_(2)的恒温培养箱中培养48 h,采用Western blot法检测各组细胞中磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、ERK1/2、磷酸化JNK(p-JNK)、JNK、磷酸化p38(p-p38)、p38的蛋白相对表达量,并计算p-ERK1/2与ERK1/2蛋白相对表达量比值(p-ERK1/2/ERK1/2)、p-JNK与JNK蛋白相对表达量比值(p-JNK/JNK)、p-p38与p38蛋白相对表达量比值(p-p38/p38)。结果DOX组耐DOX人肝癌细胞中的p-ERK1/2/ERK1/2与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);DOX+VER组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y_(6)组和DOX+高剂量Y_(6)组耐DOX人肝癌细胞中p-ERK1/2/ERK1/2均显著高于空白对照组和DOX组(P<0.05);DOX+VER组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y_(6)组和DOX+高剂量Y_(6)组耐DOX人肝癌细胞中p-ERK1/2/ERK1/2比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,DOX组、DOX+VER组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y_(6)组和DOX+高剂量Y_(6)组耐DOX人肝癌细胞中p-JNK/JNK均显著增高(P<0.05);与DOX组比较,DOX+VER组、DOX+高剂量Y_(6)组耐DOX人肝癌细胞中p-JNK/JNK均显著增高(P<0.05);DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y_(6)组耐DOX人肝癌细胞中p-JNK/JNK与DOX组比较差异均无统计学意义(P>0.05);与DOX+VER组比较,DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y_(6)组耐DOX人肝癌细胞中p-JNK/JNK均显著降低(P<0.05);与DOX+低剂量Y_(6)组比较,DOX+高剂量Y_(6)组耐DOX人肝癌细胞中p-JNK/JNK显著增高(P<0.05)。与空白对照组比较,DOX组、DOX+VER组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y_(6)组和DOX+高剂量Y_(6)组耐DOX人肝癌细胞中p-p38/p38均显著增高(P<0.05);与DOX组比较,DOX+VER组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y_(6)组和DOX+高剂量Y_(6)组耐DOX人肝癌细胞中p-p38/p38均显著增高(P<0.05);与DOX+VER组比较,DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y_(6)组耐DOX人肝癌细胞中p-p38/p38均显著降低(P<0.05);DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y_(6)组、DOX+高剂量Y_(6)组耐DOX人肝癌细胞中p-p38/p38比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论Y_(6)通过上调ERK l/2、JNK及p38蛋白的磷酸化水平激活3条平行的MAPK信号通路逆转BEL-7404/DOX细胞耐药。

氨基类神经递质的N-乙基化法UHPLC-MS/MS定量分析技术

目的·为了研究氨基类神经递质的含量变化对生物体的生理及病理生理过程的影响,探讨这类代谢物的高灵敏定量分析方法。方法·使用乙醛与氰基硼氢化钠(NaBH_3CN)的一对稳定同位素标记试剂分别对氨基类神经递质进行N-乙基化柱前衍生,采用超高效液相色谱-串联质谱联用技术(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UHPLC-MS/MS),对20种氨基类神经递质进行一次性高灵敏内标定量分析。结果·方法学验证表明该20种氨基类神经递质均呈现良好的线性关系(相关系数R^2>0.991 0);除组胺检测限为36.5 fmol外,其余物质均在0.5～10 fmol范围;日间差及日内差的相对标准偏差低于15%。使用该方法对人尿液、血清及唾液样本中的氨基类神经递质进行定量检测分析,分别可检测到14、10及8种神经递质。结论·该方法具有较高检测灵敏度及精密度,可用于人尿液、血清及唾液样本中神经递质的定量分析;与已有方法相比,此方法具有反应条件温和、操作简便、反应原料易于淬灭、灵敏度与精密度高等优势,可实现多种氨基类神经递质的一次性高灵敏定量分析。

依替米星合成中相关产物的研究

对新药依替米星合成中的相关产物进行了分离和鉴定 ,得到了两个新的庆大霉素 C1 a乙基化衍生物。通过化学降解、质谱和核磁共振的测定和分析 ,证实它们的化学结构分别为 3″- N-乙基庆大霉素 C1 a和 1,3″-二 - N-乙基庆大霉素 C1 a。

在线吹扫捕集-气相色谱-原子荧光光谱法测定土壤中甲基汞

建立了在线吹扫捕集-气相色谱-原子荧光光谱联用测定土壤中甲基汞的方法.土壤样品经KBr/CuSO4溶液提取后,使用二氯甲烷/水萃取与反萃取前处理方法,克服了土壤复杂基质的影响.使用四乙基硼化钠衍生试剂,将甲基汞转化为易挥发的甲基乙基汞,在线吹扫捕集进行富集并进一步消除基体干扰.经条件优化,萃取时间为30 min,反萃取的时间和温度分别为4h和65℃.方法准确、可靠,具有很高的灵敏度.土壤样品检出限可达0.8 ng/g,沉积物标准参考物质ERM-CC580的测定回收率为104％±15％ （n=3）.应用本方法对3种实际土壤样品进行测定,其甲基汞浓度在2.3～5.4 ng/g范围内,加标回收率为87％～ 111％.