精子携带的乙肝病毒基因在金黄地鼠胚胎中的复制与表达

背景与目的:乙型肝炎是危害人类健康的全球性疾病。本研究旨在探索乙肝病毒(HepatitisBvirus,HBV)通过精子垂直传播的可能性。方法:将金黄地鼠精子与pBR322-HBVDNA重组质粒进行共培养后,与金黄地鼠正常卵母细胞受精,取2-细胞胚分别制片和提取RNA,用荧光原位杂交(Fluorescenceinsituhybridization,FISH)、RT-PCR和免疫荧光检测技术研究精子携带的HBV基因在胚胎细胞中的复制与表达。结果:①FISH:用全长HBVDNA探针与128个2-细胞胚进行FISH,其中3个胚胎FISH结果阳性,每个胚胎的2个间期核上均有HBVDNA杂交信号;②RT-PCR:在检测样本中可见特异的HBxDNA阳性条带,阴性对照1(模板为灭菌水)和阴性对照2(未加反转录酶)均为阴性;③免疫荧光检测:2-细胞胚经血清封闭后,分成两组。一组作检测样本,另一组用PBS代替一抗(小鼠抗人HBsAg)作为阴性对照,检测样本中可见阳性免疫荧光信号,阴性对照未见信号。结论:以精子为载体,携带到卵内的HBV基因能够在胚胎细胞中复制和表达,提示HBV能够通过男性生殖细胞由父亲垂直传递给子代。

乙肝病毒基因分型与慢性乙型肝炎患者临床和病理的相关性研究

目的:了解本地区慢性乙型肝炎(CHB)患者乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布的特点,探讨基因型与临床及病理之间的关系。方法:采用荧光定量PCR方法检测120例CHB患者的HBV基因型,同时检测血清HBVDNA、HBV-M、肝功能等,并进行肝组织病理检查。结果:120例CHB患者B基因型43例,占35.83%,C基因型77例,占64.17%;在年龄、性别、肝功能及病情程度之间,B、C基因型差异均无显著性意义(P>0.05);C基因型患者的HBVDNA水平、HBeAg阳性率均显著高于B基因型(P<0.05),其肝组织炎症评分和纤维化评分也均明显高于B基因型(P<0.05)。结论:本地区CHB患者HBV基因型以C型为主,C型血清HBVDNA水平及HBeAg阳性率高于B型,C型引起的肝组织病变较B型严重。HBV基因分型对判断肝脏病变的严重程度和指导临床抗病毒治疗具有重要意义。

乙肝病毒基因型对武汉地区慢性乙型肝炎患者干扰素α-2b疗效的影响

目的:探讨武汉地区慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV基因型对干扰素α-2b疗效的影响。方法:以患者年龄、性别、基线指标进行匹配,按照基因分型结果分组,比较干扰素治疗48周时的应答情况。结果:在治疗48周结束时,基因B型HBV感染的患者完全应答率和HBeAg阴转率分别为43.8%(28/64)和68.2%(15/22),显著高于C型患者的完全应答率[22.2%(10/45)]和HBeAg阴转率[28.6%(4/14)]。结论:CHB患者HBV的基因型可影响干扰素α-2b的治疗效果,基因B型在治疗48周时应答情况优于基因C型。

江苏省泰州地区乙肝病毒基因型与基因变异的研究

目的 研究江苏省泰州地区乙肝病毒 (HBV)基因型分布和基因变异情况及其临床意义。方法 选择江苏省泰州地区HBV感染者 15 8例 ,其中乙肝携带者 2 9例 ,急性肝炎 (AC) 18例 ,慢性轻、中度肝炎 (CH) 5 6例 ,重型肝炎 (FHF) 2 2例 ,肝硬化 (LH) 2 1例 ,肝细胞癌 (HCC) 12例 ,采用基因芯片法进行基因分型和基因变异检测。结果 15 8例乙肝患者中B型 3 5例( 2 1 1% ) ,C型 12 1例 ( 76 6% ) ,B/C混合型 2例 ( 1 3 % )。 15 8例乙肝感染者中发生前C区基因 1896变异的 95例( 60 1% ) ,发生C基因启动子 (BCP) 1762变异的 93例 ( 5 8 9% ) ,发生HBV聚合酶 (P)基因区YMDD变异的 11例 ( 7 0 % )。结论 江苏省泰州地区存在乙肝病毒基因型B和基因型C ,其中C型占优势 ;乙肝患者基因组可有多种变异 ,BCP 1762变异、前C区 1896变异与肝病的严重程度有关 ;部分乙肝患者在拉米夫定治疗过程中产生耐药 ,可能和HBV(P)

