乙肝病毒表面抗原基因在花生中的遗传转化及免疫原性检测

首次用花生半胚作为外植体,与农杆菌EHA105(含质粒p1301HBs)共培养5d,再生培养基中通过加入潮霉素进行抗性筛选,得到抗潮霉素的芽,经芽的伸长、诱导生根获得转化植株。经PCR、PCR-Southern杂交、Southern点杂交等分子检测,证实目的基因已整合到花生基因组中,ELISA检测证实了在花生中表达的HBsAg具有较好的活性。经初步定量,花生小芽的蛋白初提液中可溶性蛋白含量1.044g/L,HBsAg小蛋白的含量约占总可溶性蛋白的0.032%,每克转化植株小芽鲜重含HBsAg小蛋白约2.4×10-7g。转基因花生植株初提重组蛋白经HPLC纯化、浓缩后,注射初免一次的小鼠,有明显的特异性抗体产生。口服饲喂已免疫但抗体下降至0.025(HBsAbELISAD值)Balb/c小鼠,发现有较强的抗体回升,达3.54,表明转基因花生疫苗可以加强口服免疫。

小鼠重组乙肝病毒表面抗原鼻腔黏膜免疫效果评价

目的评价小鼠重组乙肝病毒表面抗原(HBsAg)鼻腔黏膜免疫效果,寻找非注射乙肝免疫途径。方法 Balb/c小鼠分别经鼻腔、舌下及肌注给予重组HBsAg免疫3次,以支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清抗HBsAg抗体水平评价3种途径的免疫效果。结果经鼻腔免疫小鼠BALF可检测到IgA抗体,提示产生黏膜免疫;与肌注免疫类似,经鼻腔免疫小鼠血清IgG滴度大于1:500,提示产生体液免疫。结论重组HBsAg经鼻腔免疫小鼠可同时产生体液免疫和黏膜免疫,提示鼻腔黏膜免疫可能是有效的非注射乙肝免疫途径。

微粒子酶免疫测定乙肝病毒表面抗原的评价

目的 :对微粒子酶免疫测定法 ( MEIA法 )检测乙肝病毒表面抗原进行方法学评价。方法 :采用美国雅培公司的 AXSYM型化学发光仪对乙肝病毒表面抗原卫生部质控物、高浓度乙肝病毒表面抗原标本进行稀释测定 ,同时与 EL ISA法检测乙肝表面抗原进行比较。结果 :微粒子化学发光法检测乙肝病毒表面抗原具有较高灵敏度 ,达0 .1ng/ ml;有较好的重复性和特异性。结论

时间分辨荧光免疫法和化学发光免疫分析法检测人血清乙肝病毒表面抗原浓度的差异性分析

目的探讨化学发光免疫分析法（cLIA）和时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）在测定乙肝病毒表面抗原（HbsAg）浓度上的差异性。方法依据美国国家临床实验室标准协会EP9一A文件，在5天内分别用CLIA和TRFIA两种方法测定临床40份标本各2次，并对结果进行分析。结果对临床标本的检测结果阴阳符合率为100％；两种试验方法的直线回归方程为Y=0．9846x-0．2469，相关系数r为0．9962。结论时间分辨免疫荧光法与化学发光法在乙肝表面抗原的定量检测上的灵敏性、准确性基本相当，再临床上可互为补充。

滴金免疫法快速检测乙肝病毒表面抗原

乙型肝炎是严重危害人民身体健康的传染病之一，在从业人员健康查体中，检测乙肝表面抗原时，常需用ELISA法，操作程序复杂，时间长，1998年我们用胶体金标记单克隆抗体（抗－HBs)与相应抗原结合后呈显色反应，检测血清中的HBsAg，其灵敏度与酶标法相近，具有快速，简便，敏感的特点。

