血清低水平乙肝病毒表面抗原的临床意义分析

目的:探讨血清中低水平乙肝病毒表面抗原(HBsAg)与乙肝病毒(HBV)DNA载量及肝功能指标的关系。方法:选取2020年6月—2021年12月在宁波市镇海区人民医院就诊的低水平HBsAg患者408例,检测所有纳入患者的乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝病毒e抗体(抗-HBe)及乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)、HBV DNA载量检测及相关肝功能指标。结果:408例低水平HBsAg患者中,抗-HBe和抗-HBc均为阳性,且抗-HBs和HBeAg均为阴性的患者占比最高,共360例(88.24%);HBV DNA阳性共82例(20.10%),不同浓度HBsAg患者HBV DNA阳性率差异有统计学意义(P=0.041),HBsAg浓度在31~40 COI时,HBV DNA的阳性率最高(30.00%);不同浓度HBsAg时HBV DNA载量差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度HBsAg及HBV DNA对应的肝功能检测结果差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:低水平HBsAg患者中,抗-HBe和抗-HBc均为阳性,且抗-HBs和HBeAg均为阴性的患者占比最高;HBsAg浓度不同时,HBV DNA阳性率也不同,但并不影响HBV DNA载量;HBsAg浓度及HBV DNA载量不同并不影响患者的肝功能。

乙肝病毒表面抗原阳性者的体征及预防治疗方法研究

本文分析乙型病毒肝炎表面抗原(HBsAg)阳性者体征特点,并分析防治乙肝手段。方法 研究对象,82例,我院就诊,HBsAg检测者,时间选取2019.12.10/2022.11.30(开始/结束),研究对象夫妻其中一方为HBsAg阳性者,对其开展防治干预,干预时间6个月,观察HBsAg阳性者体征、治疗效果及HBsAg阴性者乙肝感染率。结果 (1)HBsAg阳性者体征:HBsAg阳性者/HBsAg阴性者,年龄、性别占比情况对比,差异不显(P>0.05)。HBsAg阳性者单项HBsAg占比高(39.02%),其次合并抗—HBc占比较高(21.95%)。(2)治疗效果:经过综合治疗后,HBsAg阳性者乙肝病毒的脱氧核糖核酸(乙肝病毒基因,HBV—DNA)转阴率较之治疗前更高(值=64.174),差异显著(P<0.05)。(3)HBsAg阴性者乙肝感染率:经过综合干预后,HBsAg阴性者乙肝感染率较之干预前无差异(值=1.012,P>0.05)。结论 HBsAg阳性者同HBsAg阴性者在年龄、性别等方面无明显差异,HBsAg阳性者以单一HBsAg(+)为主,采取综合防治手段,可以有效提高阳性者HBV—DNA转阴率,预防阴性者出现乙肝病毒感染,可推广。

MEIA法测定乙肝病毒表面抗原的评价及临床应用

目的 对微粒子酶免疫测定法(MEIA法)检测乙肝病毒表面抗原进行方法学评价并研究低含量乙肝表面抗原人群阳性检出率。方法 采用美国雅培公司的AXSYM型化学发光仪对乙肝病毒表面抗原卫生部质控物、高浓度乙肝病毒表面抗原标本进行稀释测定,同时与ELISA法检测乙肝表面抗原进行比较;对低浓度(HBsAg≤1μg/L)的标本进行中和确证试验与采用PCR-ELISA法定量测定HBV DNA。结果 微粒子化学发光法检测乙肝病毒表面抗原具有较高灵敏度,达0.1μg/L;有较好的重复性和特异性;低浓度(HBsAg≤1μg/L)在人群中分布率为0.53％。结论 微粒子酶免疫法对提高低含量乙肝表面抗原阳性检出率具有重要意义。