人乙肝病毒基因在家蝇基因组中的整合

背景与目的 :探讨人乙肝病毒基因能否整合在家蝇基因组中。材料与方法 :构建人乙肝病毒基因质粒载体 pHBVneo ,以电转移方式在新生家蝇蝇卵中实施HBV基因转移 ,通过特异PCR反应鉴定HBV基因在转人乙肝病毒基因家蝇基因组中的整合情况。结果 :成功构建了人乙肝病毒基因质粒载体pHBVneo,并在转HBV基因家蝇基因组中检测到特异HBV基因存在。结论

乙肝病毒基因型与抗病毒治疗应答的相关性研究

目的 :旨在探讨乙肝病毒基因型对α 干扰素抗病毒治疗应答的影响。方法 :12 6例慢性HBVDNA阳性患者中B基因型 3 8例 ,C基因型 69例 ,B +C基因型 19例。所有患者均采用α 干扰素 3 0 0万单位 ,肌肉注射 ,每周 3次 ,共 2 4周。结果 :B基因型起始应答率 (81 6% )明显高于C基因型 (3 7 7% )及B +C基因型 (4 2 1% ) ,而持续应答率为 42 1% ,亦明显高于基因型C (14 5 % )及基因型B +C (15 8% ) (均P <0 0 0 1)。结论 :B基因型抗病毒治疗应答率高 。

聚合酶链反应检测献血者乙肝病毒基因

聚合酶链反应检测献血者乙肝病毒基因沈迎枫（江苏省血液中心，南京２１００４２）关键词献血员，聚合酶链反应，乙肝病毒基因目前不少城市血站仍主要采用ＥＩＡ检测ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＢｃ来筛选献血者。我们用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对５１例已采用ＥＩＡ检测ＨＢｓＡｇ...

乙肝病毒基因前C区突变与临床关系的研究

应用巢式ＰＣＲ结合碱性磷酸酶标记的ＡＳＯ探针杂交技术和ＤＮＡ测序技术对１２７例乙肝病毒（ＨＢＶ）感染后的血清标本进行了ＨＢＶ基因前Ｃ区突变的检测。结果发现：５３例为突变株感染，其中３２例为无症状携带者；１５例为慢性肝炎患者；肝硬化和肝癌患者各３例。在１２７例标本中发现４种新生突变：Ｉ１０Ｎ、Ｃ１２Ｗ、Ｃ１４Ｓ和Ｖ１７Ｆ，和４种不同数目核苷酸的插入片段。本研究认为ＨＢＶ基因前Ｃ区突变不一定导致病情加重。碱性磷酸酶标记的ＡＳＯ杂交技术安全可靠，特别适用于临床多样本的突变检测。

福建省闽西地区乙肝病毒基因分型与临床指标的相关性分析

目的探讨福建省闽西地区乙肝病毒基因分型与临床指标的相关性。方法挑选2019年2月—2020年2月于本院就诊的300例HBV感染者的血清标本数据资料进行整合分析,数据分析结果归入本次研究数据库。统计整合研究区组与HBV基因型检测的关联性数据进行数据分析。结果福建省闽西地区300例感染者基因分布是:B型151(50.33%)例,C型87(29.00%)例,非B非C型62(20.67%)例。福建省闽西地区C型与B型HBV-DNA定量检测结果差异有统计学意义t=2.517,P<0.012。C型HBV-DNA定量检测均值高于B型。C型乙型肝炎表面抗原定量值高于B型肝炎,χ^(2)=6.014,P<0.014。福建省闽西地区C型患者乙型肝炎E抗原定量测定值高于B型感染者,t=157.052,P<0.001。C型肝炎E抗原阳性率高于B型肝炎,χ^(2)=23.985,P<0.001。结论乙型肝炎病毒的分子流行病学特征,确定传播关系,具有重要意义。