MEIA法测定乙肝病毒表面抗原的评价及临床应用

目的 对微粒子酶免疫测定法(MEIA法)检测乙肝病毒表面抗原进行方法学评价并研究低含量乙肝表面抗原人群阳性检出率。方法 采用美国雅培公司的AXSYM型化学发光仪对乙肝病毒表面抗原卫生部质控物、高浓度乙肝病毒表面抗原标本进行稀释测定,同时与ELISA法检测乙肝表面抗原进行比较;对低浓度(HBsAg≤1μg/L)的标本进行中和确证试验与采用PCR-ELISA法定量测定HBV DNA。结果 微粒子化学发光法检测乙肝病毒表面抗原具有较高灵敏度,达0.1μg/L;有较好的重复性和特异性;低浓度(HBsAg≤1μg/L)在人群中分布率为0.53％。结论 微粒子酶免疫法对提高低含量乙肝表面抗原阳性检出率具有重要意义。

血清冻存13年后乙肝病毒表面抗原检测结果的评价

目的 :评价血清常规冻存 13年后HBsAg的检测结果。方法 :采用酶免疫测定法 (EIA)对保留血清 2 5 5份作HB sAg检测 ,并与原用单克隆抗HBsAg诊断血细胞 (McAb -RPHA)检测的结果作一致性检验 (Kappa分析 )。结果 :以EIA为标准 ,与原McAb -RPHA检测的结果比较 ,McAb -RPHA检测的假阳性率为 12 .5 0 % (1/ 8) ,假阴性率为 0 81% (2 /2 4 7)。McAb -RPHA与EIA两种方法之间 ,即同一批血清 13年前后两次检验的符合率为 98 82 % ,k =0 8175。结论 :在 - 2 0℃环境下经 13年冻存后 ,血清HBsAg检测不受影响。

酶联免疫吸附法检测乙肝病毒表面抗原假阳性的相关影响因素

目的分析酶联免疫吸附法检测乙肝病毒表面抗原假阳性的影响因素,以及解决方法。方法选取2018年10月—2019年10月来我院治疗的300例疑似乙肝病毒携带者血清样本,均运用酶联免疫吸附法检测,分析检测结果以及出现假阳性的原因。结果共13例出现假阳性,初检假阳性原因最高为标本溶血,占比6.98%,其次为试剂盒质量与操作不当影响,其他因素包括离心不全、洗板影响、条件等显色。结论运用酶联免疫吸附法检测乙肝病毒表面抗原,检测结果会受到许多因素影响,应当对样本检测的各个环节做好质量控制,以提高检测精准性。

酶联免疫法和胶体金法对乙肝病毒表面抗原检测的对比分析

乙肝病毒表面抗原（HBsAg）检测的传统方法是酶联免疫法，特异性强，灵敏度高，重复性好，但操作较为复杂、费时，仅适用于批量检测。为此，我科购进了乙肝病毒表面抗原胶体金法检测试剂盒，此法简单快速，便于单份标本独立操作，其缺点是敏感性不及酶联免疫法，为了探讨这2种方法的检测结果差异性，我们进行了对比分析，现将结果报告如下。

乙肝病毒表面抗原能转阴吗

抽血化验检查,一旦发现乙肝表面抗原阳性,一连串的麻烦和痛苦接踵而来。患者四处求医,力争使乙肝病毒表面抗原阴转,摘掉乙肝这顶讨厌的“帽子”。但是,许多患者在经历了各种治疗后,始终未见乙肝病毒表面抗原阴转而渐渐失望。那么,乙肝病毒表面抗原到底能否转阴?应该怎样正确认识乙肝病毒表面抗原阳性呢?