中国肝癌死亡率和乙肝病毒表面抗原携带率的地理分布研究

目的描绘中国肝癌死亡水平地理分布图(未包括香港、澳门和台湾地区)和乙肝病毒表面抗原(HBsAg)携带水平地理分布图,描述中国肝癌死亡水平和HBsAg携带水平的地理分布特征。研究肝癌死亡水平和HBsAg携带水平之间的关系。方法使用全国疾病监测系统的死亡监测数据和全国肝炎血清学流调数据,分别绘出中国疾病监测点的肝癌死亡水平和各省HBsAg携带水平的地理图,比较两者的地理分布,并对各省肝癌死亡率和HBsAg携带率进行相关性检验。绘制监测点不同性别人群的肝癌死亡水平图,揭示不同性别人群的肝癌死亡率和HBsAg携带率的分布特点。结果中国肝癌死亡率和HBsAg携带率均表现为男性高于女性,肝癌死亡率分布特点为东高西低即东部沿海地带为高发区,西部(西北、西南)为低发区,HBsAg携带率的高发区为东南沿海一带以及内陆的西藏和宁夏。两者的地理分布特点有相似性,统计学结果显示肝癌死亡率和HBsAg携带率存在正相关关系。结论中国HBsAg携带率的高低和肝癌死亡率的水平存在相关关系。

PEG沉淀结合层析分离重组乙肝病毒表面抗原

应用聚乙二醇(PEG)沉淀结合层析技术纯化乙肝病毒表面抗原(HBsAg),对PEG浓度、pH值、离子强度等影响PEG沉淀的因素进行了正交实验研究.结果表明,浓度为0.12g/mL的PEG6000在4℃,pH9.0条件下沉淀HBsAg纯化效果比较理想,纯化倍数达3.7,回收率96.8%,有效地去除了生物大分子杂质和牛血清白蛋白(BSA),PEG在后续的凝胶过滤中可以除去,整个工艺的回收率可提高到41%.

乙肝病毒表面抗原基因在人参细胞中的表达

为获得表达乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞系,构建携带HBsAg基因的植物细胞表达载体pBIBSa,采用以农杆菌LBA4404感染的方法,经G418筛选后得到13株具有抗性的人参细胞。提取基因组DNA进行PCR反应,其中8株得到约700bp的HBsAg基因片段;提取mRNA进行RT-PCR反应,其中6株得到约700bp的HBsAg基因片段;用ELISA方法检测HBsAg,6株均为阳性。每克人参细胞中最高含HBsAg184ng,占细胞可溶性蛋白的0.009%。免疫组化切片染色显示HBsAg主要分布在细胞膜上,少量位于细胞核中。这些结果表明人参细胞整合了HBsAg基因,并能稳定表达HBsAg。

乙肝病毒表面抗原基因在花生中的遗传转化及免疫原性检测

首次用花生半胚作为外植体,与农杆菌EHA105(含质粒p1301HBs)共培养5d,再生培养基中通过加入潮霉素进行抗性筛选,得到抗潮霉素的芽,经芽的伸长、诱导生根获得转化植株。经PCR、PCR-Southern杂交、Southern点杂交等分子检测,证实目的基因已整合到花生基因组中,ELISA检测证实了在花生中表达的HBsAg具有较好的活性。经初步定量,花生小芽的蛋白初提液中可溶性蛋白含量1.044g/L,HBsAg小蛋白的含量约占总可溶性蛋白的0.032%,每克转化植株小芽鲜重含HBsAg小蛋白约2.4×10-7g。转基因花生植株初提重组蛋白经HPLC纯化、浓缩后,注射初免一次的小鼠,有明显的特异性抗体产生。口服饲喂已免疫但抗体下降至0.025(HBsAbELISAD值)Balb/c小鼠,发现有较强的抗体回升,达3.54,表明转基因花生疫苗可以加强口服免疫。

表达乙肝病毒表面抗原人参细胞系统的建立

目的建立乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞表达系统。方法构建含有HBsAg基因的植物细胞表达载体质粒pBIBSb。采用农杆菌感染人参细胞的方法,经农杆菌培养、农杆菌与受体细胞共培养、受体细胞的脱菌培养以及转化体细胞的选择培养后,筛选在G418抗生素培养基上正常生长的细胞株。应用ELISA方法检测抗性细胞株的HBsAg表达;提取基因组DNA进行PCR扩增反应。结果质粒pBIBSb的酶切结果正确。经G418抗生素筛选得到8株正常生长的细胞株,其中5株能够表达HBsAg,提取基因组DNA进行PCR扩增反应,得到大小约700 bp的扩增片段。结论获得了整合HBsAg基因,并能够稳定表达HBsAg的人参细胞表达系统。