血清HBsAg水平与乙肝病毒基因型的关系

目的探讨血清HBsAg水平与乙肝病毒基因型的关系。方法组间分类变量比较采用Fisner＇s精确检验，组间定量比较采用样本t检验，体外实验数据采用单项Fisner＇s-ANOVA方法对所选病例进行分析统计。结果乙肝病毒基因型对血清HBsAg水平下降有明确的影响。结论乙肝病毒基因型是血清HBsAg水平下降重要影响因素。

乙肝病毒基因上一个新的维甲素受体反应元件的发现

在对人乙肝病毒ADR - 1进行计算机序列检索时 ,发现在BamHI和HincII酶切位点内存在一保守的维甲素受体反应元件序列。用构建好的包含这一片段的乙肝病毒基因亚克隆 pBamHI -HincII -CAT2 与人维甲素A受体hRARα或人维甲素X受体hRXRα共转染人特异性肝癌细胞HepG2 ,通过相应配体ATRA或 9-cisRA的刺激 ,使细胞内氯霉素乙酰基转移酶活力较不加配体刺激的对照细胞明显增强。为了排除HepG2细胞染色体上整合的乙肝病毒的影响 ,将上述实验在人非特异性肝癌细胞Hela中重复 ,所得结果一致。进一步的体外蛋白阻滞分析 ,发现转染pBamHI -HincII -CAT2 及hRARα并加以ATRA刺激的Hela细胞核抽提物与含已知RARE的DNA结合最强。这一结合在有竟争结合物存在时条带消失。从而确证在该亚克隆上含有一新的维甲素受体反应元件。此元件序列极端保守 ,由重复序列 5’ -AGGTCT - 3’相隔 6个基构成。

乙肝病毒基因在转基因小鼠中高效表达的研究

采用传统育种方法,将整合含有人类乙肝病毒(HBV)基因的转基因小鼠通过近交和远交的育种方法,获得纯合子小鼠,收集由纯合子小鼠产生的双重杂合子小鼠及后代小鼠的血清,用竞争PCR联合产物酶联杂交技术定量测定血清中的HBVDNA量。结果表明:相对于单纯杂合子小鼠,纯合子小鼠的表达量增高不明显,而双重杂合子小鼠的表达量有明显提高。将双重杂合子再进行杂交传代,其后代也有增高趋势。

高效抗反转录病毒治疗对艾滋病合并乙肝病毒感染者体内乙肝病毒基因的影响

目的探讨高效抗反转录病毒治疗(HAART)对艾滋病(AIDS)合并乙肝病毒(HBV)感染者体内乙肝病毒基因(HBV-DNA)的影响。方法选取2016年1月~2017年6月我院收治的AIDS合并HBV感染的30例患者作为研究对象,所有患者给予一线HAART治疗方案,即拉米夫定(3TC)300mg,1次/d,富马酸替诺福韦(TDF)300mg,1次/d,依非韦仑(EFV)600mg,1次/d,疗程为48周,每3个月检测患者的肝功能和乙肝病毒载量。比较患者24、48周时抗HBV-DNA的总有效率;评估肝功能检测结果和不良反应发生情况;比较患者不同CD4+基线值实施HAART后48周免疫重建的总有效率。结果患者HAART48周时的抗HBV-DNA总有效率高于治疗24周时,差异有统计学意义(P<0.05)。20例患者的丙氨酸氨基转移酶(ALT)>40U/L,15例患者的天门冬氨酸氨基转移酶(AST)>50U/L,经药物保肝治疗,肝功能未发生持续损害。29例患者>200cell/μlCD4^+基线值HAART后48周的免疫重建总有效率高于≤200cell/μlCD4^+基线值HAART后48周,差异有统计学意义(P<0.05)。部分患者用药后出现不良反应,对症处理后中途无停药者。结论采用HAART方案能有效控制AIDS并HBV感染者体内的HBV-DNA和促进患者体内的免疫重建,为后续的临床研究提供了依据。

本刊常务编委莫曾南教授等发现新的抗乙肝病毒基因INTS10

本刊常务编委、著名泌尿外科专家莫曾南教授,军事医学科学院放射与辐射医学研究所的周钢桥研究员、张红星副研究员和贺福初院士,南京医科大学的沈洪兵教授以及中山大学肿瘤防治中心的曾益新院士等科研人员通力协作,首次发现整合因子复合体基因INTS10可通过RIG-I样受体信号通路激活机体的先天性免疫功能,发挥抑制乙肝病毒复制的作用。