中西医结合治疗乙肝病毒表面抗原携带者246例

乙肝表面抗原无症状携带(ASC)在乙肝病毒感染人群中占有较大比例,因其没有任何症状、体征,且肝功能正常、常为患者和大多数医务人员所忽视,然而近几年来研究发现,这类病人实质上是慢性肝炎的不典型表现,大多数传染性强,是一类很强的传染源。自1995年以来,我们对这类患者246例进行系统治疗,并以其免疫状态分组对照,探讨治疗的一般规律,具体办法如下。

血清低水平乙肝病毒表面抗原测定及其临床意义

目的了解血清低水平乙肝病毒表面抗原的分布状态及其相关乙肝病毒血清标志物模式特征。方法采用时间分辨荧光免疫分析技术对6620例门诊及住院病人的血清进行乙肝两对半定量测定,确定浓度在5ng/mL以下的HBsAg阳性倒数,并分析相关乙肝病毒标志模式。结果6620例受检者中HBsAg阳性共597例,其中HBsAg在5mg/mL以下者共129例,占受检者总人数1.95%,占HBsAg阳性人群的21.61%。在129例低水平HBsAg病人的乙肝病毒标志物模式中,以HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性为主,共99例占76.71%;单纯HBsAg阳性者5例,占3.87%。结论在乙肝病毒感染的人群中,有相关比例的患者HBsAg的含量呈低水平状态,提高HBsAg检测的灵敏度有很重要的意义。

血清低水平乙肝病毒表面抗原测定及其临床意义

目的了解血清低水平乙肝病毒表面抗原的分布状态及其相关乙肝病毒血清标志物模式特征。方法采用时间分辨荧光免疫分析技术对6620例门诊及住院病人的血清进行乙肝两对半定量测定，确定浓度在5ng／ml以下的HBsAg阳性例数，并分析相关乙肝病毒标志物模式。结果6620例受检者中HBsAg阳性共597例，其中HBsAg在5ng／ml以下者共129例，占受检者总人数1．95％，占HBsAg阳性人群的21．61％。在129例低水平HBsAg病人的乙肝病毒血清标志物模式中，以HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性为主，共99例占76．74％；单纯HBsAg阳性者5例，占3．87％；另外还发现有1例HBsAg和HBsAb同时阳性的模式，其HgsAg浓度低于1ng／ml。结论在乙肝病毒感染的人群中，有相当比例的患者HBsAg的含量呈低水平状态，提高HBsAg检测的灵敏度有很重要的意义。结合其相关乙肝病毒标志物的检测，对确定上述人群有一定帮助。

110例乙肝病毒血清标志物与前S1抗原检测结果比较

目的 探讨HBV血清标志物与乙肝病毒前S1抗原检测结果的关系。方法 用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测常规的乙肝病毒血清标志物和乙肝病毒前S1抗原。结果 分析常规的HBV血清标志物不同组合模式发现 ,表面抗原阳性的模式中 ,HBV前S1抗原的检出率较高。

探究不同免疫检验法对乙肝病毒感染血清标志物检验的效果

目的研究乙肝病毒感染患者血清标志物检验中不同免疫检验法的应用效果。方法选取江苏省句容市人民医院2020年3月—2022年4月收治的207例乙肝病毒感染患者为研究对象,入组者均采集5 mL空腹静脉血,均采用化学发光法、酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定血清标志物,对比不同免疫检验法对血清标志物检验阳性率,分析不同免疫检验法对乙肝病毒感染诊断准确度、误诊率及漏诊率,并对比不同免疫检验法的检验成本。结果化学发光法的HBeAb、HBeAg、HBcAb、HBsAb阳性率(18.84%、27.05%、60.39%、20.77%)高于酶联免疫吸附法(16.91%、15.46%、57.97%、10.14%),差异有统计学意义(χ^(2)=87.138、77.383、7.149、110.535,P<0.05);酶联免疫吸附法的检验成本为(30.59±2.46)元,低于化学发光法(113.29±2.98)元,差异有统计学意义(t=304.367,P<0.05);化学发光法的误诊率、漏诊率低于酶联免疫吸附法,诊断准确率高于酶联免疫吸附法,差异有统计学意义(χ^(2)=21.102、38.776、26.886,P<0.05)。结论与酶联免疫吸附法比较,化学发光法用于乙肝病毒感染患者血清标志物检验可促进诊断准确度提高,以指导临床诊治。