小鼠重组乙肝病毒表面抗原鼻腔黏膜免疫效果评价

目的评价小鼠重组乙肝病毒表面抗原(HBsAg)鼻腔黏膜免疫效果,寻找非注射乙肝免疫途径。方法 Balb/c小鼠分别经鼻腔、舌下及肌注给予重组HBsAg免疫3次,以支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清抗HBsAg抗体水平评价3种途径的免疫效果。结果经鼻腔免疫小鼠BALF可检测到IgA抗体,提示产生黏膜免疫;与肌注免疫类似,经鼻腔免疫小鼠血清IgG滴度大于1:500,提示产生体液免疫。结论重组HBsAg经鼻腔免疫小鼠可同时产生体液免疫和黏膜免疫,提示鼻腔黏膜免疫可能是有效的非注射乙肝免疫途径。

乙肝病毒表面抗原基因启动子Ⅱ的结构及调节研究

0引言 乙型肝炎病毒(HBV)为含有一段单股区的双链环状DNA病毒,属嗜肝DNA病毒科,其基因组结构紧密,可分为结构基因序列和调节基因序列两部分,二者可具有相互重叠的特点.HBV基因的负链核苷酸序列中,至少有4个开放读码框(open reading frame,ORF),包括编码外膜蛋白的S基因区,编码核衣壳蛋白的C基因区,编码聚合酶的P基因区和调节病毒基因转录水平的X基因区,4种ORF分别有各自的启动子.HBV的外膜蛋白能使病毒由感染的细胞分泌,并能附着和侵入新的细胞;同时其也是引起宿主保护性应答的免疫原表位[1-6].因此,作为指导S基因组RNA转录的SP启动子序列,在HBV的生活周期中,具有较为重要的作用.

乙肝肝硬化患者血清乙肝病毒表面抗原定量水平的研究

目的分析不同Child-pugh分级的乙肝肝硬化患者血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg)定量检测水平及其在各组间与HBV DNA含量之间的相关性。方法收集乙肝肝硬化患者血清,其中Child-pugh A级38例,B级46例,C级35例,采用雅培化学发光法进行HBsAg定量测定,采用荧光PCR定量法检测HBV DNA含量。结果 HBsAg定量值分别为Child-pugh A级[997.70(146.00～1717 12)IU/mL],Child-pugh B级[1158.78(345.82～1889.93)IU/mL],Child-pugh C级[613.76(120.78～1528 77)IU/mL],三组比较差异无统计学意义(P=0.464)。HBsAg定量与HBV DNA相关性分析:HBsAg定量水平、HBV DNA含量在乙肝肝硬化患者总体中呈正相关(r=0.353,P=0.000),其中Child-pugh A级相关性最高(r=0.410,P=0.011),Child-pugh B级次之(r=0.366,P=0.012),Child-pugh C级则无相关性(r=0.293,P=0.088)。在各组中HBsAg定量水平与ALT、AST和TBIL均无相关性。结论不同Child-pugh分级的乙肝肝硬化患者之间血清HBsAg定量水平无差异;HBsAg定量水平与HBV DNA在Child-pugh A级、B级组具有正相关性,C级组无相关性。

36175例高考学生血清谷丙转氨酶与乙肝病毒表面抗原检测结果分析

目的了解近几年高考体检中学生谷丙转氨酶(ALT)及乙肝病毒表面抗原(HBsAg)结果变化状况。方法用ELISA法进行血清HBsAg检测,ALT采用速率法测定,40U/L以上者为异常。结果36175名学生HBsAg阳性,阳性率6.3%,并呈逐年下降的趋势,各年度间差异比较有显著性意义(P<0.05);其中城区学校学生HBsAg阳性率5.54%,镇区学校学生HBsAg阳性率7.03%,差异有显著性意义(P<0.05)。结论要加强儿童乙型肝炎疫苗接种,尤其是镇区学校和外来工子女学生。

