烟草乙烯受体类似物NTHK2全长基因的克隆及其激酶结构域生化特性(英文)

应用5’-RAGE方法克隆到烟草NTHK2的全长cDNA。其全长cDNA共有3216 bp,其中5’非编码区为509bp,3’非编码区为427 bp,编码区为2280 bp,编码产物为760个氨基酸。NTHK2氨基酸序列与植物中的许多杂合型的两组分乙烯受体基因有较高的同源性,具有推测的组氨酸激酶结构域和接受域;但是,在激酶结构域中没有保守的组氨酸,而是被一个天冬氨酸残基所替代。为了研究其生化特性,在酵母中以融合蛋白的形式表达了激酶结构域。体外激酶分析表明,当有Mg2+存在的情况下NTHK2能够自我磷酸化。进一步的研究应阐明NTHK2在植物体内是否能够作为乙烯受体,参与乙烯的信号传导过程。

水稻乙烯受体类似物基因的克隆及其表达特性

乙烯在植物的生长发育以及对逆境的反应中起着重要作用。乙烯受体基因在拟南芥、烟草和番茄等双子叶植物中已有一些研究,但到目前为止还没有见到关于单子叶植物乙烯受体研究的报道。我们从水稻中克隆了一个乙烯受体基因OSPK2,发现它所编码的蛋白与双子叶植物的乙烯受体有所不同。OSPK2的N端较长,其后是3个跨膜区、一个GAF结构域、一个推测的激酶结构域和接受器结构域。虽然大多数的结构域都是保守的,但预期的磷酸化位点His和磷酸基团接受位点Asp在OSPK2中分别被Gln和Asn取代。这一事实说明,OSPK2可能不是以组氨酸激酶的磷酸转移方式进行作用,而是以其他的机制,如具有丝/苏激酶的活性。应用RT-PCR方法对不同条件下OSPK2基因的表达进行了研究,结果表明,OSPK2受伤害和PEG处理诱导,但盐及ABA处理对其没有显著影响。OSPK2基因的差异表达可能反映了它在介导不同非生物逆境反应中的作用,这与我们以前关于烟草乙烯受体的研究结果是一致的。