电化学发光测定低浓度乙肝病毒表面抗原的临床意义

低浓度乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）是指HBsAg的浓度小于5ng／mL。低HBsAg是判断乙型肝炎感染的重要依据之一；其在人群的感染性疾病诊断中已越来越引起临床实验室及流行病学专家的重视，低浓度HBsAg的检测与报告给临床实验室带来了新的挑战。

以提高乙肝病毒表面抗原表达量和免疫原性为目的的番茄果实特异表达载体的构建

为了提高乙肝病毒表面抗原基因在番茄果实中的表达量和免疫原性,采用克隆的E8番茄果实特异表达启动子和乙肝病毒表面抗原M蛋白基因构建了植物表达载体pBIES2,及只含有乙肝病毒表面抗原S蛋白的表达载体pBIES,并将它们分别导入根癌农杆菌LBA4404中。最后对该载体的优越性进行了讨论。

转乙肝病毒表面抗原基因烟草发根的获得

构建了乙肝病毒表面抗原基因(HBsAg)植物表达载体,通过冻融法将HBsAg基因转入到发根农杆菌LBA1314中,采用叶盘法将HBsAg基因导入到烟草中,获得了转基因烟草发根.对转基因烟草发根的GUS检测结果表明:转HBsAg基因烟草发根可以染成蓝色,而非转基因烟草的根没有染色反应.这说明gus基因在转HBsAg基因烟草发根获得了表达.

乙肝病毒表面抗原阳性患者及抗病毒治疗后PCR HBV-DNA检测的临床应用研究

目的对乙肝两对半检测出乙肝病毒表面抗原阳性[HBsAg(+)]患者和抗病毒治疗后复查的病人作乙肝病毒DNA(HBV-DNA)聚合酶链式反应(PCR)检测,根据其检测结果,对两者关系进行研究,探讨HBV-DNA PCR检测在乙肝病毒检测中的应用价值。方法采用酶联免疫吸附(ELSIA)分析法和HBV-DNA PCR免疫荧光定量检测技术检测。结果在ELSIA检测后HBsAg(+)的530例患者中,HBV-DNA PCR阳性者为432例,阳性率达到81.50;59例复查HBV-DNA PCR患者中,复查结果HBV-DNA PCR(-)者占32.20。结论对HBsAg(+)的患者进行常规性的HBV-DNA PCR检测,可以更好地了解其体内乙肝病毒复制水平,确定其是否需要进行抗病毒治疗,对正在进行抗病毒治疗的患者,可以跟踪了解其病情的归转和预后,具有重要的临床指导意义。

马铃薯X病毒载体介导的乙肝病毒表面抗原在烟草中的表达

目的:利用马铃薯X病毒(PVX)表达载体,在本生烟草中表达乙肝病毒表面抗原(HBsAg),为生产植物疫苗提供一条快速高效的新途径。方法:将HBsAg基因克隆进PVX表达载体,电转化农杆菌,侵染本生烟的叶片、茎和根。结果与结论:采用ELISA检测重组HBsAg的表达水平,SDS-PAGE确认其大小,Western印迹分析表明重组蛋白可与鼠抗HBsAg单克隆抗体发生特异性反应。HBsAg蛋白表达量在幼小叶片中远高于已伸展的叶片,在叶片中的表达量远高于茎根;表达量会随侵染后时间发生一定的变化,但因植株而异;重组蛋白在可溶性蛋白中的含量最高可达796.81 ng/mg。

乙肝病毒表面抗原大蛋白的检测与分析

[目的]检测乙肝病人血液中乙肝病毒表面抗原大蛋白(LHBs),与HBV DNA结果比较,探讨LHBs方法的可靠性和实用性。[方法]用荧光定量PCR法检测慢性HBV病人血中HBV DNA,ELISA法检测LHBs,时间分辨荧光免疫法测定HBV标志物模式。[结果]96份HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性标本,其HBV DNA与LHBs阳性率分别为97.9%和93.8%;28份HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性标本,HBV DNA与LHBs检出率分别为57.1%和64.3%,两法的一致度达96.4%(P>0.05)。[结论]LHBs和HBV DNA的检测率有很好的相关性,其评估HBV的复制与HBVDNA检测具有同等意义。LHBs检测仪器设备要求低、操作简单,多数医疗机构都能开展,对不能开展HBV DNA检测的基层医院临床意义更大。